实验五药敏实验
实验五 药敏实验
一实验目的1、掌握细菌纯化再培养的方法2、掌握人工药敏实验方法2
2 一、实验目的 1、掌握细菌纯化再培养的方法 2、掌握人工药敏实验方法
药敏试验常用方法1.纸片扩散法(DiskDiffusion Test)Kirby-Bauer法(K-B纸片琼脂扩散法)和直接纸片药敏法2.稀释法(Dilution Test):包括琼脂稀释法(药物混合在培养基中)和肉汤稀释法(抗生素梯度稀释)3.抗生素浓度梯度法-E试验(E-test)3
3 二、药敏试验常用方法 1. 纸片扩散法(Disk Diffusion Test): Kirby-Bauer法(K-B纸片琼脂扩散法) 和直接纸片药敏法 2. 稀释法(Dilution Test): 包括琼脂稀释法(药物混合在培养基中) 和肉汤稀释法(抗生素梯度稀释) 3. 抗生素浓度梯度法-E 试 验(E-test)
实验原理将含有一定量抗菌药物的纸片或药片平贴于已接种被检细菌的琼脂培养基上,纸片或药片中的药物即呈梯度向周围扩散,敏感菌株在纸片或药片的周围生长受到抑制,而形成抑菌圈。根据抑菌圈的大小,可判断细菌对抗菌药物的敏感性4
4 二、实验原理 将含有一定量抗菌药物的纸片或药片, 平贴于已接种被检细菌的琼脂培养基上,纸 片或药片中的药物即呈梯度向周围扩散,敏 感菌株在纸片或药片的周围生长受到抑制, 而形成抑菌圈。根据抑菌圈的大小,可判断 细菌对抗菌药物的敏感性
影响药敏结果的因素一、培养基:应根据试验菌的营养需要进行配制。倾注平板时,厚度合适(约5-6mm),不可太薄,且培养基内应尽量避免有抗菌药物的拮抗物质,如钙、镁离子。二、细菌接种量:细菌接种量应恒定,如太多,抑菌圈变小。三、药物浓度:药物的浓度和总量直接影响抑菌试验的结果,需精确配制。四、培养时间:一般在37℃下培养18-24小时
影响药敏结果的因素 一、培养基:应根据试验菌的营养需要进行配制。倾注 平板时,厚度合适(约5-6mm),不可太薄,且培养基 内应尽量避免有抗菌药物的拮抗物质,如钙、镁离子。 二、细菌接种量:细菌接种量应恒定,如太多,抑菌圈 变小。 三、药物浓度:药物的浓度和总量直接影响抑菌试验的 结果,需精确配制。 四、培养时间:一般在37℃下培养18-24小时