细胞损伤与保护实验(三) 凋亡相关基因-Bax 在不同细胞中表达产物差异检测
凋亡相关基因－Bax 在不同细胞中表达产物差异检测 细胞损伤与保护实验（三）
原理 免疫细胞化学(免疫组化)是将抗原、抗体 间的免疫反应引入细胞标本,并通过对其所带有 的特殊标记物的显示,籍以对细胞内某抗原或抗 体作定性、定位以及定量检测 亲和组织化学:则将一些具有双价或多价结 合力的物质(生物素),应用于免疫组化,使得抗原 抗体的亲和力比免疫组化高出100万倍。其更具高 灵敏性和高特异性
原 理 免疫细胞化学（免疫组化）是将抗原、抗体 间的免疫反应引入细胞标本，并通过对其所带有 的特殊标记物的显示，籍以对细胞内某抗原或抗 体作定性、定位以及定量检测。 亲和组织化学：则将一些具有双价或多价结 合力的物质(生物素)，应用于免疫组化，使得抗原 抗体的亲和力比免疫组化高出100万倍。其更具高 灵敏性和高特异性
原理 Bax ■凋亡相关基因 Bcl-2家族成员 细胞损伤时其蛋白构象发生改变(寡聚化) 作用线粒体膜,使其膜通透性增加,释放 Cytc,细胞凋亡
原 理 Bax—— ◼ 凋亡相关基因 ◼ Bcl-2家族成员 ◼ 细胞损伤时其蛋白构象发生改变（寡聚化） ◼ 作用线粒体膜，使其膜通透性增加，释放 Cytc，细胞凋亡
原理 本次实验以Bax构象蛋白为抗原,用小 鼠特异性抗体(一抗)与其结合,再用生 物素标记的羊抗小鼠抗体(二抗)与前者 结合,形成了生物素复合物 此复合物与SABC作用,使得检测物被 放大,最后在显色剂DAB的作用下,Bax构 象蛋白显色(褐色)
原 理 本次实验以Bax构象蛋白为抗原，用小 鼠特异性抗体（一抗）与其结合，再用生 物素标记的羊抗小鼠抗体（二抗）与前者 结合，形成了生物素复合物。 此复合物与SABC作用，使得检测物被 放大，最后在显色剂DAB的作用下，Bax构 象蛋白显色（褐色）
器材与试剂 仪器:移液枪、枪头、滴管、显微镜 材料:培养细胞 试剂:甲醇、PBS、封闭液、一抗、二抗、 SABC、DAB、0.3%H2O2-PBS
器材与试剂 仪器：移液枪、枪头、滴管、显微镜 材料：培养细胞 试剂：甲醇、PBS、封闭液、一抗、 二抗、 SABC、DAB 、0.3％H2O2 -PBS