LOGO 遗传病的分析3 人类淋巴细胞培养 和染色体标本的制备
LOGO 人类淋巴细胞培养 和染色体标本的制备 遗传病的分析3
原理 在细胞的生长周期中,中期染色体的长短、 大小、恒定性正适合我们对其进行分析、研 究 因此利用人工的方法,使大部分分裂细胞处 于中期而不向后期转化,并获得之,经处理, 制片后观察分析
原 理 ▪ 在细胞的生长周期中，中期染色体的长短、 大小、恒定性正适合我们对其进行分析、研 究。 ▪ 因此利用人工的方法，使大部分分裂细胞处 于中期而不向后期转化，并获得之，经处理， 制片后观察分析
器材与试剂 器材 人外周血5ml。 培养箱、普通光学显微镜、离心机、水浴箱、天 平等 试管架、刻度离心管、滴管和滴头、酒精灯、冰 载玻片等
器材与试剂 器材 ： ▪ 人外周血5ml。 ▪ 培养箱、普通光学显微镜、离心机、水浴箱、天 平等。 ▪ 试管架、刻度离心管、滴管和滴头、酒精灯、冰 载玻片等
器材与试剂 试剂: 肝素 含10%小牛血清RPM1640 植物血凝素(PHA) 秋水仙素(5微克/毫升) 0.075MKCl, 固定液(甲醇/冰乙酸3:1) Giemsa染液
器材与试剂 试剂： ▪ 肝素 ▪ 含10%小牛血清RPMI1640 ▪ 植物血凝素（PHA） ▪ 秋水仙素（5微克/毫升） ▪ 0.075MKCl， ▪ 固定液（甲醇/冰乙酸3:1） ▪ Giemsa染液
操作 1、采血:取血3-5m1,肝素抗凝。 2、接种:5m培养液中加入0.3-0.5m全血并摇匀, 每份血样接种2瓶,置37℃,培养72h 3、秋水仙素处理:终止培养前1.5-2h加秋水仙素 (终浓度为0.07ugm1),混匀,37℃继续培养。 4、收集细胞:将培养细胞混匀吸入刻度离心管(2 瓶培养物吸入1支刻度离心管内),1500r/min离 心,10min。 5、低渗处理:弃上清,加8m0.075MKC1溶液,混 匀,置37℃水浴20min
操 作 1、采血： 取血3-5ml,肝素抗凝。 2、接种： 5ml培养液中加入0.3-0.5ml全血并摇匀， 每份血样接种2瓶，置37℃,培养72h。 3、秋水仙素处理：终止培养前1.5-2h加秋水仙素 （终浓度为0.07 ug/ml），混匀，37℃继续培养。 4、收集细胞 ：将培养细胞混匀吸入刻度离心管（2 瓶培养物吸入1支刻度离心管内），1500r/min离 心，10min。 5、低渗处理：弃上清，加8ml 0.075M KCl溶液，混 匀，置37℃水浴20min