例子1：研究维生素缺乏症，可给以 缺乏某种维生素的饲料，若干天后 观察其病变情况，在加入该种维生 素，观察其症状有否好转，从而确 定该种维生素的功能。 例子2： “人工糖尿病” 。 例子3：生糖氨基酸； 生酮氨基酸
例子1：研究维生素缺乏症，可给以 缺乏某种维生素的饲料，若干天后 观察其病变情况，在加入该种维生 素，观察其症状有否好转，从而确 定该种维生素的功能。 例子2： “人工糖尿病” 。 例子3：生糖氨基酸； 生酮氨基酸
3、代谢物标记追踪实验 将代谢底物分子适当“标记” ，然后追 踪“标记”在细胞中的去向，就可以了 解底物分子在中间代谢中经过什么中间 产物，生成了什么终产物。 这是探索代谢途径最有效的方法。 标记方法有：化学标记法、同位素标记 法。 （1）化学标记法 1904年，德国F.Knoop首次用苯环标记 脂肪酸探讨中间代谢途径，提出著名的 脂肪酸β-氧化学说。 缺点：化学标记法使天然代谢物分子结 构和理化性质发生了改变，这可能给正 常代谢途径造成某些影响
3、代谢物标记追踪实验 将代谢底物分子适当“标记” ，然后追 踪“标记”在细胞中的去向，就可以了 解底物分子在中间代谢中经过什么中间 产物，生成了什么终产物。 这是探索代谢途径最有效的方法。 标记方法有：化学标记法、同位素标记 法。 （1）化学标记法 1904年，德国F.Knoop首次用苯环标记 脂肪酸探讨中间代谢途径，提出著名的 脂肪酸β-氧化学说。 缺点：化学标记法使天然代谢物分子结 构和理化性质发生了改变，这可能给正 常代谢途径造成某些影响
（2）同位素标记法 1941年，Rudolf Schoenheimer首次采用 同位素标记法进行实验。 同位素种类：稳定同位素和放射性同位 素。 二者区别：是否衰变、是否有射线。 常用的稳定同位素有：重氢（2H或D）、 15N、 13C、 18O等。 用“稳定性同位素”标记的化合物可用 质谱仪（mass spectrometer）定量测定， 也可用超离心法分离鉴定。 根据放射线同位素衰变时放出的射线性 质，可以用专门仪器或专用方法测定。 常用的放射性同位素有氘（T或3H）
（2）同位素标记法 1941年，Rudolf Schoenheimer首次采用 同位素标记法进行实验。 同位素种类：稳定同位素和放射性同位 素。 二者区别：是否衰变、是否有射线。 常用的稳定同位素有：重氢（2H或D）、 15N、 13C、 18O等。 用“稳定性同位素”标记的化合物可用 质谱仪（mass spectrometer）定量测定， 也可用超离心法分离鉴定。 根据放射线同位素衰变时放出的射线性 质，可以用专门仪器或专用方法测定。 常用的放射性同位素有氘（T或3H）
仪器： 盖格计数器 （ Geiger counter）、闪烁计数器。 例如：γ射线可用γ计数器测定； β射线可用液体闪烁计数器测定。 也可采用：放射自显影法 （autoradiography）感 光底片 感光显示标记物在细胞中的位置。 优点：1）同位素标记法特异性 强，灵敏度高，测定方法简便
仪器： 盖格计数器 （ Geiger counter）、闪烁计数器。 例如：γ射线可用γ计数器测定； β射线可用液体闪烁计数器测定。 也可采用：放射自显影法 （autoradiography）感 光底片 感光显示标记物在细胞中的位置。 优点：1）同位素标记法特异性 强，灵敏度高，测定方法简便
2）放射性同位素分析方法比 稳定同位素更方便、灵敏， 应用更普遍。 缺点：放射性同位素对人体 有毒害，某些同位素的半衰 期长，容易造成环境污染， 所以需要在专门的同位素实 验时进行
2）放射性同位素分析方法比 稳定同位素更方便、灵敏， 应用更普遍。 缺点：放射性同位素对人体 有毒害，某些同位素的半衰 期长，容易造成环境污染， 所以需要在专门的同位素实 验时进行