第二节分子杂交及相关技术分子杂交，标记的探针DNA变性后与变性后的靶DNA/RNA通过碱基互补配对结合，形成杂种分子的过程分子杂交包括：[DNA-DNA杂交，DNA-RNA杂交及蛋白杂交等分子杂交的自的就是运用特异的探针鉴定复杂的靶DNA中同源的DNA片段
1 第二节 分子杂交及相关技术 分子杂交,标记的探针DNA变性后与变性后的 靶DNA/RNA通过碱基互补配对结合，形成杂种 分子的过程 。 分子杂交包括：DNA-DNA杂交，DNA-RNA杂交 及蛋白杂交等。 分子杂交的目的就是运用特异的探针鉴定 复杂的靶DNA中同源的DNA片段
双链probe或DNA解链，主要取决于：能量多才链的长度：链越长，需要的1能解链：2. 碱基成分：GC含量高，较难变性：甲酰3. 化学环境：单价阳离子稳定双链，胺，尿素破环双链
2 双链probe或DNA解链，主要取决于： 1．链的长度：链越长，需要的 能量多才 能解链； 2．碱基成分：GC含量高，较难变性； 3．化学环境：单价阳离子稳定双链，甲酰 胺，尿素破坏双链
一、杂交探针的获得是指一段自的基因或DNA/RNA片段特异杂交的核苷酸序列Probe可以是整个基因，或是基因的一部分是DNA，也可以是RNA
3 一、杂交探针的获得 ⚫ 是指一段目的基因或DNA/RNA片段特异杂交的 核苷酸序列。 ⚫ Probe可以是整个基因，或是基因的一部分， 是DNA，也可以是RNA
(一)制备特异性探针所需要的基本条件1.被检基因结构清楚；2.有明确的基因产物3.已知某一基因产物对表型的反应或缺少某一基因对表型的反应具备以上条件之一就可以制备特异性基因探针
4 （一）制备特异性探针所需要的基 本条件 1.被检基因结构清楚； 2.有明确的基因产物; 3.已知某一基因产物对表型的反应或缺少某 一基因对表型的反应。 具备以上条件之一就可以制备特异性基因探 针
特异探针的来源filteCellutaBacteriophagesgenomeTaCtDNA1、基因组Claavn withrestriction enzyme探针：filterwithFmer从已建立的基因组文库RecombinantDNA中筛选和分Hvbridphaae离所需的目autoradioaraptlocate desirecloneFiim的基因。克隆BacteriumInfoctionPiaque扩增Desiredclono大量的bactoriumDNA探针PhagecloneinplaqueocttrogtDacterialhostLibraryofphageclonePOEeaPNManufactureforeign gene
5 （二）特异探针的来源 ⚫ 1、基因组 探针： ⚫ 从已建立的 基因组文库 中筛选和分 离所需的目 的基因。 ⚫ 克隆 ⚫ 扩增 ⚫ 大量的 ⚫ DNA探针