遗传病的分析5 DNA扩增产物的鉴定
遗传病的分析5 DNA扩增产物的鉴定
限制性内切酶酶切技术 琼脂糖凝胶电泳技术
限制性内切酶酶切技术 琼脂糖凝胶电泳技术
限制性内切酶酶切技术
一、限制性内切酶酶切技术
原理 限制性内切酶大多由大肠杆菌中提取纯化 得到,能特异性识别和切割双链DNA分子 中的特异序列(一般识别4-6个核苷酸序 列) 由于大多数内切酶具绝对的位点特异性 因此可以选择合适的内切酶切割扩增产物 通过片段大小鉴定基因是否有缺失或缺陷
原 理 ▪ 限制性内切酶大多由大肠杆菌中提取纯化 得到，能特异性识别和切割双链DNA分子 中的特异序列（一般识别4－6个核苷酸序 列） ▪ 由于大多数内切酶具绝对的位点特异性， 因此可以选择合适的内切酶切割扩增产物， 通过片段大小鉴定基因是否有缺失或缺陷
原理 本实验使用限制性内切酶(LweI), 酶切位点: 5… GCATC(N)5…3 3..CGTAG(N)9T.5 正常人样品具有酶切位点,能够被酶切开, 分成2个片断;而病人组G则被A替代,酶切 位点丧失,不能被酶所切动,所以还是1个 片断
原 理 本实验使用限制性内切酶（Lwe I） ， 酶切位点： 5′….GCATC(N)5↓…3′ 3′….CGTAG(N)9↑….5′ 正常人样品具有酶切位点，能够被酶切开， 分成2个片断；而病人组G则被A替代，酶切 位点丧失，不能被酶所切动，所以还是１个 片断