实验一 植物学基本实验技术 一实验目的： 1、熟悉显微镜使用和观察方法。 2、练习徒手切片的基本方法。 3、掌握临时装片的方法、技术。 4、掌握细胞观察与生物绘图的方法。理解细胞的结构。 二 实验仪器用品 常规用品：刀片、培养皿、滴瓶、镊子、解剂针、毛笔、载玻片、盖玻片、纱布、吸水纸、擦镜纸 显微镜（江光X2-212型） 三实验材料 1、鲜材料：萝卜根、洋葱鳞茎。 2、永久切片：洋葱表皮永久片。 3、试剂：1%碘液 四实验内容与方法： (一)、显微镜的基本构造 以实验室使用的双目光学显微镜为例，介绍显微镜的各部分构造。 目镜 铰链式双目镜筒 镜警 物镜转换器 物镜 聚光镜 载物台 粗调螺 细调蝶斑 光源开关 镜座 图1X-212型生物显微镜（铰链式双目镜筒 一侧
实验一 植物学基本实验技术 一 实验目的： 1、熟悉显微镜使用和观察方法。 2、练习徒手切片的基本方法。 3、掌握临时装片的方法、技术。 4、掌握细胞观察与生物绘图的方法。理解细胞的结构。 二 实验仪器用品： 常规用品：刀片、培养皿、滴瓶、镊子、解剖针、毛笔、载玻片、盖玻片、纱布、吸水纸、擦镜纸、 显微镜（江光 XZ－212 型） 三 实验材料： 1、 鲜材料：萝卜根、洋葱鳞茎。 2、 永久切片：洋葱表皮永久片。 3、 试剂：1% 碘液 四 实验内容与方法： （一）、显微镜的基本构造 以实验室使用的双目光学显微镜为例，介绍显微镜的各部分构造。 图 1 XZ-212 型生物显微镜（铰链式双目镜筒）一侧 目 镜 物镜转换器 物 镜 聚光镜 载物台 镜 臂 粗调螺旋 细调螺旋 光源开关 镜 座 铰链式双目镜筒
视度圈 镜筒紧固螺钉 调焦轴紧固环（禁止动） 电源线 集光镜 玻片推讲器 镜座 图2XZ-212型生物显微镜（铰链式双目镜筒）对侧 玻片夹 孔径光阑 聚光器调节旋钮 图3XZ-212型生物显微镜（铰链式双目镜筒）底部 放大倍数 00/1.25 10/025 数值孔径 160/0.17 160 玻片厚度 机械筒长(mm) 图4X2-212型生物显微镜物镜数字的意义
图 2 XZ-212 型生物显微镜（铰链式双目镜筒）对侧 图 3 XZ-212 型生物显微镜（铰链式双目镜筒）底部 图 4 XZ-212 型生物显微镜物镜数字的意义 玻片推进器 镜 座 集光镜 电源线 孔径光阑 聚光器调节旋钮 玻片夹 调焦轴紧固环（禁止动） 视度圈 镜筒紧固螺钉 放大倍数 数值孔径 玻片厚度 机械筒长(mm)
双目筒间距(mm) 图5XZ-212型生物显微镜目镜筒 (二)、显徽镜的使用方法 显微镜是结构精密的仪器，价值非常贵重，使用必须十分小心，切忌粗心大意，保证安全，高度警惕， 防止损坏。显微镜的使用包括对光和调焦两个方面。做到用好显微镜，就一定要严格遵守下列操作规程： 1.取镜： 要右手紧握镜臂，左手托稳镜座，镜体保持垂直平衡不得震动，严防目镜，反光镜（均为插入 式安装)甩落地面和粗调节器的脱口等损伤。将显微镜放置离桌边10公分处，镜臂对准胸前。 2.为了保持显微镜各部件的正常功能，要注意清洁，避免潮湿和灰尘。镜体机械部分用纱布擦拭，光学系 统部分用镜头刷清洁后，再用镜头纸轻轻擦拭。如镜头特别污浊，则需要用清洁剂清洁镜头，这时用擦 镜纸蘸少许来擦拭镜头。 3.对光： 第一步：检查显微镜电源开关，使其关闭：接通电源，打开开关至最大，然后，稍回一下开关 转轮。 第二步：用粗调节器将载物台提升到适当位置(9cm),然后转动物镜转换盘，将低倍镜(4X) 对准镜台孔，转动转换盘时注意不要用力过猛，同时必须用物镜转换盘的边缘转动，切忌扳住镜头转 换不同倍数的镜头，否则易使镜头光轴偏斜，而损伤显微镜的功能。 第三步：扳动铰链镜筒，调整镜筒间距，使其与个人的瞳孔距重合。 第四步：轻轻拨动虹彩光圈拨杆打开光圈，一边双眼对准接目镜观察，直至视野最为明亮呈乳 白色为止。 对好光后，不准再移动显微镜的位置
图 5 XZ-212 型生物显微镜目镜筒 （二）、显微镜的使用方法 显微镜是结构精密的仪器，价值非常贵重，使用必须十分小心，切忌粗心大意，保证安全，高度警惕， 防止损坏。显微镜的使用包括对光和调焦两个方面。做到用好显微镜，就一定要严格遵守下列操作规程： 1．取 镜： 要右手紧握镜臂，左手托稳镜座，镜体保持垂直平衡不得震动，严防目镜，反光镜（均为插入 式安装）甩落地面和粗调节器的脱口等损伤。将显微镜放置离桌边 10 公分处，镜臂对准胸前。 2．为了保持显微镜各部件的正常功能，要注意清洁，避免潮湿和灰尘。镜体机械部分用纱布擦拭，光学系 统部分用镜头刷清洁后，再用镜头纸轻轻擦拭。如镜头特别污浊，则需要用清洁剂清洁镜头，这时用擦 镜纸蘸少许来擦拭镜头。 3．对 光： 第一步：检查显微镜电源开关，使其关闭；接通电源，打开开关至最大，然后，稍回一下开关 转轮。 第二步：用粗调节器将载物台提升到适当位置（9cm），然后转动物镜转换盘，将低倍镜（4X） 对准镜台孔，转动转换盘时注意不要用力过猛，同时必须用物镜转换盘的边缘转动，切忌扳住镜头转 换不同倍数的镜头，否则易使镜头光轴偏斜，而损伤显微镜的功能。 第三步：扳动铰链镜筒，调整镜筒间距，使其与个人的瞳孔距重合。 第四步：轻轻拨动虹彩光圈拨杆打开光圈，一边双眼对准接目镜观察，直至视野最为明亮呈乳 白色为止。 对好光后，不准再移动显微镜的位置。 双目筒间距(mm)
4.低倍镜观察（对焦/调焦）： 将制好的切片，置镜台上，使材科对准镜台孔中央位置，用玻片夹固定住切片。 将低倍镜对准通光孔，使用粗调节器将载物台徐徐向上（低于9m工作距离）此时从左侧观看镜 头切勿接近切片，接者双眼观目镜，转动相调节器，缓缓下降载物台，直至观察到清晰物象为止。 5.高倍镜观察： 低倍镜观察后，需要再用高倍镜(40X)观察时，先将所要观察材料的部位对准视场中央。将镜头 转到高倍镜，使用高倍镜调焦时，细调节器只能转动半周，绝对不准超过180度，细调节器是镜体中最 精密部件，万万保护好。 观察完，取片前一定将镜头换到低倍镜后再抽片，以防磨损镜头 6.聚光器的使用： 聚光器聚集反光镜的光线，增强照明度。在低倍镜下不用聚光器，使用高倍镜时必须熟练地配合使 用聚光器。转动聚光器，并适当的提升或下降聚光器，调节视野明暗强度，方能观察到清晰的物象。 7.使用显微镜结束后，做到镜头、镜臂、聚光镜、反光镜退回原来的位置。戴好防尘罩。 (三)徒手切片方法： 是从事教学、科研及生产技术工作中常用的观察植物体内部构造的方法。 1、特点： (1)优点：设备用品简单：方法步骤简便，瞬间完成：可观察到组织细胞的生活状态和天然色彩： 可进行组织的显微化学鉴定：可根据需要再制成永久制片。 (2)缺点：切片的厚薄较难把握：切片常不完整：对太小、太大、太硬、太软等材料困难。 2、切前准备： (1)用品准备： 刀片：单面或双面，最好用不锈钢双面刀片，单面刀片用于较硬的材料。 培养皿：盛放1/4清水，用于浸泡切片。 盖玻片、载玻片：用纱布将擦拭干净。 清水滴瓶：盛放蒸馏水或洁净的水。 毛笔：用于取切片：解剖针：用于调整切片等：尖嘴镊子用于夹放盖玻片。 吸水纸：吸取多余的水分或试剂， (2)材料准备（萝卜）
4．低倍镜观察（对焦/调焦）： 将制好的切片，置镜台上，使材料对准镜台孔中央位置，用玻片夹固定住切片。 将低倍镜对准通光孔，使用粗调节器将载物台徐徐向上（低于 9mm 工作距离）此时从左侧观看镜 头切勿接近切片，接着双眼观目镜，转动粗调节器，缓缓下降载物台，直至观察到清晰物象为止。 5．高倍镜观察： 低倍镜观察后，需要再用高倍镜（40X）观察时，先将所要观察材料的部位对准视场中央。将镜头 转到高倍镜，使用高倍镜调焦时，细调节器只能转动半周，绝对不准超过 180 度，细调节器是镜体中最 精密部件，万万保护好。 观察完，取片前一定将镜头换到低倍镜后再抽片，以防磨损镜头。 6．聚光器的使用： 聚光器聚集反光镜的光线，增强照明度。在低倍镜下不用聚光器，使用高倍镜时必须熟练地配合使 用聚光器。转动聚光器，并适当的提升或下降聚光器，调节视野明暗强度，方能观察到清晰的物象。 7. 使用显微镜结束后，做到镜头、镜臂、聚光镜、反光镜退回原来的位置。戴好防尘罩。 （三）徒手切片方法： 是从事教学、科研及生产技术工作中常用的观察植物体内部构造的方法。 1、特点： （1）优点：设备用品简单；方法步骤简便，瞬间完成；可观察到组织细胞的生活状态和天然色彩； 可进行组织的显微化学鉴定；可根据需要再制成永久制片。 （2）缺点：切片的厚薄较难把握；切片常不完整；对太小、太大、太硬、太软等材料困难。 2、切前准备： （1）用品准备： 刀片：单面或双面，最好用不锈钢双面刀片，单面刀片用于较硬的材料。 培养皿：盛放 1/4 清水，用于浸泡切片。 盖玻片、载玻片：用纱布将擦拭干净。 清水滴瓶：盛放蒸馏水或洁净的水。 毛笔：用于蘸取切片；解剖针：用于调整切片等；尖嘴镊子用于夹放盖玻片。 吸水纸：吸取多余的水分或试剂。 （2）材料准备（萝卜）
①材料选择：软硬适度。②材料处理：修整成长2~3Cm、顶面边长2一5mm。③夹持物：萝卜、胡萝 卜或马铃薯块茎。用于夹持较软、较细或较薄的材料。 3、切片步骤：(1)握材。(2)持刀。(3)蓝水。(4)切割。(5)转移和保鲜。 (四)临时制片 1、载、盖玻片擦拭与滴水，2、毛笔选片与转移，3、盖片，4、染色与吸水 (五)装片类型与方法（简介） 切片类型一一徒手切片、机器切片 装片类型一一撕片、涂片、压片、离析片。 1、撕片法：(1)材料：表皮。(2)方法：切成“#”形 2、涂片法：(1)材料：悬浮液。(2)方法：推、匀、薄 3、压片法：(1)材料：脆嫩组织。(2)方法：轻、散 4、离析法：(1)材料：组织。 (2)方法：时间、温度、离析液浓度。 (六)细胞观泰—洋葱表皮细胞 1、内容：细胞形态、排列，细胞壁、膜、质、核、液泡。 2、注意：1%碘液染色，先低倍后高倍，必要时使用暗视野，禁用油镜。 (七)生物绘图 1、观察：目标的各部分比例关系、位置、结构特点。 2、起稿：在报告纸上确定画的位置与大小，用铅笔(2H或B)轻勾轮廊线。 注意：(1)各部分之间的比例与物象一致。 (2)画面稍左，右侧留有注字空间：图下留有图题空间。 3、定稿： 注意：线条粗细一致，清晰流畅，无接痕： 用“点点村阴”的方法表示物质的有无和密度，点的大小一致、琉密自然、禁止涂抹。 4、文字标注 在图下标明图的名称、放大倍数，在图的右侧引出平行的指示线，并注明结构名称， 5、要求：一律用铅笔，正楷书写。 (八)练习 1、徒手切片练习一一岁卜根 2、临时制片练习一一每人至少两片 3、撕片练习一—洋葱表皮
① 材料选择：软硬适度。②材料处理：修整成长 2～3cm、顶面边长 2～5mm。③ 夹持物：萝卜、胡萝 卜或马铃薯块茎。用于夹持较软、较细或较薄的材料。 3、切片步骤：（1）握材。（2）持刀。（3）蘸水。（4）切割。（5）转移和保鲜。 （四）临时制片 1、载、盖玻片擦拭与滴水，2、毛笔选片与转移，3、盖片，4、染色与吸水 （五）装片类型与方法（简介） 切片类型——徒手切片、机器切片 装片类型——撕片、涂片、压片、离析片。 1、撕片法：（1）材料：表皮。 （2）方法：切成“＃”形 2、涂片法：（1）材料：悬浮液。 （2）方法：推、匀、薄 3、压片法：（1）材料：脆嫩组织。 （2）方法：轻、散 4、离析法：（1）材料：组织。 （2）方法：时间、温度、离析液浓度。 （六）细胞观察——洋葱表皮细胞 1、内容：细胞形态、排列，细胞壁、膜、质、核、液泡。 2、注意：1% 碘液染色，先低倍后高倍，必要时使用暗视野，禁用油镜。 （七）生物绘图 1、观察：目标的各部分比例关系、位置、结构特点。 2、起稿：在报告纸上确定画的位置与大小，用铅笔（2H 或 HB）轻勾轮廓线。 注意：（1）各部分之间的比例与物象一致。 （2）画面稍左，右侧留有注字空间；图下留有图题空间。 3、定稿： 注意：线条粗细一致，清晰流畅，无接痕； 用“点点衬阴”的方法表示物质的有无和密度，点的大小一致、疏密自然、禁止涂抹。 4、文字标注 在图下标明图的名称、放大倍数，在图的右侧引出平行的指示线，并注明结构名称。 5、 要求：一律用铅笔，正楷书写。 （八）练 习 1、徒手切片练习——萝卜根 2、临时制片练习——每人至少两片 3、撕片练习——洋葱表皮