第三章核酸技术
第三章 核 酸 技 术
核酸的分离和纯化·核酸电泳·染色体DNA电泳·DNA限制酶切反应和限制酶谱绘制·DNA的连接·PCR技术·分子杂交技术核酸序列的测定
•核酸的分离和纯化 •核酸电泳 •染色体DNA电泳 •DNA限制酶切反应和限制酶谱绘制 •DNA的连接 •PCR技术 •分子杂交技术 •核酸序列的测定
第一节核酸的分离和纯化
第一节 核酸的分离和纯化
一、一般程序1、供体的核酸分离供体细胞培养收集(菌体)细胞细胞破碎分离总DNA分离细胞器分离总RNA特异性RNA分离细胞器DNARNA poly(A)RNA染色体DNA（组建基因组文库）
一、一般程序 1、供体的核酸分离 供体细胞培养 收集(菌体)细胞 细胞破碎 分离总DNA 分离细胞器 分离总RNA 分离细胞器DNA RNA poly(A)RNA 特异性RNA 染色体DNA(组建基因组文库)
2、载体DNA分离载体DNA包（病毒型）（质粒型转化细菌细胞感染或转染细胞分离病毒颗粒培养转化细胞、收集菌体破碎细胞病毒载体DNA分离与纯化质粒DNA分离与纯化3、DNA片段的分离限制酶切一→凝胶电泳分离特定DNA片段的回收DNA
2、载体DNA分离 载体DNA 感染或转染细胞（病毒型） 转化细菌细胞（质粒型） 分离病毒颗粒 培养转化细胞、收集菌体 病毒载体DNA分离与纯化 破碎细胞 质粒DNA分离与纯化 3、DNA片段的分离 DNA 限制酶切 凝胶电泳分离 特定DNA片段的回收