4.高效液相色谱法的分类 2.离子交换色谱法 固定相:离子交换树脂,如苯乙烯,二乙烯基苯交联形成的 聚合物骨架,在表面末端芳环上接上羧基、磺酸基(阳离子 交换树脂)或季按基(阴离子交换树脂)。 原理:树脂上可电离离子与流动相中具有相同电荷的离子及 被测组分的离子进行可逆交换,根据各离子与离子交换集团 具有不同的电荷吸引力而分离。 应用:食品硝酸盐、亚硝酸盐、水中氟、氯等离子分离 检测的国家标准方法
10 20 0 0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 9.0 10.0 11.0 12.0 13.0 14.0 min 4.高效液相色谱法的分类 30 40 mV检测器 A:214nm 2. 离子交换色谱法 固定相:离子交换树脂,如苯乙烯,二乙烯基苯交联形成的 聚合物骨架,在表面末端芳环上接上羧基、磺酸基 (阳离子 交换树脂)或季铵基(阴离子交换树脂)。 原理:树脂上可电离离子与流动相中具有相同电荷的离子及 被测组分的离子进行可逆交换,根据各离子与离子交换集团 具有不同的电荷吸引力而分离。 应用:食品硝酸盐、亚硝酸盐、水中氟、氯等离子分离 检测的国家标准方法
4.高效液相色谱法的分类 3.离子对色谱法(偶离子色谱法) 原理:根据被测组分离子与离子对试剂离子形成中性的离子 对化合物后,在非极性固定相中溶解度增大,从而使其分离 效果改善。 被测组分保留时间与离子对性质、浓度、流动相组成及 其pH值、离子强度有关。 应用:分析离子强度大的酸碱物质
10 20 0 0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 9.0 10.0 11.0 12.0 13.0 14.0 min 4.高效液相色谱法的分类 30 40 mV检测器 A:214nm 3. 离子对色谱法(偶离子色谱法) 原理:根据被测组分离子与离子对试剂离子形成中性的离子 对化合物后,在非极性固定相中溶解度增大,从而使其分离 效果改善。 被测组分保留时间与离子对性质、浓度、流动相组成及 其pH值、离子强度有关。 应用:分析离子强度大的酸碱物质
4.高效液相色谱法的分类 4.分子排阻色谱法 固定相:具一定孔径的多孔性填料 流动相:溶解样品的溶剂 原理:小分子量的化合物可以进入孔中,滞留时间长;大分 子量的化合物不能进入孔中,直接随流动相流出。它是利用 分子筛对分子量大小不同的各组分排阻能力的差异来完成分 离。 应用:分离高分子化合物,如组织提取物、多肽、蛋白质、 核酸等
10 20 0 0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 9.0 10.0 11.0 12.0 13.0 14.0 min 4.高效液相色谱法的分类 30 40 mV检测器 A:214nm 4. 分子排阻色谱法 固定相:具一定孔径的多孔性填料 流动相:溶解样品的溶剂 原理:小分子量的化合物可以进入孔中,滞留时间长;大分 子量的化合物不能进入孔中,直接随流动相流出。它是利用 分子筛对分子量大小不同的各组分排阻能力的差异来完成分 离。 应用:分离高分子化合物,如组织提取物、多肽、蛋白质、 核酸等
4.高效液相色谱法的分类 5.液液分配色谱法 分类:正相色谱法(NPC)和反相色谱法(RPC)。 固定相:将特定的液态物质涂于或化学键合于担体表面。 正相色谱法:极性固定相,如聚乙二醇、氨基与氰基键合相; 流动相为相对非极性的疏水性溶剂(烷烃类如正己烷、环己 烷),加入乙醇、异丙醇、四氢呋喃、三氯甲烷等易调节组 分的保留时间。 应用:分离中等极性和极性较强的化合物(如酚类、胺类 羰基类及氨基酸类等)
10 20 0 0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 9.0 10.0 11.0 12.0 13.0 14.0 min 4.高效液相色谱法的分类 30 40 mV检测器 A:214nm 5. 液液分配色谱法 分类:正相色谱法(NPC)和反相色谱法(RPC)。 固定相:将特定的液态物质涂于或化学键合于担体表面。 正相色谱法:极性固定相,如聚乙二醇、氨基与氰基键合相; 流动相为相对非极性的疏水性溶剂(烷烃类如正己烷、环己 烷),加入乙醇、异丙醇、四氢呋喃、三氯甲烷等易调节组 分的保留时间。 应用:分离中等极性和极性较强的化合物(如酚类、胺类、 羰基类及氨基酸类等)
4.高效液相色谱法的分类 5.液液分配色谱法 反相色谱法:非极性固定相,如C18、C8;流动相为水或缓冲 液,加入甲醇、异丙醇、丙酮、四氢呋喃等与水互溶的有机 试剂以调节保留时间。 应用:适用于分离非极性和极性较弱的化合物
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