■同源重组的分子模型 ■大肠杆菌的同源重组 ■真核细胞的同源重组
◼ 真核细胞的同源重组 ◼ 同源重组的分子模型 ◼ 大肠杆菌的同源重组
同源重组的分子模型 T0考 Hollidayz模型 mmmnctmm t 相互入侵、交换 ● 两条同源DNA分子彼此并排 mmunn 对齐,对应的位置各产生1个 mOHmngt |製口连接 单链断裂。 T少实 mmm套 交义点迁移 T女HC ● 切口处发生链相互入侵、交 mmmmHn 换、连接,形成连接分子, Holliday连接 弯曲 即Holliday结构。 ●分支迁移,形成异源双链区。 旋转 剪切 切开同一条链 切开另外一策链 剪切 ●Holliday中间体的拆分:剪接 切口 重组DNA和补丁重组DNA 连接 mm 非重组型DNA III匹 重组型DNA mmm Tm工
同源重组的分子模型 ⚫ 两条同源DNA分子彼此并排 对齐,对应的位置各产生1个 单链断裂。 Holliday模型 ⚫ 切口处发生链相互入侵、交 换、连接,形成连接分子, 即Holliday结构。 ⚫ 分支迁移,形成异源双链区。 ⚫ Holliday中间体的拆分:剪接 重组DNA和补丁重组DNA
3'■ B c 5' ligation A ⊙ C 5' a' b' c 3'■ A b c 3'■ a b A B C endonuclease produces b' c' single-strand breaks(nicks) 3 a b C 3 A B C branch migration (heteroduplex formation) 5 a b' c 3' a b 3 A B A b strand invasion C B C' 3 A 3 B b C 5 B C b c 5 3 a b c
重组产物 如果切口发生在开始被切的 两条链上,拆分后形成补丁 重组DNA。除保留一段异源 双链区,其两侧来自同一亲 心旋转 本DNA 剪切 切开同一条链 切开另外一条链 ● 如果切开的链并非原来断裂 剪切 的链,产生剪接重组DNA。 切 重组体异源双链区的两侧来 切口 连接 连接 自不同亲本DNA。 T mimm 非重组型DNA 重组型DNA mmmm TIm匹
⚫ 如果切开的链并非原来断裂 的链,产生剪接重组DNA。 重组体异源双链区的两侧来 自不同亲本DNA。 ⚫ 如果切口发生在开始被切的 两条链上,拆分后形成补丁 重组DNA。除保留一段异源 双链区,其两侧来自同一亲 本DNA。 重组产物
电镜下的olliday结构
电镜下的Holliday结构