细胞 ◆生物大分子→细胞→病毒 原核细胞 基本特点 ◆遗传的信息量小,遗传信息载体仅由一个环状DNA构成 细胞内没有分化为以膜为基础的具有专门结构与功能 的细胞器和细胞核膜 主要代表 ◆支原体( mycoplasm)—目前发现的最小最简单的细胞 ◆细菌 ◆蓝藻又称蓝细菌( Cyanobacteria) 真核细胞 ●真核细胞的基本结构体系 ●细胞的大小及其分析 ●原核细胞与真核细胞的比较 真核细胞的基本结构体系 ◆以脂质及蛋白质成分为基础的生物膜结构系统 ◆以核酸(DNA或RNA)与蛋白质为主要成分的遗传信息表达系统 ◆由特异蛋白分子装配构成的细胞骨架系统 细胞的大小及其分析 各类细胞直径的比较 原核细胞与真核细胞的比较 ◆原核细胞与真核细胞基本特征的比较 ◆原核细胞与真核细胞的遗传结构装置和基因表达的比较
细胞 生物大分子→细胞→病毒 原核细胞 基本特点: 遗传的信息量小,遗传信息载体仅由一个环状DNA构成; 细胞内没有分化为以膜为基础的具有专门结构与功能 的细胞器和细胞核膜。 主要代表: 支原体(mycoplast)——目前发现的最小最简单的细胞; 细菌 蓝藻又称蓝细菌(Cyanobacteria) 真核细胞 真核细胞的基本结构体系 细胞的大小及其分析 原核细胞与真核细胞的比较 真核细胞的基本结构体系 以脂质及蛋白质成分为基础的生物膜结构系统; 以核酸(DNA或RNA)与蛋白质为主要成分的遗传信息表达系统 由特异蛋白分子装配构成的细胞骨架系统。 细胞的大小及其分析 各类细胞直径的比较 原核细胞与真核细胞的比较 原核细胞与真核细胞基本特征的比较 原核细胞与真核细胞的遗传结构装置和基因表达的比较
◆植物细胞与动物细胞的比较 植物细胞与动物细胞的比较 ●细胞壁 ●液泡 ●叶绿体 古细菌 古细菌( archaebacteria)与真核细胞曾在进化上有过共同历程 ●主要证据 ●进化系统树 主要证据 (1)细胞壁的成分与真核细胞一样,而非由含壁酸的肽聚糖构成, 因此抑制壁酸合成的链霉素, 抑制肽聚糖前体合成的环丝 氨酸,抑制肽聚糖合成的青霉素与万古霉素等对真细菌类有强的 抑制生长作用,而对古细菌与真核细胞却无作用。 (2)DNA与基因结构:古细菌DNA中有重复序列的存在。此外,多 数古核细胞的基因组中存在内含子 (3)有类核小体结构:古细菌具有组蛋白,而且能与DNA构建成类 似核小体结构。 (4)有类似真核细胞的核糖体:多数古细菌类的核糖体较真细菌 有增大趋势,含有60种以上蛋白,介于真核细胞(70~84)与真 细菌(55)之间。抗生素同样不能抑制古核细胞类的核糖体的蛋 白质合成。 (5)5 S rrNA:根据对5 S rRNAl的分子进化分析,认为古细菌与真 核生物同属一类,而真细菌却与之差距甚远。5 S rRNA二级结构 的研究也说明很多古细菌与真核生物相似。 除上述各点外,根据DNA聚合酶分析,氨基酰tRNA合成酶 的作用,起始氨基酰tRNA与肽链延长因子等分析,也提供了以
植物细胞与动物细胞的比较 植物细胞与动物细胞的比较 细胞壁 液泡 叶绿体 古细菌 古细菌(archaebacteria)与真核细胞曾在进化上有过共同历程 主要证据 进化系统树 主要证据 (1)细胞壁的成分与真核细胞一样,而非由含壁酸的肽聚糖构成, 因此抑制壁酸合成的链霉素, 抑制肽聚糖前体合成的环丝 氨酸,抑制肽聚糖合成的青霉素与万古霉素等对真细菌类有强的 抑制生长作用,而对古细菌与真核细胞却无作用。 (2)DNA与基因结构:古细菌DNA中有重复序列的存在。此外,多 数古核细胞的基因组中存在内含子。 (3)有类核小体结构:古细菌具有组蛋白,而且能与DNA构建成类 似核小体结构。 (4)有类似真核细胞的核糖体:多数古细菌类的核糖体较真细菌 有增大趋势,含有60种以上蛋白,介于真核细胞(70~84)与真 细菌(55)之间。抗生素同样不能抑制古核细胞类的核糖体的蛋 白质合成。 (5)5S rRNA:根据对5S rRNA的分子进化分析,认为古细菌与真 核生物同属一类,而真细菌却与之差距甚远。5S rRNA二级结构 的研究也说明很多古细菌与真核生物相似。 除上述各点外,根据DNA聚合酶分析,氨基酰tRNA合成酶 的作用,起始氨基酰tRNA 与肽链延长因子等分析,也提供了以
上类似依据,说明古细菌与真核生物在进化上的关系较真细菌类 更为密切。因此近年来,真核细胞起源于古细菌的观点得到了加 强 第三章细胞生物学研究方法 如何学习细胞生物学? 抽象思维与动态观点 结构与功能统一的观点 同一性( unity)和多样性( diversity)的问题 细胞生物学的主要内容: 结构与功能(动态特征); 细胞的生命活动 实验科学与实验技术细胞真知源于实验室 what we know /How we know 第三章细胞生物学研究方法 ●细胞形态结构的观察方法 ●细胞组分的分析方法 ●细胞培养、细胞工程与显微操作技术 第一节细胞形态结构的观察方法 ●光学显微镜技术( light microscopy) ●电子显微镜技术( Electro microscopy) ●扫描探针显微镜( Scanning Probe Microscope 扫描遂道显徽镜( (scanning tunneling microscope) 第二节细胞组分的分析方法 ●离心分离技术
上类似依据,说明古细菌与真核生物在进化上的关系较真细菌类 更为密切。因此近年来,真核细胞起源于古细菌的观点得到了加 强。 第三章 细胞生物学研究方法 如何学习细胞生物学? • 抽象思维与动态观点 • 结构与功能统一的观点 • 同一性(unity)和多样性(diversity)的问题 • 细胞生物学的主要内容: 结构与功能(动态特征); 细胞的生命活动 ; • 实验科学与实验技术——细胞真知源于实验室 ——What we know//How we know. 第三章 细胞生物学研究方法 细胞形态结构的观察方法 细胞组分的分析方法 细胞培养、细胞工程与显微操作技术 第一节 细胞形态结构的观察方法 光学显微镜技术(light microscopy) 电子显微镜技术 (Electro microscopy) 扫描探针显微镜(Scanning Probe Microscope) 扫描遂道显微镜 (scanning tunneling microscope ) 第二节 细胞组分的分析方法 离心分离技术
●细胞内核酸、蛋白质、酶、糖与脂类等的显示方法 ●特异蛋白抗原的定位与定性 ●细胞内特异核酸的定位与定性 ●放射自显影技术 ●定量细胞化学分析技术 第三节细胞培养、细胞工程与显微操作技术 ●细胞的培养 ●细胞工程 光学显微镜技术( .light microscopy) ●普通复式光学显微镜技术 ●荧光显微镜技术( Fluorescence Microscopy) ●激光共焦扫描显微镜技术( Laser Confocal Microscopy) ●相差显微镜( phase-contrast microscope) ●微分干涉显微镜 (differential inter ference contrast microscope, DIC ●录像增差显微镜技术( video- enhance microscopy) 二、电子显微镜技术 ●电子显微镜的基本知识 ◆电镜与光镜的比较 ◆电镜与光镜光路图比较 ◆电子显微镜的基本构造 ●主要电镜制样技术 ◆负染色技术 ◆冰冻蚀刻技术 ◆超薄切片技术 ◆电镜三维重构技术 ●扫描电镜( Scanning electron microscope,SEM) SPM(Scanning probe microscope) 扫描遂道显微镜 9 Scanning Probe Microscope, SPM 80年代发展起来的检测样品微观结构的仪器 包括:SIM、AM、磁力显微镜、摩擦力显微镜等 原理:扫描探针与样品接触或达到很近距离时,即产生彼此间相互
细胞内核酸、蛋白质、酶、糖与脂类等的显示方法 特异蛋白抗原的定位与定性 细胞内特异核酸的定位与定性 放射自显影技术 定量细胞化学分析技术 第三节 细胞培养、细胞工程与显微操作技术 细胞的培养 细胞工程 一、光学显微镜技术(light microscopy) 普通复式光学显微镜技术 荧光显微镜技术(Fluorescence Microscopy) 激光共焦扫描显微镜技术(Laser Confocal Microscopy) 相差显微镜(phase-contrast microscope) 微分干涉显微镜 (differential interference contrast microscope, DIC) 录像增差显微镜技术(video-enhance microscopy) 二、 电子显微镜技术 电子显微镜的基本知识 电镜与光镜的比较 电镜与光镜光路图比较 电子显微镜的基本构造 主要电镜制样技术 负染色技术 冰冻蚀刻技术 超薄切片技术 电镜三维重构技术 扫描电镜 (Scanning electron microscope,SEM) SPM(Scanning probe microscope) 三、 扫描遂道显微镜 Scanning Probe Microscope,SPM (80年代发展起来的检测样品微观结构的仪器) 包括:STM、AFM、磁力显微镜、摩擦力显微镜等 原理:扫描探针与样品接触或达到很近距离时,即产生彼此间相互
作用力,如 量子力学中的隧道效应(隧道电流)、原子间作用力、磁力、 摩擦力等, 并在计算机显示出来,从而反映出样品表面形貌信息、电特 性或磁特性等。 ◆装置:扫描的压电陶瓷,逼近装置,电子学反馈控制系统和数据 采集、处理、显示系统。 ◆特点:(1)可对晶体或非晶体成像,无需复杂计算,且分辨本 领高。 (侧分辨率为0.1~0.2mn,纵分辨率可达0.01nm); (2)可实时得到样品表面三维图象,可测量厚度信息; (3)可在真空、大气、液体等多种条件下工作;非破坏 性测量 (4)可连续成像,进行动态观察 ◆用途:纳米生物学研究领域中的重要工具,在原子水平上揭示样 本表面的结构 普通复式光学显微镜技术 光镜样本制作 分辨率是指区分开两个质点间的最小距离 荧光显微镜技术( Fluorescence Microscopy) ●原理与应用 ◆直接荧光标记技术 ◆间接免疫荧光标记技术 ◆在光镜水平用于特异蛋白质 等生物大分子的定性定位: 如绿色荧光蛋白(GFP的应用 激光共焦扫描显微镜技术
作用力,如 量子力学中的隧道效应(隧道电流)、原子间作用力、磁力、 摩擦力等, 并在计算机显示出来,从而反映出样品表面形貌信息、电特 性或磁特性等。 装置:扫描的压电陶瓷,逼近装置,电子学反馈控制系统和数据 采集、处理、显示系统。 特点:(1)可对晶体或非晶体成像,无需复杂计算,且分辨本 领高。 (侧分辨率为0.1~0.2nm,纵分辨率可达0.01nm); (2)可实时得到样品表面三维图象,可测量厚度信息; (3)可在真空、大气、液体等多种条件下工作;非破坏 性测量。 (4)可连续成像,进行动态观察 用途:纳米生物学研究领域中的重要工具,在原子水平上揭示样 本表面的结构。 普通复式光学显微镜技术 光镜样本制作 分辨率是指区分开两个质点间的最小距离 荧光显微镜技术(Fluorescence Microscopy) 原理与应用 直接荧光标记技术 间接免疫荧光标记技术 在光镜水平用于特异蛋白质 等生物大分子的定性定位: 如绿色荧光蛋白(GFP)的应用 激光共焦扫描显微镜技术