DNA变性与复性
DNA变性与复性
核酸的变性 chapter】
DNA变性(DNA melting/denaturation) 核酸在理化因素的影响下，维持 双螺旋结构的作用力受到破坏， 双螺旋DNA 稳定的双螺旋结构松散为无规则 的单链结构。 变性DNA 不涉及核苷酸链中共价键的断裂
核酸在理化因素的影响下，维持 双螺旋结构的作用力受到破坏， 稳定的双螺旋结构松散为无规则 的单链结构。 DNA变性（DNA melting/denaturation） 不涉及核苷酸链中共价键的断裂
影响变性的因素 加热，高H,有机试剂（尿素、甲酰胺)，低离子强度等。 增色效应 DNA发生变性时溶液的光吸收值在260nm处会显著增强，这 种现象称为增色效应
加热，高pH，有机试剂（ 尿素、 甲酰胺 )，低离子强度等。 影响变性的因素 DNA发生变性时溶液的光吸收值在260nm处会显著增强，这 种现象称为增色效应。 增色效应
熔解曲线与Tm值 通过检测DNA溶液紫外吸收率 可以监控DNA的变性过程。典 12 单链 型的DNA熔解曲线呈S型。 熔解 核酸加热变性过程中，紫外光吸收 1.0 Tm=85.0℃ 值达到最大值的50%时所对应的温 双链 度称为核酸的解链温度，又称熔解 温度(Tm)。 0.8 72 76 80 84 88 92 96 温度/℃
通过检测DNA溶液紫外吸收率 可以监控DNA的变性过程。典 型的DNA熔解曲线呈S型。 熔解曲线与Tm值 核酸加热变性过程中，紫外光吸收 值达到最大值的50%时所对应的温 度称为核酸的解链温度，又称熔解 温度（Tm）