3.平滑肌纵切片的观察取猫胃的横切片,在低倍镜下观察,肠壁被染成粉红色的部 分为肌肉层,将光线调节略暗些,可见肌肉是由很多细梭形得细胞所组成,此即为平滑肌 细胞,核呈椭圆形,被染成蓝紫色。 4.心肌纵切片的观察在显微镜下观察心肌的切片。心肌是一特殊的肌肉组织,肌纤 维较短而分支,互相连接呈网状,纤维内丰富的肌浆,原纤维少,也有细的横纹。核1~ 2个,位于中央,在心肌纤维彼此衔接处有阶梯式的横线称闰盘,这是相邻两心肌细胞 分界的地方。 (五)神经组织: 1.取兔脊髓横切片,低倍镜下观察可见蝴蝶状灰质部分,中央小孔为中央管,包围 在灰质周围染色较淡的部分是白质。灰质较狭的一端为后角,较宽的为前角。在灰质前 角找到神经元后换高倍镜观察:呈囊泡状,居细胞中央,核内有染色较深的核仁,极明显, 从细胞体伸出多个突起,使整个细胞呈多角形或不规则形。由于突起在离开细胞不远处己 被切断,故看不到完整的树突和轴突,一般可根据轴突基部的轴丘处染色较浅(无尼氏体) 来识别轴突。 背正中隔 指 腹束正中製 图1.14脊威横切 田115脊健前角示运动神经元 2.有髓神经纤维 (①)轴索:轴突或长树突。表面有轴膜,内含轴浆和神经原纤维 (②)髓鞘:包在轴索外面的一层鞘状结构。呈节段状,每一节段由一个神经膜细胞构 成。 (③)神经膜:神经膜细胞的部分胞膜、胞质和胞核构成。 3.无髓神经纤维无髓鞘,即一个神经膜细胞包裹多条轴索,不再缠绕,部分轴索裸 露。神经冲动传导速度较慢。植物性神经的节后纤维及部分感觉神经纤维属于此类。 (六)细胞的有丝分裂:马如虫其它动物细胞的有丝分裂制片(示范) 在各示范切片中应辨认出染色体,中心粒及纺锤体。注意分裂各期的特点
8 3. 平滑肌纵切片的观察 取猫胃的横切片,在低倍镜下观察,肠壁被染成粉红色的部 分为肌肉层,将光线调节略暗些,可见肌肉是由很多细梭形得细胞所组成,此即为平滑肌 细胞,核呈椭圆形,被染成蓝紫色。 4. 心肌纵切片的观察 在显微镜下观察心肌的切片。心肌是一特殊的肌肉组织,肌纤 维较短而分支,互相连接 呈网状,纤维内丰富的肌浆,原纤维少,也有细的横纹。核 1~ 2 个,位于中央,在心肌 纤维彼此衔接处有阶梯式的横线称闰盘,这是相邻两心肌细胞 分界的地方。 (五)神经组织: 1. 取兔脊髓横切片,低倍镜下观察 可见蝴蝶状灰质部分,中央小孔为中央管,包围 在灰质周围染色较淡的部分是白质。 灰质较狭的一端为后角,较宽的为前角。在灰质前 角找到神经元后换高倍镜观察:呈囊泡状,居细胞中央,核内有染色较深的核仁,极明显; 从细胞体伸出多个突起,使整个细胞呈多角形或不规则形。由于突起在离开细胞不远处己 被切断,故看不到完整的树突和轴突,一般可根据轴突基部的轴丘处染色较浅(无尼氏体) 来识别轴突。 2. 有髓神经纤维 ⑴ 轴索:轴突或长树突。表面有轴膜,内含轴浆和神经原纤维。 ⑵ 髓鞘:包在轴索外面的一层鞘状结构。呈节段状,每一节段由一个神经膜细胞构 成。 ⑶ 神经膜:神经膜细胞的部分胞膜、胞质和胞核构成。 3. 无髓神经纤维 无髓鞘,即一个神经膜细胞包裹多条轴索,不再缠绕,部分轴索裸 露。神经冲动传导速度较慢。植物性神经的节后纤维及部分感觉神经纤维属于此类。 (六)细胞的有丝分裂:马蛔虫/其它动物细胞的有丝分裂制片(示范) 在各示范切片中应辨认出染色体,中心粒及纺锤体。注意分裂各期的特点。 图 1.14 脊髓横切 图 1.15 脊髓前角示运动神经元
前期:染色体出现,着色较深。中心粒已分裂为二,向两极移动,形成纺锤体。在前 期结束时,核仁及核膜消失。 中期:染色体排列在细胞赤道面上,中心粒己达两极,此时纺锤体最大。染色体数目 很清楚。 后期:各染色体已纵裂为二,分别向两极移动,细胞已开始分裂,细胞的中部出现凹 陷。 末期:细胞分裂为二,染色体消失,重新组成的核出现。 观看幻灯片:动物细胞的电子显微镜照片,示细胞膜、细胞核(核膜、核仁染色质丝)、 内质网、高尔基器、线粒体、溶酶体、中心粒等以及细胞分裂。有条件的可看细胞分裂电 是影。 四、作业 1.绘图:人口腔上皮细胞(绘2~3个细胞,详绘其中1个细胞)。 2.细胞的基本结构及其机能。细胞分裂各期有何特点。 3.4类基本组织的结构特点与主要机能。 编写人:吴卫 审校人:胡红英
9 前期:染色体出现,着色较深。中心粒已分裂为二,向两极移动,形成纺锤体。在前 期结束时,核仁及核膜消失。 中期;染色体排列在细胞赤道面上,中心粒已达两极,此时纺锤体最大。染色体数目 很清楚。 后期:各染色体已纵裂为二,分别向两极移动,细胞已开始分裂,细胞的中部出现凹 陷。 末期:细胞分裂为二,染色体消失,重新组成的核出现。 观看幻灯片:动物细胞的电子显微镜照片,示细胞膜、细胞核(核膜、核仁染色质丝)、 内质网、高尔基器、线粒体、溶酶体、中心粒等以及细胞分裂。有条件的可看细胞分裂电 影。 四、作业 1. 绘图:人口腔上皮细胞(绘 2~3 个细胞,详绘其中 1 个细胞)。 2. 细胞的基本结构及其机能。细胞分裂各期有何特点。 3. 4 类基本组织的结构特点与主要机能。 编写人:吴卫 审校人:胡红英
10 实验二原生动物门一草履虫的形态结构与生命活动 原生动物是最简单最原始的动物,一个原生动物体就只由一个细胞构成,但原生动物 的单个细胞不同于多细胞动物体内的一个细胞,它们可以其细胞质分化形成的各种细胞器 来行使多细胞动物的全部生命活动,从而成为一个完整的、独立的动物有机体。 草履虫的形态结构和生命活动充分地展现了原生动物的这些特征,并且草履虫对各种 刺激的反应也说明应激性是原生质的普遍特性。 草履虫个体较大,结构典型,观察方便,繁殖快速,易采集培养,是生命科学基础理 论研究的理想材料,尤其在细胞生物学、细胞遗传学研究中更具科学价值。 一、目的与内容 (一)实验目的 1.进一步熟悉和掌握显微镜的使用方法。 2.学习原生动物的分离和培养技术。 3.对运动活泼的微型动物的观察和实验方法。 4.通过实验,进一步认识和理解原生动物的单个细胞是一具完整的能独立生活的动物 有机体。 5.认识原生动物具有应激性:了解草履虫的科学研究价值 (二)实验内容 1.草履虫的采集、培养和分离。 2.活体形态结构观察和生命活动实验。 3.草履虫生殖装片的观察。 4.其它原生动物制片及观察:绿眼虫装片、间日疟原虫人血涂片观察。 二、实验材料与用品 (一)材料 大草履虫培养液,草履虫横分裂及接合生殖的装片,绿眼虫装片。 (二)用品 显微镜、体视显微镜、秒表、镊子、载玻片、盖玻片、试管、滴管、毛细滴管、玻棒、 烧杯、量筒、1ml移液管(吸管)、漏斗、滤纸、精密PH试纸(PH值0.5~5.0和50~7.0) 吸水纸、脱脂棉、橡皮吸球。 蓝黑墨水、冰醋酸、5%醋酸、洋红粉末(天然品、非化学合成)、1%氯化钠溶液、稻 草、蒸馏水。 三、操作与观察 (一)草履虫的采集、分离和培养 1.草履虫培养液的准备:将稻草剪成长约一寸的小段,每10g稻草加水1000ml, 煮沸,再继续煮30mm,然后停火冷却、过滤;用纱布包住盛稻草液的烧杯口,防止蚊
10 实验二 原生动物门—草履虫的形态结构与生命活动 原生动物是最简单最原始的动物,一个原生动物体就只由一个细胞构成,但原生动物 的单个细胞不同于多细胞动物体内的一个细胞,它们可以其细胞质分化形成的各种细胞器 来行使多细胞动物的全部生命活动,从而成为一个完整的、独立的动物有机体。 草履虫的形态结构和生命活动充分地展现了原生动物的这些特征,并且草履虫对各种 刺激的反应也说明应激性是原生质的普遍特性。 草履虫个体较大,结构典型,观察方便,繁殖快速,易采集培养,是生命科学基础理 论研究的理想材料,尤其在细胞生物学、细胞遗传学研究中更具科学价值。 一、目的与内容 (一)实验目的 1. 进一步熟悉和掌握显微镜的使用方法。 2. 学习原生动物的分离和培养技术。 3. 对运动活泼的微型动物的观察和实验方法。 4. 通过实验,进一步认识和理解原生动物的单个细胞是一具完整的能独立生活的动物 有机体。 5. 认识原生动物具有应激性;了解草履虫的科学研究价值。 (二)实验内容 1. 草履虫的采集、培养和分离。 2. 活体形态结构观察和生命活动实验。 3. 草履虫生殖装片的观察。 4. 其它原生动物制片及观察:绿眼虫装片、间日疟原虫人血涂片观察。 二、实验材料与用品 (一)材料 大草履虫培养液,草履虫横分裂及接合生殖的装片,绿眼虫装片。 (二)用品 显微镜、体视显微镜、秒表、镊子、载玻片、盖玻片、试管、滴管、毛细滴管、玻棒、 烧杯、量筒、1ml 移液管(吸管)、漏斗、滤纸、精密 PH 试纸(PH 值 0.5~5.0 和 5.0~7.0)、 吸水纸、脱脂棉、橡皮吸球。 蓝黑墨水、冰醋酸、5%醋酸、洋红粉末(天然品、非化学合成)、1%氯化钠溶液、稻 草、蒸馏水。 三、操作与观察 (一)草履虫的采集、分离和培养 1. 草履虫培养液的准备:将稻草剪成长约一寸的小段,每 10 g 稻草加水 1000 ml, 煮沸,再继续煮 30 min,然后停火冷却、过滤;用纱布包住盛稻草液的烧杯口,防止蚊
子等昆虫到培养液中产卵,搁置一天后便可以作为草履虫的培养液。 2.采集:草履虫多生活在湖沼、池塘、水田以及城市生活用水的下水沟中,以细菌 藻类和其它腐败的有机物为食。在水底沉渣表面浮有灰白色絮状物的有机物丰富的水中, 有大量草履虫。采集时,先将水搅浑,然后用注射器吸起,装入矿泉水瓶中即可。 3.分离与培养:将采集到的水样带回实验室,置于显微镜下进行观察,如发现草履 虫的数量较少可先行用培养液培养2~3天。分离时现将水样置于表面皿中,然后在体视 显微镜或低倍显微镜下,用毛细吸管将草履虫逐个吸出,接种到盛有培养液的烧杯中, 将此烧杯置于20~25℃、不被阳光直射的地方培养约一周左右,就可以获得大量的草履 虫。采集来的水样置于同样的地方保留备用。 ◆注:为了得到较纯的草履虫培养液,往往要进行多次分离培养,分离培养的次数越 多,得到的草履虫液就越纯。 (二)草履虫的形态结构与运动 1.草履虫临时装片的制备 为限制草履虫的迅速游动以便观察,先将少许棉花纤维撕松放在载玻片中部,再用滴 管吸取草履虫培养液滴1滴在棉花纤维之间,盖上盖玻片,在低倍镜下观察。如果草履虫 游动仍很快,则用吸水纸在盖玻片的一侧吸去部分水(注意不要吸干),再进行观察。 *注:制作草履虫活体临时装片时,为了观察效果好,一要注意滴加的草履虫液不能 太多,二要注意添加的棉花纤维不能太厚,三要注意避免气泡的产生。 2.草履虫的外形与运动 在低倍镜下,将光线适当调暗点,使草履虫与背景之间有足够的明暗反差。可见草履 虫形似倒置草鞋底,前端钝圆,后端稍尖,体表密布纤毛,体末端纤毛较长。从虫体前端 开始,体表有一斜向后行直达体中部的凹沟称口沟, 口沟处有较长而强的纤毛。 游泳时,草履虫全身纤毛有节奏地呈波状依次 快速摆动:由于口沟的存在和该处纤毛摆动有力, 而使虫体绕其中轴向左旋转,沿螺旋状路径前进。 ★当遇到阻挡物时,虫体如何游动? *注:用高倍镜时,一定要从低倍镜开始。将要 观察的部分移至视野正中央,再依次转动高倍镜。 在高倍镜下只能用细调焦螺旋调节,不能使用粗调 焦螺旋。 3.内部构造 图2.1显微镜下的草履虫 选择1个比较清晰而又不太活动的草履虫转高倍镜观察其内部构造。虫体的表面是表 膜,★注意当草履虫穿过棉花纤维时,其体形可否改变,为什么?紧贴表膜的一层细胞质 透明无颗粒,称外质,外质内有许多与表膜垂直排列的折旋旋光性较强的椭圆形刺丝泡: 外质以内的细胞质多颗粒,称为内质 虫体腹面口末端有一胞口,胞口后连一深入内质的弯曲短管,称胞咽,胞咽壁上生有 由长纤毛联合形成的波动膜。★注意观察口纤毛和胞咽波动膜的波动,其波动有何功用?
11 子等昆虫到培养液中产卵,搁置一天后便可以作为草履虫的培养液。 2. 采集:草履虫多生活在湖沼、池塘、水田以及城市生活用水的下水沟中,以细菌、 藻类和其它腐败的有机物为食。在水底沉渣表面浮有灰白色絮状物的有机物丰富的水中, 有大量草履虫。采集时,先将水搅浑,然后用注射器吸起,装入矿泉水瓶中即可。 3. 分离与培养:将采集到的水样带回实验室,置于显微镜下进行观察,如发现草履 虫的数量较少可先行用培养液培养 2~3 天。分离时现将水样置于表面皿中,然后在体视 显微镜或低倍显微镜下,用毛细吸管将草履虫逐个吸出,接种到盛有培养液的烧杯中, 将此烧杯置于 20~25 ℃、不被阳光直射的地方培养约一周左右,就可以获得大量的草履 虫。采集来的水样置于同样的地方保留备用。 *注:为了得到较纯的草履虫培养液,往往要进行多次分离培养,分离培养的次数越 多,得到的草履虫液就越纯。 (二)草履虫的形态结构与运动 1. 草履虫临时装片的制备 为限制草履虫的迅速游动以便观察,先将少许棉花纤维撕松放在载玻片中部,再用滴 管吸取草履虫培养液滴 1 滴在棉花纤维之间,盖上盖玻片,在低倍镜下观察。如果草履虫 游动仍很快,则用吸水纸在盖玻片的一侧吸去部分水(注意不要吸干),再进行观察。 *注:制作草履虫活体临时装片时,为了观察效果好,一要注意滴加的草履虫液不能 太多,二要注意添加的棉花纤维不能太厚,三要注意避免气泡的产生。 2. 草履虫的外形与运动 在低倍镜下,将光线适当调暗点,使草履虫与背景之间有足够的明暗反差。可见草履 虫形似倒置草鞋底,前端钝圆,后端稍尖,体表密布纤毛,体末端纤毛较长。从虫体前端 开始,体表有一斜向后行直达体中部的凹沟称口沟, 口沟处有较长而强的纤毛。 游泳时,草履虫全身纤毛有节奏地呈波状依次 快速摆动;由于口沟的存在和该处纤毛摆动有力, 而使虫体绕其中轴向左旋转,沿螺旋状路径前进。 ★当遇到阻挡物时,虫体如何游动? *注:用高倍镜时,一定要从低倍镜开始。将要 观察的部分移至视野正中央,再依次转动高倍镜。 在高倍镜下只能用细调焦螺旋调节,不能使用粗调 焦螺旋。 3. 内部构造 选择 1 个比较清晰而又不太活动的草履虫转高倍镜观察其内部构造。虫体的表面是表 膜,★注意当草履虫穿过棉花纤维时,其体形可否改变,为什么?紧贴表膜的一层细胞质 透明无颗粒,称外质,外质内有许多与表膜垂直排列的折旋旋光性较强的椭圆形刺丝泡; 外质以内的细胞质多颗粒,称为内质。 虫体腹面口末端有一胞口,胞口后连一深入内质的弯曲短管,称胞咽,胞咽壁上生有 由长纤毛联合形成的波动膜。★注意观察口纤毛和胞咽波动膜的波动,其波动有何功用? 图 2.1 显微镜下的草履虫
12 内质内大小不同的圆形泡,多为食物泡。在虫体的前、后猪各有一诱明的圆形泡,可 以伸缩,为伸缩泡。当伸缩泡主泡缩小时,可见其周围有6~7个放射状排列的长形透明 小管,即收集管。★注意前后2个伸缩泡之间及伸缩泡的主泡与收集管之间在收缩上有何 规律? 大草履虫有大、小2个细胞核,位于内质中央,生活时小核不易观察到。在盖玻片 侧滴1滴5%冰醋酸,另一侧用吸水纸吸引,使盖玻片下的草履虫浸在冰醋酸中。将光线 适当调亮,1~2m后,草履虫被杀死。在低倍镜下可见到虫体中部被染成浅褐色、呈肾 形的大核:转高倍镜调焦后,可见大核凹处有一点状的小核。 (三)食物泡的形 小 大核 成及变化 取1滴草履 虫培养液于另 载玻片中央,用牙 签蘸取少许洋红 粉末掺入草履虫 液滴中,混匀,再 加少量棉花纤维 并加盖玻片。立即 在物湘 胞虹 在低倍镜下寻搜 ·被棉花纤维阻 图2.2草履虫内部结构 拦而不易游动,但口沟未受压迫的草履虫,转高倍镜仔细观察食物泡的形成,其大小的变 化及在虫体内环流的讨程。 (四)草履虫的应激性实验 1。丝泡的发射 制备草履虫临时装片。在盖玻片的一侧滴1滴用蒸馏水稀释20倍的蓝黑墨水,另 侧用吸水纸吸引,使蓝黑墨水浸过草履虫。在高倍镜下观察,可见刺丝已射出,在草履虫 体周围呈乱丝状。★刺丝泡有何功用? 2.草通虫对水平衡的调节 ()配制系列浓度的氯化钠溶液用蒸馏稀释1%氯化钠溶液,配制成0.1%、0.3% 0.5%、0.6%(0.8%)等系列浓度的氯化钠溶液,分别置于小试管内。★试管上作好标记 (②)用不同浓度氯化钠溶液刺激草履虫取5块载玻片,第1块滴入蒸馏水作对照, 后4块分别滴入以上配制的系列浓度氯化钠溶液(★注意滴管勿混用)。再用毛细滴管吸 取密集草履虫培养液,分别滴一小滴于各载玻片的溶液中。★草履虫液不宜过多,以免稀 释了盐溶液:各浓度氯化钠溶液中滴入草履虫液先后间隔时间需掌握好,以保护各盐度喇 激草履虫5m后观察。混匀,加棉花纤维和盖玻片,制成临时装片,依次置显微镜下观 察。 (3)伸缩泡收缩频率的变动在低倍镜下选择1个清晰又次太活动的草履虫,转高倍 镜观察其伸缩泡的收缩。用秒表记录伸缩泡的收缩周期,重复3次计数,取平均值,并推
12 内质内大小不同的圆形泡,多为食物泡。在虫体的前、后端各有一透明的圆形泡,可 以伸缩,为伸缩泡。当伸缩泡主泡缩小时,可见其周围有 6~7 个放射状排列的长形透明 小管,即收集管。★注意前后 2 个伸缩泡之间及伸缩泡的主泡与收集管之间在收缩上有何 规律? 大草履虫有大、小 2 个细胞核,位于内质中央,生活时小核不易观察到。在盖玻片一 侧滴 1 滴 5 %冰醋酸,另一侧用吸水纸吸引,使盖玻片下的草履虫浸在冰醋酸中。将光线 适当调亮,1~2 min 后,草履虫被杀死。在低倍镜下可见到虫体中部被染成浅褐色、呈肾 形的大核;转高倍镜调焦后,可见大核凹处有一点状的小核。 (三)食物泡的形 成及变化 取 1 滴草履 虫培养液于另一 载玻片中央,用牙 签蘸取少许洋红 粉末掺入草履虫 液滴中,混匀,再 加少量棉花纤维 并加盖玻片。立即 在低倍镜下寻找 一被棉花纤维阻 拦而不易游动,但口沟未受压迫的草履虫,转高倍镜仔细观察食物泡的形成,其大小的变 化及在虫体内环流的过程。 (四)草履虫的应激性实验 1. 刺丝泡的发射 制备草履虫临时装片。在盖玻片的一侧滴 1 滴用蒸馏水稀释 20 倍的蓝黑墨水,另一 侧用吸水纸吸引,使蓝黑墨水浸过草履虫。在高倍镜下观察,可见刺丝已射出,在草履虫 体周围呈乱丝状。★刺丝泡有何功用? 2. 草履虫对水平衡的调节 ⑴ 配制系列浓度的氯化钠溶液 用蒸馏稀释 1%氯化钠溶液,配制成 0.1 %、0.3 %、 0.5 %、0.6 %(0.8 %)等系列浓度的氯化钠溶液,分别置于小试管内。★试管上作好标记。 ⑵ 用不同浓度氯化钠溶液刺激草履虫 取 5 块载玻片,第 1 块滴入蒸馏水作对照, 后 4 块分别滴入以上配制的系列浓度氯化钠溶液(★注意滴管勿混用)。再用毛细滴管吸 取密集草履虫培养液,分别滴一小滴于各载玻片的溶液中。★草履虫液不宜过多,以免稀 释了盐溶液;各浓度氯化钠溶液中滴入草履虫液先后间隔时间需掌握好,以保护各盐度刺 激草履虫 5 min 后观察。混匀,加棉花纤维和盖玻片,制成临时装片,依次置显微镜下观 察。 ⑶ 伸缩泡收缩频率的变动 在低倍镜下选择 1 个清晰又次太活动的草履虫,转高倍 镜观察其伸缩泡的收缩。用秒表记录伸缩泡的收缩周期,重复 3 次计数,取平均值,并推 图 2.2 草履虫内部结构