√葡萄糖的作用：增加溶液的粘度，使悬浮后的大肠杆 菌不会很快沉积到管底；维持渗透压及防止DNA受机械 剪切力作用而降解。 √EDTA是Ca和Mg等二价金属离子的螯合剂，在溶液！ 中加入EDTA,是要把大肠杆菌细胞中的二价金属离子 都螯合掉。从而起到抑制DNase对DNA的降解和抑制 微生物生长的作用
✓葡萄糖的作用：增加溶液的粘度，使悬浮后的大肠杆 菌不会很快沉积到管底；维持渗透压及防止DNA受机械 剪切力作用而降解。 ✓EDTA是Ca和Mg等二价金属离子的螯合剂，在溶液I 中加入EDTA，是要把大肠杆菌细胞中的二价金属离子 都螯合掉。从而起到抑制DNase对DNA的降解和抑制 微生物生长的作用
3、加入200溶液川，加盖后轻轻快速颠倒离心管数 次混匀（千万不要振荡），冰浴5min。 溶液Ⅱ的作用是使细菌细胞破裂释放DNA,同时在碱 性条件下DNA发生变性。 组成： 0.2 N NaOH、1%SDS 这个用的时候需现配。要新配置溶液Ⅱ是为了避免 NaOH接触空气中的CO2而减弱了碱性
3、加入200μl溶液 II，加盖后轻轻快速颠倒离心管数 次混匀（千万不要振荡），冰浴5 min 。 溶液Ⅱ的作用是使细菌细胞破裂释放DNA，同时在碱 性条件下DNA发生变性。 组成： 0.2N NaOH、1% SDS 这个用的时候需现配。要新配置溶液Ⅱ是为了避免 NaOH接触空气中的 CO2而减弱了碱性
NaOH是最佳溶解细胞的试剂。不管是大肠杆菌还是 哺乳动物细胞，碰到了碱都会在瞬间溶解，这是由于 细胞膜发生了从bilayer（双层膜)结构向micelle（微 囊)结构的相变化。 核酸在pH大于5，小于9的溶液中，是稳定的。但当 pH>12或pH<3时，就会引起双链之间氢键的解离而 变性。 用不新鲜的0.4 N NaOH,即便有SDS也无法有效溶解 大肠杆菌
NaOH是最佳溶解细胞的试剂。不管是大肠杆菌还是 哺乳动物细胞，碰到了碱都会在瞬间溶解，这是由于 细胞膜发生了从bilayer（双层膜）结构向micelle（微 囊）结构的相变化。 核酸在pH大于5，小于9的溶液中，是稳定的。但当 pH＞12或pH＜3时，就会引起双链之间氢键的解离而 变性。 用不新鲜的0.4 N NaOH，即便有SDS也无法有效溶解 大肠杆菌
十二烷基磺酸钠(SDS)是一种阴离子表面活性剂，它既能 使细菌细胞裂解，又能使一些蛋白质变性。用SDS处理细菌 后，会导致细菌细胞破裂，释放出质粒DNA和染色体DNA。 主要作用是： A、溶解细胞膜上的脂质与蛋白，从而破坏细胞膜。 B、解聚细胞中的核蛋白。 C、能与蛋白质结合成为蛋白质复合物，使蛋白质变性而沉 淀下来。 SDS能抑制核糖核酸酶的作用，所以在接下来的提取过程必 须把它去除干净，以便下一步试验的更好进行
十二烷基磺酸钠（SDS）是一种阴离子表面活性剂，它既能 使细菌细胞裂解，又能使一些蛋白质变性。用SDS处理细菌 后，会导致细菌细胞破裂，释放出质粒DNA和染色体DNA 。 主要作用是： A、溶解细胞膜上的脂质与蛋白，从而破坏细胞膜。 B、解聚细胞中的核蛋白。 C、能与蛋白质结合成为蛋白质复合物，使蛋白 质变性而沉 淀下来。 SDS能抑制核糖核酸酶的作用，所以在接下来的提取过程必 须把它去除干净，以便下一步试验的更好进行
4、加入150μl预冷溶液l,轻轻颠倒数次混匀 (10s),置于冰浴15min。 溶液Ⅲ：钾离子浓度为3mol/L,醋酸根离子浓度为5mol/L pH4.8的乙酸钾溶液是为了把抽提液的pH调至中 性，从而使变性的质粒DNA复性，且稳定存在。 圈
4、加入150 μl预冷溶液III，轻轻颠倒数次混匀 （10s），置于冰浴15 min 。 溶液Ⅲ：钾离子浓度为3mol/L，醋酸根离子浓度为5mol/L. pH4.8的乙酸钾溶液是为了把抽提液的pH调至中 性，从而使变性的质粒DNA复性，且稳定存在