1) 吸附法(最古老、最简便经济) 特点: ●蛋白质与载体之间的结合力很弱 ●在很多情况下,酶的非特异性吸附常会引起部 分或全部失活,且高浓度的盐溶液或底物溶液又 将加速蛋白质的脱附
1) 吸附法(最古老、最简便经济) 特点: ●蛋白质与载体之间的结合力很弱 ●在很多情况下,酶的非特异性吸附常会引起部 分或全部失活,且高浓度的盐溶液或底物溶液又 将加速蛋白质的脱附
吸附剂的种类(1): ◆各种矿物质和其他无机载体:高岭土、多孔玻璃、 氧化铝、二氧化硅等 蛋白质结合量通常很低 ◆纤维素粉:糖苷水解酶在纤维素上有较强的吸附
吸附剂的种类(1): ◆各种矿物质和其他无机载体:高岭土、多孔玻璃、 氧化铝、二氧化硅等 蛋白质结合量通常很低 ◆纤维素粉:糖苷水解酶在纤维素上有较强的吸附
◆离子交换剂(目前最常用):羧甲基纤维素、DEAE-纤 维素、DEAE-葡聚糖以及合成的离子交换剂等 作用原理:静电吸引 缺点:当离子强度增加或者介质的pH、温度改变时,这种 结合发生分解。如果通过化学方法增加酶蛋白上的电荷则 可使这些影响得到改善。 第一个用于工业生产的固定化酶:固定化氨基酰化酶—— 将氨基酰化酶吸附在DEAE-纤维素或DEAE-葡聚糖上制得。 吸附剂的种类(2):
◆离子交换剂(目前最常用):羧甲基纤维素、DEAE-纤 维素、DEAE-葡聚糖以及合成的离子交换剂等 作用原理:静电吸引 缺点:当离子强度增加或者介质的pH、温度改变时,这种 结合发生分解。如果通过化学方法增加酶蛋白上的电荷则 可使这些影响得到改善。 第一个用于工业生产的固定化酶:固定化氨基酰化酶—— 将氨基酰化酶吸附在DEAE-纤维素或DEAE-葡聚糖上制得。 吸附剂的种类(2):
吸附剂的种类(3): ◆蛋白质载体:胶原蛋白是最常用的 一般胶原蛋白载体预先制成膜状(胶原膜),胶原膜溶 胀,然后浸入酶溶液,酶渗入膜内并被吸附,制成酶膜。 ◆生物特异性吸附剂:如,伴刀豆球蛋白A-琼脂糖, 可有效地固定一些以糖蛋白为结构的酶。伴刀豆球蛋白A 具有凝集红血球细胞和肿瘤细胞的作用,这种作用主要 是由于伴刀豆球蛋白A能够与细胞表面上的单糖和低聚糖 发生特异性结合。因此,当琼脂糖上结合有伴刀豆球蛋 白A 以后,它就能够与溶液中的多糖和糖蛋白发生特异 性结合
吸附剂的种类(3): ◆蛋白质载体:胶原蛋白是最常用的 一般胶原蛋白载体预先制成膜状(胶原膜),胶原膜溶 胀,然后浸入酶溶液,酶渗入膜内并被吸附,制成酶膜。 ◆生物特异性吸附剂:如,伴刀豆球蛋白A-琼脂糖, 可有效地固定一些以糖蛋白为结构的酶。伴刀豆球蛋白A 具有凝集红血球细胞和肿瘤细胞的作用,这种作用主要 是由于伴刀豆球蛋白A能够与细胞表面上的单糖和低聚糖 发生特异性结合。因此,当琼脂糖上结合有伴刀豆球蛋 白A 以后,它就能够与溶液中的多糖和糖蛋白发生特异 性结合
2) 包埋法(普适性) 包埋法:将酶包裹于凝胶格子或聚合物半透 膜微胶囊中的方法 特点: ● 酶分子本身不直接参加反应 ●条件较温和 ●酶活力回收较高 ●对底物分子和产物分子的大小有限制,当底物 和产物的相对分子质量小时,扩散阻力就小
2) 包埋法(普适性) 包埋法:将酶包裹于凝胶格子或聚合物半透 膜微胶囊中的方法 特点: ● 酶分子本身不直接参加反应 ●条件较温和 ●酶活力回收较高 ●对底物分子和产物分子的大小有限制,当底物 和产物的相对分子质量小时,扩散阻力就小