表6-5芳香族氨基酸的紫外吸收和荧光 氨基酸最大吸收波长λmx摩尔消光系数最大荧光波长A (nm) (1cm mo1) nm 苯丙氨酸 260 190 282 色氨酸 278 5590 348 酪氨酸 275 1340 304 a在260nm处激发 b在280mm处激发
表 6-5 芳香族氨基酸的紫外吸收和荧光 氨基酸 最大吸收波长λmax （n m） 摩尔消光系数 （1cm- 1mol- 1） 最大荧光波长λ （n m） 苯丙氨酸 260 190 282a 色氨酸 278 5590 348b 酪氨酸 275 1340 304b a 在 260 n m 处激发 b 在 280 n m 处激发
二、氨基酸的化学反应性 ■存在于游离氨基酸和蛋白质分子中的反 应基团 ■氨基、羧基、巯基、酚羟基、羟基、硫 醚基(Met)、咪唑基和胍基 ■改变蛋白质和肽亲水疏水性质或者功能 性质 ■被利用来定量氨基酸和蛋白质分子中特 定的氨基酸
二、氨基酸的化学反应性 ◼ 存在于游离氨基酸和蛋白质分子中的反 应基团 ◼ 氨基、羧基、巯基、酚羟基、羟基、硫 醚基（Met）、咪唑基和胍基 ◼ 改变蛋白质和肽亲水-疏水性质或者功能 性质 ◼ 被利用来定量氨基酸和蛋白质分子中特 定的氨基酸
与茚三酮反应 OH 2 + R-CH--COOH→ OH +R-CHO +CO2+8H,O NH 茚三酮 氨基酸 Ruhemann's紫 ■1摩尔的氨基酸,与2摩尔茚三酮生成1摩 尔紫色物质,在570nm显示最高吸收。 ■脯氨酸和羟脯氨酸产生一种黄色物质, 它在440nm显示最高吸收 ■常用来定量游离氨基酸
与茚三酮反应 ◼ 1摩尔的氨基酸，与2摩尔茚三酮生成1摩 尔紫色物质，在570 nm显示最高吸收。 ◼ 脯氨酸和羟脯氨酸产生一种黄色物质， 它在440 nm显示最高吸收。 ◼ 常用来定量游离氨基酸
与邻苯二甲醛反应 2-巯基乙醇 CH2-CH2oH H HS-CH2-CH,OH R一CH-COOH N—C—COOH ■当存在2-巯基乙醇时氨基酸与郐-苯二甲醛反应 (1,2-苯二甲醛)反应生成高荧光的衍生物 在380nm激发时在450nm具有最高荧光发射 ■定量氨基酸、蛋白质和肽
与邻苯二甲醛反应 ◼ 当存在2-巯基乙醇时氨基酸与邻-苯二甲醛反应 （1，2-苯二甲醛）反应生成高荧光的衍生物 ◼ 在380 nm激发时在450 nm具有最高荧光发射 ◼ 定量氨基酸、蛋白质和肽 2-巯基乙醇 C C O O H H + R CH COOH NH2 HS - CH2 - CH2OH N H C NH2 COOH S - CH2 - CH2OH
与荧光胺反应 0 t R-Ch-COoH 含有伯胺的氨基酸、肽和蛋白质与荧光胺反应 成高荧光的衍生物 ■在390nm激发时,在475mm具有最高荧光发射 ■被用于定量氨基酸以及蛋白质和肽
与荧光胺反应 ◼ 含有伯胺的氨基酸、肽和蛋白质与荧光胺反应 成高荧光的衍生物 ◼ 在390 nm激发时，在475 nm具有最高荧光发射 ◼ 被用于定量氨基酸以及蛋白质和肽。 + R - CH - COOH N NH2 CH COOH R O O O O + H2O