河南师范大学水产学院实验课教案?课程名称：鱼类生理实验技术课程类别：专业基础平台课程总学时/总学分：36/1所属系（教研室）：水产动物营养与饲料系授课时间：2015.09.07-2016.01.10
河南师范大学水产学院 实验课教案 课程名称：鱼类生理实验技术 课程类别：专业基础平台课程 总学时/总学分：36/1 所属系（教研室）：水产动物营养与饲料系 授课时间：2015.09.07-2016.01.10
实验名称实验三：肌肉收缩特性分析2014级水产；授课教师杨丽萍、秦超彬授课专业和年级2014级水族验证4实验类别授课学时1.掌握蛙类坐骨神经-腓肠肌标本的制备方法；2.观察不同刺激强度、刺激频率对骨骼肌收缩的影响，加深对实验目的骨骼肌收缩特性（单收缩、不完全强直收缩、完全强直收缩）的理解。蛙类的一些基本生命活动和生理功能与恒温动物相似，若将蛙的神经-肌肉标本放在任氏液中，其兴奋性在几个小时内可保持不变。若给神经或肌肉一次适宜刺激，可在神经和肌肉上产生一个动作电位，肉眼可看到肌肉收缩和舒张一次，表明神经和肌肉产生了一次兴奋。在生理学实验中常利用蛙的坐骨神经-肠肌标本研究神经、肌肉的兴奋与兴奋性、刺激与反应的规律和肌肉收缩的特征等。制备坐骨神经腓肠肌标本是生理学实验的一项基本操作技术。实验原理1.单收缩：在实验条件下，受到单电刺激时发生一次迅速的收缩，称为单收缩。单收缩包括三个时期，即潜伏期、收缩期和舒张期。2.不完全强直收缩：低频刺激时，每次新的收缩都与前次尚未结束收缩的舒张期发生总和，表现为锯齿形的收缩曲线。3.完全强直收缩：高频刺激时，肌肉处于持续稳定的收缩状态，各收缩波完全融合，收缩曲线光滑。牛蛙、解部盘、滴管、毁髓针、玻璃分针，培养皿、任氏液、实验用品Pclab-430C型生物医学信号采集处理系统、张力换能器。教学过程及「1.课前的准备：试剂药品的检查（20分钟）；
实验名称 实验三：肌肉收缩特性分析 授课教师 杨丽萍、秦超彬 授课专业和年级 2014 级水产； 2014 级水族 实验类别 验证 授课学时 4 实验目的 1. 掌握蛙类坐骨神经-腓肠肌标本的制备方法； 2. 观察不同刺激强度、刺激频率对骨骼肌收缩的影响，加深对 骨骼肌收缩特性（单收缩、不完全强直收缩、完全强直收缩） 的理解。 实验原理 蛙类的一些基本生命活动和生理功能与恒温动物相似，若 将蛙的神经-肌肉标本放在任氏液中，其兴奋性在几个小时内可 保持不变。若给神经或肌肉一次适宜刺激，可在神经和肌肉上 产生一个动作电位，肉眼可看到肌肉收缩和舒张一次，表明神 经和肌肉产生了一次兴奋。在生理学实验中常利用蛙的坐骨神 经-腓肠肌标本研究神经、肌肉的兴奋与兴奋性、刺激与反应的 规律和肌肉收缩的特征等。制备坐骨神经腓肠肌标本是生理学 实验的一项基本操作技术。 1. 单收缩： 在实验条件下，受到单电刺激时发生一次迅速的收缩，称 为单收缩。单收缩包括三个时期，即潜伏期、收缩期和舒张期。 2. 不完全强直收缩： 低频刺激时，每次新的收缩都与前次尚未结束收缩的舒张 期发生总和，表现为锯齿形的收缩曲线。 3. 完全强直收缩： 高频刺激时，肌肉处于持续稳定的收缩状态，各收缩波完 全融合，收缩曲线光滑。 实验用品 牛蛙、解剖盘、滴管、毁髓针、玻璃分针，培养皿、任氏液、 Pclab-430C 型生物医学信号采集处理系统、张力换能器。 教学过程及 1. 课前的准备：试剂药品的检查（20 分钟）；
时间分配2.实验讲解（20分钟）实验目的、实验原理（见上）。实验操作步骤：1.蟾蜍坐骨神经-腓肠肌的标本的制备(1)破坏脑、脊髓。(2)剪除躯干上部及内脏。(3)剥皮。(4)分离两后肢。(5)游离坐骨神经和排肠肌。(6)完成坐骨神经一肠肌标本。(7)检验标本。2.仪器导联（1）张力换能器接通道1；（2）神经干接刺激电极。3.骨骼肌收缩特性分析标本制成后，当证明标本的兴奋性良好后置于任式液中10-15min，待其兴奋性稳定后，再进行实验。（1）给予1次阈上刺激，观察肌肉收缩情况；（2）给予阈下刺激，观察是否引起肌肉收缩；（3）加强阈上刺激，观察肌肉收缩情况；（4）用同等强度的连续阈上刺激作用于标本时，肌肉收缩出现怎样的变化？（5）串刺激（低频）连续刺激，观察不完全强直收缩。（6）串刺激（高频）连续刺激，观察完全强直收缩。注意事项：（1）避免压挤、损伤和用力牵拉标本，不可用金属器械触碰神经干。（2）在操作过程中，应常给神经和肌肉滴加任氏液，防止表面干燥，以免影响标本的兴奋性
时间分配 2．实验讲解（20 分钟） 实验目的、实验原理（见上）。 实验操作步骤： 1.蟾蜍坐骨神经-腓肠肌的标本的制备 （1） 破坏脑、脊髓。 （2） 剪除躯干上部及内脏。 （3） 剥皮。 （4） 分离两后肢 。 （5） 游离坐骨神经和腓肠肌。 （6） 完成坐骨神经－腓肠肌标本。 （7） 检验标本。 2. 仪器导联 （1）张力换能器接通道 1； （2）神经干接刺激电极。 3. 骨骼肌收缩特性分析 标本制成后，当证明标本的兴奋性良好后置于任式液中 10-15min，待其兴奋性稳定后，再进行实验。 （1）给予 1 次阈上刺激，观察肌肉收缩情况； （2）给予阈下刺激，观察是否引起肌肉收缩； （3）加强阈上刺激，观察肌肉收缩情况； （4）用同等强度的连续阈上刺激作用于标本时，肌肉收 缩出现怎样的变化？ （5）串刺激（低频）连续刺激，观察不完全强直收缩。 （6）串刺激（高频）连续刺激，观察完全强直收缩。 注意事项： （1） 避免压挤、损伤和用力牵拉标本，不可用金属器械 触碰神经干。 （2） 在操作过程中，应常给神经和肌肉滴加任氏液，防 止表面干燥，以免影响标本的兴奋性
（3）标本制成后须放在任氏液中浸泡数分钟，使标本兴奋性稳定，再开始实验效果会较好。3.实验操作（120分钟）1.蟾蜍坐骨神经-腓肠肌的标本的制备（1）双毁髓：培养血中倒入适量任式液。取牛蛙一只，用自来水冲洗干净。左手握住牛蛙，用食指按其头部使之略向前屈，拇指按住其背部，其余三指则握住牛蛙的四肢和腹部。右手持毁髓针，将毁髓针垂直刺入枕骨大孔（两眼之间沿中线向下触划，触及凹陷处）。将针尖向前刺入颅腔内搅动，此时为单毁髓；将毁髓针退回枕骨大孔，针尖转向后方，与脊椎平行刺入椎管内捣毁脊髓，完成双毁髓。（2）剪除躯干上部和内脏：左手握住牛蛙的脊柱，用粗剪刀在前肢腋窝处，将脊柱横断，并沿脊柱两侧避开坐骨神经剪开腹壁，此时头、躯干上部及内脏全部下垂，剪除头、全部驱干及内脏组织，剪去肛周皮肤，留下脊柱和后肢。（3）剥皮：用圆头镊子夹住脊柱边缘，注意不要碰到坐骨神经，捏住皮肤边缘，逐步向下牵拉剥离皮肤。将全部皮肤剥除后，标本放于盛有任氏液的小烧杯中。（4）分离两腿：将标本纵剖为两半，注意勿损伤坐骨神经。（5）游离坐骨神经：把下肢的背面朝上，辨认牛蛙大腿的二头肌和半膜肌，以及小腿的肠肌。用玻璃分针和镊子仔细把二头肌和半膜肌分开，便可看到一条粗大的神经，此即坐骨神经。用玻璃钩针把神经挑起，剪去通往大腿肌肉的神经分支，顺着神经走行方向，转向腹腔面沿脊柱逐渐把神经主干全部分出，直到所连的椎骨为止。用粗剪刀剪除多余的肌肉和脊椎骨，仅留下与坐骨神经相连的一小块脊椎骨，用镊子夹住这块脊椎骨，轻轻提起坐骨神经，用手术剪剪去残余的分支，并将坐骨神经一直分离到膝关节附近。（6）完成坐骨神经-腓肠肌标本：分离排肠肌的跟腱，用线
（3） 标本制成后须放在任氏液中浸泡数分钟，使标本兴 奋性稳定，再开始实验效果会较好。 3. 实验操作（120 分钟） 1.蟾蜍坐骨神经-腓肠肌的标本的制备 （1）双毁髓：培养皿中倒入适量任式液。取牛蛙一只，用 自来水冲洗干净。左手握住牛蛙，用食指按其头部使之略向前 屈，拇指按住其背部，其余三指则握住牛蛙的四肢和腹部。右 手持毁髓针，将毁髓针垂直刺入枕骨大孔（两眼之间沿中线向 下触划，触及凹陷处）。将针尖向前刺入颅腔内搅动，此时为单 毁髓；将毁髓针退回枕骨大孔，针尖转向后方，与脊椎平行刺 入椎管内捣毁脊髓，完成双毁髓。 （2）剪除躯干上部和内脏：左手握住牛蛙的脊柱，用粗剪 刀在前肢腋窝处，将脊柱横断，并沿脊柱两侧避开坐骨神经剪 开腹壁，此时头、躯干上部及内脏全部下垂，剪除头、全部躯 干及内脏组织，剪去肛周皮肤，留下脊柱和后肢。 （3）剥皮：用圆头镊子夹住脊柱边缘，注意不要碰到坐骨 神经，捏住皮肤边缘，逐步向下牵拉剥离皮肤。将全部皮肤剥 除后，标本放于盛有任氏液的小烧杯中。 （4）分离两腿：将标本纵剖为两半，注意勿损伤坐骨神经。 （5）游离坐骨神经： 把下肢的背面朝上，辨认牛蛙大腿的 二头肌和半膜肌，以及小腿的腓肠肌。 用玻璃分针和镊子仔细把二头肌和半膜肌分开，便可看到 一条粗大的神经，此即坐骨神经。用玻璃钩针把神经挑起，剪 去通往大腿肌肉的神经分支，顺着神经走行方向，转向腹腔面 沿脊柱逐渐把神经主干全部分出，直到所连的椎骨为止。用粗 剪刀剪除多余的肌肉和脊椎骨，仅留下与坐骨神经相连的一小 块脊椎骨，用镊子夹住这块脊椎骨，轻轻提起坐骨神经，用手 术剪剪去残余的分支，并将坐骨神经一直分离到膝关节附近。 （6）完成坐骨神经-腓肠肌标本：分离腓肠肌的跟腱，用线
结扎跟腱，在结扎处以下将跟腱剪断。持线提起排肠肌，用粗剪刀剪去小腿骨和其上的肌肉，再将大腿肌肉剪去，只留长约1～2cm的股骨，并将其上肌肉刮干净。（7）检验标本：用镊子接触神经，若肌肉产生收缩，则表示此标本的机能状态良好。2.仪器导联（1）张力换能器接通道1；（2）神经干接刺激电极。3.骨骼肌收缩特性分析标本制成后，当证明标本的兴奋性良好后置于任式液中10-15min，待其兴奋性稳定后，再进行实验。（1）给予1次阈上刺激，观察肌肉收缩情况；（2）给予阈下刺激，观察是否引起肌肉收缩；（3）加强阈上刺激，观察肌肉收缩情况；（4）用同等强度的连续阈上刺激作用于标本时，肌肉收缩出现怎样的变化？（5）串刺激（低频）连续刺激，观察不完全强直收缩。（6）串刺激（高频）连续刺激，观察完全强直收缩。4.实验结果检查（20分钟）教学重点阈刺激、单收缩、不完全强直收缩、完全强制收缩教学难点刺激强度、刺激频率与骨骼肌收缩的关系。作业与观察记录上述不同刺激对蛙腓肠肌收缩的影响，并分析讨论。习题肌肉收缩曲线图教材和参考金天明主编，动物生理学实验教程.清华出版社.2012文献教学后记负责人签字系主任（签字）课程负责人任（签字）实验名称年月日年月日
结扎跟腱，在结扎处以下将跟腱剪断。持线提起腓肠肌，用粗 剪刀剪去小腿骨和其上的肌肉，再将大腿肌肉剪去，只留长约 1～2cm 的股骨，并将其上肌肉刮干净。 （7）检验标本：用镊子接触神经，若肌肉产生收缩，则表 示此标本的机能状态良好。 2. 仪器导联 （1）张力换能器接通道 1； （2）神经干接刺激电极。 3. 骨骼肌收缩特性分析 标本制成后，当证明标本的兴奋性良好后置于任式液中 10-15min，待其兴奋性稳定后，再进行实验。 （1）给予 1 次阈上刺激，观察肌肉收缩情况； （2）给予阈下刺激，观察是否引起肌肉收缩； （3）加强阈上刺激，观察肌肉收缩情况； （4）用同等强度的连续阈上刺激作用于标本时，肌肉收 缩出现怎样的变化？ （5）串刺激（低频）连续刺激，观察不完全强直收缩。 （6）串刺激（高频）连续刺激，观察完全强直收缩。 4. 实验结果检查（20 分钟） 教学重点 阈刺激、单收缩、不完全强直收缩、完全强制收缩 教学难点 刺激强度、刺激频率与骨骼肌收缩的关系。 作业与 习题 观察记录上述不同刺激对蛙腓肠肌收缩的影响，并分析讨论。 肌肉收缩曲线图 教材和参考 文献 金天明主编，动物生理学实验教程. 清华出版社. 2012. 教学后记 负责人签字 系主任（签字） 课程负责人任（签字） 年 月 日 年 月 日 实验名称