成人教育学院哈丽演医科大學HMU继续教育学院HARBIN MEDICALUNIUERSITYLowry氏法测定蛋白质含量生物技术实验中心木直中绳博学载医
目的与要求：掌握Lowry氏法测定蛋白质含量的原理及方法；掌握分光光度法
目的与要求： ❑掌握Lowry氏法测定蛋白质含量的 原理及方法； ❑掌握分光光度法
实验原理：在碱性条件下蛋白质的肽键与Cu2+鳌合，形成蛋白质-铜复合物。（双缩脲反应BiuretReaction蛋白质分子中带有酚基的酪氨酸极易使酚试剂中的磷钼酸-磷钨酸还原，生成钼蓝-钨蓝蓝色化合物，蓝色深浅与蛋白质含量成正比。利用蓝色深浅与蛋白质浓度成正比的关系可绘制标准曲线，测定样品中蛋白质含量。（还原反应）
实验原理： ❑ 在碱性条件下蛋白质的肽键与Cu2+螯 合，形成蛋白质-铜复合物。（双缩脲反 应 Biuret Reaction） ❑ 蛋白质分子中带有酚基的酪氨酸极易 使酚试剂中的磷钼酸-磷钨酸还原，生成 钼蓝-钨蓝蓝色化合物，蓝色深浅与蛋白 质含量成正比。利用蓝色深浅与蛋白质浓 度成正比的关系可绘制标准曲线，测定样 品中蛋白质含量。（还原反应）
操作步骤1.取三支试管分两组，按下表操作201试管编号1.0牛血清白蛋白标准-1.0蒸馏水（mL）1.0待测蛋白质溶液（mL）-
操作步骤 1.取三支试管分两组，按下表操作 试管编号 0 1 2 牛血清白蛋白标准 - 1.0 - 蒸馏水(mL) 1.0 - - 待测蛋白质溶液(mL) - - 1.0
2.各管加入试剂甲5ml混匀放置10分钟3.各管加入试剂乙0.5ml后立即混匀，37℃水浴30分钟后用500nm单色光比色测定4.计算样品蛋白质含量（ug/ml）
2. 各管加入试剂甲5ml混匀放置10分钟。 3.各管加入试剂乙0.5ml后立即混匀，37℃ 水浴30分钟后用500nm单色光比色测定。 4.计算 样品蛋白质含量（ug/ml）