实验二细菌的染色和 细菌细胞构造的观察 目的要求 染色剂和染色的原理 实验材料 实验程序 思考题
实 验 二 细菌的染色和 细菌细胞构造的观察 • 目的要求 • 染色剂和染色的原理 • 实验材料 • 实验程序 • 思考题
目的要求 学习微生物涂片 掌握细菌的一般染色法和革兰氏染色 进一步熟练掌握显微镜油镜的使用技术 观察和识别细菌细胞的特殊构造
目 的 要 求 • 学习微生物涂片 • 掌握细菌的一般染色法 和革兰氏染色 • 进一步熟练掌握显微镜油镜的使用技术 • 观察和识别细菌细胞的特殊构造
染色剂和染色原理 微生物染色的基本原理:是借助物理和化学因素的作用而进行 的。物理因素如:细胞及细胞物质对染料的毛细现象、渗透、吸 附作用等。化学因素如:正负离子之间的相互吸引等。 染色剂:染料按其电离后所带电荷的性质可分为以下类型: 1.酸性染料:如酸性复红、刚果红、伊红、藻红、苯胺黑等。 2.碱性染料:一般有碱性复红、中性红、孔雀绿、番红、结晶 紫、美兰、甲基紫等,细菌易被碱性染料染色。 3.中性(复合)染料:如伊红、美兰等,Wh染料和 Gimsa 染料等(常用于细胞核染色)。 4.单纯染色:这类染料的化学亲和力低,大多是偶氮化合物, 不溶于水,但溶于脂肪溶剂中,如苏丹类( Sudan b)的染料
染色剂和染色原理 微生物染色的基本原理: 是借助物理和化学因素的作用而进行 的。物理因素如：细胞及细胞物质对染料的毛细现象、渗透、吸 附作用等。化学因素如：正负离子之间的相互吸引等。 染色剂: 染料按其电离后所带电荷的性质可分为以下类型： 1. 酸性染料：如酸性复红、刚果红、伊红、藻红、苯胺黑等。 2. 碱性染料：一般有碱性复红、中性红、孔雀绿、番红、结晶 紫、美兰、甲基紫等，细菌易被碱性染料染色。 3. 中性（复合）染料：如伊红、美兰等，Wright染料和Gimsa 染料等（常用于细胞核染色）。 4. 单纯染色：这类染料的化学亲和力低，大多是偶氮化合物， 不溶于水，但溶于脂肪溶剂中，如苏丹类（Sudan b)的染料
染色剂和染色原理: 微生物染色常用染料 称 性质发色基助色基 用途 结晶紫(龙胆紫) Crystal violet) 碱性对位醌一NH革兰氏染色等 番红(沙黄)( Safranin) 碱性双偶氮|一NH2革兰氏染色核染色 碱性复红(品红)( Dasic inchsin) 碱性对位醒一NH4核染色鉴别结核杆菌 美兰( Methyl blue) 碱性对位酸一NH2活体染色、放线菌染色氧化还原指示剂 刚果红( Congo red) 酸性双偶氮-NH2细菌负染色酵母菌染色 孔雀绿( Malachite green) 碱性对位醒一NH2细菌芽孢染色 苦味酸( Picric acid 酸性一NO2-OH染真菌细胞群海藻细胞壁 伊红(曙红y)( Eosin y) 酸性对位OH细胞质染色细胞的酸性颗粒染色 藻红(兰光赤星)( Erythrosin) 酸性对位酿一OH染土壤细菌 酸性复红(品红)( Acid fuchsin) 酸性对位醌一NH2单染色等 中性红( Neutral red) 碱性酿环|-NH2活体染色指示培养基鉴别肠道细菌等 亮绿(大皇绿)( Brilliant green) 碱性对位|一NH2细菌螺旋体等的染色,鉴别培养 苏丹I(三号苏丹红)( Sudan1) 酸性双侧氮一OH脂肪染色 荧光素( Fluorescein) 酸性羰基-OH菱光染色 黑素(水溶黑素)( nigrosin) 混合物 负染色用
染色剂和染色原理: 微生物染色常用染料
实验材料 涂片染色用的细菌培养物 1大肠杆菌( Escherichia coli24h的斜面培养物。 2枯草杆菌( Bacillus subtilis)12-16h的斜面培养物。 载玻片、接种环、镊子、酒精灯、各种染色液、火 柴、无菌牙签、玻璃铅笔、蒸馏水。 显微镜、镜头油、擦镜纸、吸水纸、二甲苯等。 示范片 1.枯草杆菌( Bacillus subtilis)的芽孢; 2,胶质芽孢杆菌(Bac" us mucilaginosus)的荚膜; 3.草芽孢杆菌的鞭毛
实验材料 • 涂片染色用的细菌培养物 １.大肠杆菌（Escherichia coli) 24h的斜面培养物。 ２.枯草杆菌（Bacillus subtilis) 12—16h的斜面培养物。 • 载玻片、接种环、镊子、酒精灯、各种染色液、火 柴、无菌牙签、玻璃铅笔、蒸馏水。 • 显微镜、镜头油、擦镜纸、吸水纸、二甲苯等。 • 示范片 １.枯草杆菌（Bacillus subtilis)的芽孢； ２.胶质芽孢杆菌（Bacillus mucillaginosus）的荚膜； ３.枯草芽孢杆菌的鞭毛