W 样品g数 56.11 1mol/LKoH标准溶液1mL所含氢氧化钾毫克(mg)数 若为固体样品,需先置于8090℃水浴熔化混匀后取样。 二、过氧化值测定 (一)原理 油脂氧化产生的过氧化物与碘化钾(KI)作用,碘被游离出,以硫代硫酸钠滴定并 计算出每100g油脂析出的碘量,即为过氧化值。过氧化值的高低表示油脂酸败的程度。 (二)试剂 1、饱和KI溶液:取KI10g,加水5mL,微热助溶,冷却贮于棕色瓶中。 2、氯仿一冰乙酸混合液(2:3):取氯仿40mL,加冰乙酸60mL,混匀。 3、0.002mol/L硫代硫酸钠标准溶液。 4、1%淀粉指示剂:取可溶性淀粉0.5g,加水5mL,混匀,慢慢倒入45mL沸水中, 边倒边搅拌,煮沸至成稀薄半透明液,临用时配制。 (三)步骤 精确称取混匀(必要时过滤)的样品23g于250mL碘量瓶中,加氯仿一冰乙酸混合 液30mL,使样品完全溶解。准确加入饱和KI溶液1mL,密塞并轻摇半分钟后放置暗处 静置3分钟,取出加水100mL,摇匀,立即用0.002mo1/L硫代硫酸钠标准溶液滴定至淡 黄色时,加淀粉指示剂1mL,再滴至兰色消失为终点。同时做试剂空白滴定。 试剂 样品1 样品2 对照 样品 2-3g 氯仿一冰乙酸混合 30mL 30mL 30mL 液(2:3) 饱和KI溶液mL 1 1 1 水(mL) 100 100 100 0.002mol/L硫代硫 滴定,记录用量 酸钠标准溶液mL 1%淀粉指示剂(mL) 1 1
(四)计算 (V1-V2)×mo1/L×0.1269×100 过氧化值(%) W V1 样品消耗硫代硫酸钠标准溶液的mL数 V2- 试剂空白消耗硫代硫酸钠标准溶液的mL数 mol/L------- 硫代硫酸钠标准溶液的mo1/L浓度 W 样品g数 0.1269 1mol/L硫代硫酸钠1mL相当碘的g数 第二部分综合设计型实验技能培养 实验一营养调查 营养调查是指通过横断面调查的方法来评估被调查人群的营养状况。 1.营养调查的目的: 了解调查对象膳食摄取情况:了解与营养状况有密切关系的调查对象体质与健康状 态,发现营养不平衡人群,为进一步营养监测和制定营养政策提供基础情况:对被调查 个体进行营养状况的综合判定和对人群营养条件、问题、改进措施进行研究分析。 2.营养调查的内容: 包括膳食调查、人体营养水平的生化检验、营养不足或缺乏的临床检查、人体测量 资料分析四方面的内容。 一、营养不足或缺乏的临床检查 (一)目的: 根据症状和体征检查结果判定营养不足和缺乏症。掌握检查项目、症状、体征与营养 素的关系表。 (二)营养素缺乏体征 营养素缺乏的体征 部位 体征 缺乏的营养素 全身 消瘦或浮肿,发育不良 热能、蛋白质、锌 贫血 蛋白质、铁、叶酸、维生素B12、B6、B2、C 皮肤 干燥,毛囊角化, 维生素A
毛囊四周出血点 维生素C 癞皮病皮炎 烟酸 阴囊炎,脂溢性皮炎 维生素B2 头发 稀少,失去光泽 蛋白质、维生素A 眼睛 毕脱氏斑,角膜干燥,夜盲 维生素A 唇 口角炎,唇炎 维生素B2 口腔 齿龈炎,齿龈出血,齿龈松肿 维生素C 舌炎,舌猩红,舌肉红 维生素B2、烟酸 地图舌 维生素B2、烟酸、锌 指甲 舟状甲 铁 骨骼 颅骨软化,方颅,鸡胸,串珠维生素D 肋,0型腿,X型腿 骨膜下出血 维生素C 神经 肌肉无力,四肢末端蚁行感, 维生素B1 下肢肌肉疼痛 二、人体测量资料分析 (一)身高和体重 体重反映一定时间内营养状况的变化:而身高可反映较长时期的营养状况。 1、理想体重: ±10%为正常范围,士10%~20%为超重或瘦弱,±20%以上为肥胖或极瘦弱。 2、体质指数: 18.5~24.9为正常:<16.0为重度消瘦:16.0~16.9为中度消瘦,17.0~18.4为 轻度消瘦:25~29.9为轻度消瘦:25~29.9为超重:>30为肥胖。 三、人体营养水平的生化检验 (一)目的: 借助生化、生理实验手段,发现人体临床营养不足、营养储备水平低下或营养过剩, 以便较早掌握营养失调征兆和变化动态,及时采取必要的预防措施。 (二)检测指标
机体营养素营养状沉实验室生化评价指标 评价内容 实验室生化指标 蛋白质 血清总蛋白、血清白蛋白、血清球蛋白、尿羟脯氨酸系数 血脂 总脂、甘油三酯、胆固醇、游离脂肪酸 钙、磷、VD 血清钙、血清无机磷、血清碱性磷酸酶、血浆25-0H-D 铁 全血血红蛋白、血清运铁蛋白饱和度、血清铁蛋白、血液红细胞压积、 红细胞游离原卟啉、血清铁、平均红细胞体积、平均红细胞血红蛋白量 (浓度) 锌 发锌、血浆锌、红细胞锌、血清碱性磷酸酶活性 维生素A 血清维生素A、暗适应能力、视黄醇结合蛋白、血清胡萝卜素 维生素D 血清25(OH)D、血清1.25(0H)D、血清碱性磷酸酶 维生素B1 血清硫胺素、尿中硫胺素、神经功能、红细胞转时醇酶活性 维生素B2 红细胞中核黄素、血清核黄素、尿中核黄素、核黄素肌酐比值 全血谷胱甘肽还原酶活性 尼克酸 尿中N-甲基尼克酰胺,神经功能 维生素B6 血清磷酸吡哆醛、红细胞谷丙转氨酶活性、色氨酸负荷后黄尿酸排出量、 神经功能、尿中4一吡哆酸 叶酸 血清叶酸、红细胞叶酸盐、组氨酸负荷后尿中亚胺甲基谷氨酸 红细胞各种指标、白细胞形态 维生素B12 血清(浆)维生素B12,尿中甲基丙二酸盐、红细胞各种指标、白细胞 形态、神经功能 维生素C 尿中抗坏血酸、血清抗坏血酸、白细胞抗坏血酸 1、血红蛋白的测定(毫克分子消光系数法) 掌握血红蛋白测定的原理和方法,指端采血方法:熟悉该方法作为人体营养水平鉴 定的一项常用生化检验项目,用来评价体内铁的营养水平。 (1)原理 血红蛋白经稀释液中的高铁氰化钾氧化成高铁血红蛋白,继后再与氰化钾反应,生 成高铁氰化血红蛋白(红色,极稳定)
试剂 组1 组2 稀释液(mL) 2.5 2.5 血液(微升) 10 10 混匀后,放置15min,540nm波长下0.5cm光径比色杯比色 某一物质的溶液在一定波长下光密度值(A)等于该物质溶液的消光系数(ε)乘 以它的毫克分子浓度(C),再乘以比色杯光径(L)(即A=εCL)。把某一物质配成一个 已知克分子浓度的溶液,测得光密度即可得该物质的消光系数(ε=A/CL)。稳定物质的 溶液的消光系统是恒定的。经测定,氰化高铁血红蛋白在540m波长下用0.5cm光径的 比色杯,其毫克分子消光系数为44。根据C=A/εL,只要测得光密度即可算出血红蛋白 浓度。 (2)仪器与试剂 1)分光光度计 2)血红蛋白吸管 3)采血针 4)称取NaHC0,(NaHC0,A.R.)140mg、高铁氰化钾200mg,氰化钾50mg,用水溶解 并稀释到1000ml,贮存于棕色试剂瓶内,在暗处或冰箱中保存,至少可稳定数月到一年。 (3)步骤 1)取试剂2.5mL放入5mL具塞试管中,加入10ul血液,混匀后,放置15min。 2)选用0.5cm光径比色杯,于540nm波长下,以试剂调零点,测定光密度。将所得 样品管之光密度乘以73.6,即为血红蛋白之浓度(g/d1) (4)结果计算 Dac X251 64458 Ct 44×0.5 10000 =73.6×光密度 Ct 待测的血红蛋白浓度(g/dL) Dac 高铁氰化血红蛋白在540nm波长测出的光密度 251 测定时血液的稀释倍数 44 高铁氰化血红蛋白的mg分子消光系数