复制：开始时，首先合成前体RNAIⅡ分子，在复制起始区上游 与DNA形成一种杂交体，杂交体被RnaseH酶所切割，从而释 放出3'-OH末端，作为供DNA聚合酶I合成DNA的引物。引导 质粒的复制过程。一旦DNA合成启动后，便不能改变其速度或 进程。 RNAI是由RNAII基因的反义链编码的1O8个碱基小分子转录 物。它折叠成可与新生RNA前体结合的三叶草结构，从而阻 止后者折叠成形成稳定杂交体所必需的二级结构。 另外，质粒本身编码的Rop蛋白能增强RNAI和RNAII的结合
复制：开始时，首先合成前体RNAⅡ分子，在复制起始区上游 与DNA形成一种杂交体，杂交体被RnaseH酶所切割，从而释 放出3′-OH末端，作为供DNA聚合酶Ⅰ合成DNA的引物。引导 质粒的复制过程。一旦DNA合成启动后，便不能改变其速度或 进程。 RNAⅠ是由RNAⅡ基因的反义链编码的108个碱基小分子转录 物。它折叠成可与新生RNA II前体结合的三叶草结构，从而阻 止后者折叠成形成稳定杂交体所必需的二级结构 。 另外，质粒本身编码的Rop蛋白能增强RNAⅠ和RNAⅡ的结合
因此，从本质上讲，CoE1质粒的复制启动显然是受一种负反馈 机理控制的。根据这种模型，细胞中RNAI分子的浓度是随着 质粒拷贝数的多寡而增减的。 例如，若细胞中质粒拷贝数下降到正常数值以下的水平， RNAI的浓度也就相应降低，于是质粒的复制也就受到较少的 抑制，结果导致其拷贝数的上升。 因此，只要削弱RNAI和RNAI之间的相互作用，将会增加质粒 的拷贝数
因此，从本质上讲，ColE1质粒的复制启动显然是受一种负反馈 机理控制的。根据这种模型，细胞中RNAⅠ分子的浓度是随着 质粒拷贝数的多寡而增减的。 例如，若细胞中质粒拷贝数下降到正常数值以下的水平， RNAⅠ的浓度也就相应降低，于是质粒的复制也就受到较少的 抑制，结果导致其拷贝数的上升。 因此，只要削弱RNAI和RNAII之间的相互作用，将会增加质粒 的拷贝数
②拷贝数 质粒拷贝数是指生长在标准的培养基条件下，每个细菌细胞 中所含有的质粒DNA分子的数目。 “严谨型”复制控制的质粒(stringent plasmid):低拷贝数 的质粒，每个宿主细胞中仅含有1-3拷贝； “松弛型”复制控制的质粒(relaxed plasmid:高拷贝数的 质粒，每个宿主细胞中可高达10-60拷贝
质粒拷贝数是指生长在标准的培养基条件下，每个细菌细胞 中所含有的质粒DNA分子的数目。 “严谨型”复制控制的质粒(stringent plasmid) ：低拷贝数 的质粒，每个宿主细胞中仅含有1-3 拷贝； “松弛型”复制控制的质粒(relaxed plasmid) ：高拷贝数的 质粒，每个宿主细胞中可高达10-60 拷贝。 ② 拷贝数
质粒 复制子 拷贝数 pBR322 pMB1 1520 pUC pMB1 500~700 PACYC p15A 10212 pSC101 pSC101 ~5 ColE1 ColE1 15~20
摇菌培养(pUC18)常加入氯霉素增加拷贝数 RNA分子作为调控物，不需要质粒编码的功能蛋白，而是完 全依靠宿主提供的半衰期较长的酶(DNA聚合酶I,DNA聚合 酶l,依赖于DNA的RNA聚合酶，以及宿主基因。 当存在抑制蛋白质合成并阻断细菌染色体复制的氯霉素或壮 观霉素等抗生素时，带有pMB1(或CoE1)复制子的质粒将继 续复制。 因此，即使蛋白质合成并非正在进行，复制依然能够我行我 素
摇菌培养（pUC18）常加入氯霉素增加拷贝数 RNA分子作为调控物，不需要质粒编码的功能蛋白，而是完 全依靠宿主提供的半衰期较长的酶（DNA聚合酶I，DNA聚合 酶III，依赖于DNA的RNA聚合酶，以及宿主基因。 当存在抑制蛋白质合成并阻断细菌染色体复制的氯霉素或壮 观霉素等抗生素时，带有pMB1(或ColE1)复制子的质粒将继 续复制。 因此，即使蛋白质合成并非正在进行，复制依然能够我行我 素