N端 DNA-pol I C端 木瓜蛋白酶 小片段 大片段(Klenow片段) 323个氨基酸 604个氨基酸 *5″》33核酸外切酶活性 *DNA聚合酶活性 *3》5"核酸外切酶活性 ·Klenow片段是实验室合成DNA,分子 生物学研究中常用的工具酶。 (p223) 26
26 323个氨基酸 小片段 * 5′′ →→ 3′3′核酸外切酶活性 大片段(Klenow 片段) 604个氨基酸 * DNA聚合酶活性 * 3′3′ →→ 5′′核酸外切酶活性 N 端 C 端 木瓜蛋白酶 DNA-pol Ⅰ • Klenow片段是实验室合成DNA,分子 生物学研究中常用的工具酶。 (p223)
2.DNA-polⅡ(120kD) 含一条多肽链,但只在无polI及polⅢ的 情况下才起作用,真正的功能尚不清楚。 5”→3聚合酶活性 催化活性 3→5核酸外切酶活性 ·DNA-polIⅡ基因发生突变,细菌依然能存活。 ·它参与DNA损伤的应急状态修复。 27
27 2. DNA-pol Ⅱ(120kD) • DNA-pol II基因发生突变,细菌依然能存活。 • 它参与DNA损伤的应急状态修复。 含一条多肽链,但只在无pol I 及pol Ⅲ的 情况下才起作用,真正的功能尚不清楚。 5′′→3′′聚合酶活性 3′′→5′′核酸外切酶活性 催化活性
3.DNA-polⅢ (250kD) DNA polⅢ每分 钟可催化多至105 个核苷酸聚合。 核心酶 图10-8E.coli DNA-polⅢ的组成 作用: (不对称二聚体) 是原核生物复制延长中真正起催化作用的酶。 (p222) 28
28 是原核生物复制延长中真正起催化作用的酶 。 3. DNA-pol Ⅲ (250kD) DNA pol Ⅲ 每 分 钟 可催化 多 至10 5 个核 苷 酸 聚 合 。 图10-8 E.coli DNA-pol Ⅲ 的组成 作用: (不对称二聚体 (不对称二聚体 ) (p222) 核心酶
(二)真核生物的DNA聚合酶 是 DNA-polc起始引发,引物酶活性。 DNA-pol 阝低保真度的复制。 DNA-polY参与线粒体DNA复制。 DNA-pol延长子链的主要酶,解螺旋酶活性。 DNA-polE在复制过程中起校读、修复和填补 缺口的作用。 (p223) 29
29 (二)真核生物的DNA聚合酶 DNA-pol α 起始引发,引物酶活性。 DNA-pol β 低保真度的复制。 DNA-pol γ 参与线粒体DNA复制。 DNA-pol δ 延长子链的主要酶,解螺旋酶活性 。 DNA-pol ε 在复制过程中起校读、修复和填补 缺口的作用。 (p223)
真核生物的DNA聚合酶 (p223) DNA-pol a B Y 分子量(kD) 16.5 4.0 14.0 12.5 25.5 C汉司a 5→3聚合活性 中 高 高 高 3L→5核酸外切 + + 酶活性 起始引 低保 线粒体 延长子 填补引物 功能 发,引真度 DNA复 链的主 空隙,切 物酶活 的复 制 要酶, 除修复, 性 制 解螺旋 重组 酶活性
30 真核生物的DNA聚合酶 填补引物 空隙,切 除修复, 重组 延长子 链的主 要酶, 解螺旋 酶活性 线粒体 DNA复 制 低保 真度 的复 制 起始引 发,引 物酶活 性 功能 - - + + + 3′′→5′′核酸外切 酶活性 5′′→3′′聚合活性 中 ? 高 高 高 分子量(kD) 16.5 4.0 14.0 12.5 25.5 DNA-pol α β γ δ ε 填补引物 空隙,切 除修复, 重组 延长子 链的主 要酶, 解螺旋 酶活性 线粒体 DNA复 制 低保 真度 的复 制 起始引 发,引 物酶活 性 功能 - - + + + 3′′→5′′核酸外切 酶活性 5′′→3′′聚合活性 中 ? 高 高 高 分子量(kD) 16.5 4.0 14.0 12.5 25.5 DNA-pol α β γ δ ε (p223)