E.coli细胞 E.coli cells Prolonged growth 品 首先在15NⅢCI培养基中培养 东aeit Growth in medium with 4NH Cl 然后转到4N,C培养基中培养 Growth in E.coli cells with 14N,15N-DNA Growth in 只在 1NH CI I5NH.CI 只在 medium medium 14NHACI 15NHCI 中培养 中培养 提取DNA,进行密度梯度超离心 14N-DNA 1N-DNA 1N,15N -DNA- (50-50) I5N-DNA 14N对照系统 第一代 第二代 5N对照系统
首先在15NH4Cl培养基中培养 然后转到14NH4Cl培养基中培养 只在 15NH4Cl 中培养 只在 14NH4Cl 中培养 14N对照系统 第一代 第二代 15N对照系统 提取DNA,进行密度梯度超离心 E.coli 细胞
实验结果表明DNA Go G 复制是半保留复制 用5N标记的 亲本DNA Go G G 14N中第 次复制 Semiconservative replication G 14N中第二次复制
用15N标记的 亲本DNA 14N中第一 次复制 14N中第二次复制 实验结果表明DNA 复制是半保留复制
沉降方向 亲代[N]DNA (两条链都是重链) 在[N]NH,Cl中 培养的DNA 第一代 两个杂化DNA都含有 一条轻链,一条重链 转换到[N]NH,Cl中 培养的第一代DNA D 第二代 形成两个杂化DNA 和两个密度轻DNA 密度轻DNA杂化DNA 在N]NH,CI中 培养的第一代DNA (a) (b)
(a)密度梯度离心的DNA带 (b)对应于左侧DNA带的解释 Meselson-stahl 实验
※复制子与复制叉 复制子(replicon):DNA独立进行复制的基本单位。 DNA分子复制时,不是整条链全部打开,而是 在复制的局部DNA双链间的氢键被解开,形成 复制单位,这个复制单位称为复制子。 一个复制起点 复制子 两个起点之间的DNA片段 某些生物还存在着复制终止点
※复制子与复制叉 复制子(replicon): DNA独立进行复制的基本单位。 DNA分子复制时,不是整条链全部打开,而是 在复制的局部DNA双链间的氢键被解开,形成 复制单位,这个复制单位称为复制子。 一 个 复 制 子 一个复制起点 两个起点之间的DNA片段 某些生物还存在着复制终止点
※复制子与复制叉 原核生物:single replicon 单一环状DNA分子=单一的复制子 真核生物:multiple replicons 多个线性染色体,每个染色体上有多个复制子 >长、线状DNA分子上有多个复制子,每个复制子有一个复制原点 >哺乳动物细胞细胞含50000-100000个复制子,每个长度为4-200kb, 没有确切的终止序列
※复制子与复制叉 原核生物:single replicon 单一环状DNA分子=单一的复制子 真核生物:multiple replicons 多个线性染色体,每个染色体上有多个复制子 ➢ 长、线状DNA分子上有多个复制子,每个复制子有一个复制原点 ➢ 哺乳动物细胞细胞含50000-100000个复制子,每个长度为4-200 kb, 没有确切的终止序列