3、电泳。4、剥胶、显色。实验四核酸的分离提取、成分鉴定及含量测定时数：6学时【掌握】1、从动物组织提取DNA的原理和技术。2、核酸成分鉴定的方法。【内容】1、制备肝匀浆、2、分离细胞核和细胞质。3、抽提DNA。4、酸水解DNA并鉴定各自组成成分。5、成分鉴定的方法。实验五过氧化氢酶m测定时数：4学时【掌握】1、Km测定的概念及意义2、过氧化氢酶Km测定的原理及操作方法。3、作图法Km的测定。【内容】1、血液的稀释。2、H202浓度的标定。3、反应速度的测定4、计算、作图。实验六温度、PH和抑制剂对酶活性的影响及蔗糖酶的专一性时数：5学时【掌握】1、酶的概念及其化学本质。2、不同温度、不同pH对酶活性影响。3、竞争性抑制剂的作用原理。4、酶专一性的概念及蔗糖酶的专一性测定的原理和测定方法。【内容】1、测定不同温度对淀粉酶活性影响。2、测定不同pH对淀粉酶活性影响。3、丙二酸是琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制剂，检测抑制程度与浓度的关系。4、验证蔗糖酶的专一性。实验七胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响时数：6学时【掌握】1、血糖测定的原理与方法。2、血糖含量的正常范围及血糖水平恒定的意义。3、血糖含量的调节机制，肾上腺素和胰岛素对血糖浓度的影响。【内容】1、动物准备。2、注射激素前取血，按公斤体重分别给免子注射胰岛素和肾上腺素、再次取血。35
35 3、电泳。 4、剥胶、显色。 实验四 核酸的分离提取、成分鉴定及含量测定 时数：6 学时 【掌握】 1、从动物组织提取 DNA 的原理和技术。 2、核酸成分鉴定的方法。 【内容】 1、制备肝匀浆。 2、分离细胞核和细胞质。 3、抽提 DNA。 4、酸水解 DNA 并鉴定各自组成成分。 5、成分鉴定的方法。 实验五 过氧化氢酶 Km 测定 时数：4 学时 【掌握】 1、Km 测定的概念及意义。 2、过氧化氢酶 Km 测定的原理及操作方法。 3、作图法 Km 的测定。 【内容】 1、血液的稀释。 2、H2O2浓度的标定。 3、反应速度的测定。 4、计算、作图。 实验六 温度、pH 和抑制剂对酶活性的影响及蔗糖酶的专一性 时数：5 学时 【掌握】 1、酶的概念及其化学本质。 2、不同温度、不同 pH 对酶活性影响。 3、竞争性抑制剂的作用原理。 4、酶专一性的概念及蔗糖酶的专一性测定的原理和测定方法。 【内容】 1、测定不同温度对淀粉酶活性影响。 2、测定不同 pH 对淀粉酶活性影响。 3、丙二酸是琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制剂，检测抑制程度与浓度的关系。 4、验证蔗糖酶的专一性。 实验七 胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响 时数：6 学时 【掌握】 1、血糖测定的原理与方法。 2、血糖含量的正常范围及血糖水平恒定的意义。 3、血糖含量的调节机制，肾上腺素和胰岛素对血糖浓度的影响。 【内容】 1、动物准备。 2、注射激素前取血，按公斤体重分别给兔子注射胰岛素和肾上腺素、再次取血
3、邻-甲苯胺法测定注射前和注射后血糖。实验八血清清蛋白的分离及电泳鉴定时数：6学时【掌握】1、盐析法、凝胶层析分离提纯蛋白质的原理和方法。2、利用醋酸纤维薄膜电泳方法检测分离效果。【内容】1、盐析分段沉淀血清蛋白质。2、SophadexG-25凝胶层析脱盐。3、点样、电泳、染色、漂洗。4、观察电泳图谱。实验九课堂讨论时数：4学时【内容】1、血糖浓度为什么能保持动态平衡？2、筒要比较糖的无氧醇解和有氧氧化的起始物、终产物、ATP数目及进行部位的异同3、有氧氧化有什么生理意义？4、简述糖酵解的生理童义。5、简述磷酸戊糖途径的生理童义。6、筒述血糖有哪些来源与去路。7、肌糖原能否直接分解为葡萄糖？筒述其理由。8、乙酰CoA可由哪些物质代谢产生?它又有哪些代谢去路？9、什么是酮体？如何产生，又如何被氧化利用？10、葡萄糖能变成脂肪吗？脂肪能变成葡萄糖吗？若能，写出简要反应过程（中文）：若不能则需说明理由。11、试以脂类代谢及代谢紊乱的理论分析酮症、脂肪肝和动脉粥样硬化的成因。12、举例说明蛋白质一级结构与功能的关系，空间结构与功能的关系。13、举例说明实际工作中应用和避免蛋白质变性的例子。14、试述三大营养物质相互联系。15、何谓遗传学的中心法则？实验十实验考试时数：4学时【内容】每位同学独立完成某一定量实验，检测是否掌握生化基本技能。六、理论及实验考核形式和要求：理论考试，由教研室从国家试题库组题，分A，B卷，闭卷考试。实验技能考试和理论考试，成绩分别占30%，70%。七、推荐教材与参考书：1、《生物化学》（第七版），查锡良主编，人民卫生出版社（2008）2、《生物化学》（导读本），（英）黑姆斯等主编，科学出版社（2009）。3、《BIoCHEMISTRY》Authors:ReginaldH.Garrett,CharlesM.GrishamPublisher:Brooks ColePublished:20084、《普通生物化学》（第4版），郑集，陈钧辉编著。高等教育出版社（2007）5、《现代生物化学》（第二版），黄熙泰，于自然，李翠凤主编，化学工业出版社（2005）。6、《生物化学》（第三版，中译本），（英）黑姆斯等编著，王学敏，焦炳华主译，科学出版36
36 3、邻-甲苯胺法测定注射前和注射后血糖。 实验八 血清清蛋白的分离及电泳鉴定 时数：6 学时 【掌握】 1、盐析法、凝胶层析分离提纯蛋白质的原理和方法。 2、利用醋酸纤维薄膜电泳方法检测分离效果。 【内容】 1、盐析分段沉淀血清蛋白质。 2、Sophadex G-25 凝胶层析脱盐。 3、点样、电泳、染色、漂洗。 4、观察电泳图谱。 实验九 课堂讨论 时数：4 学时 【内容】 1、血糖浓度为什么能保持动态平衡? 2、筒要比较糖的无氧醇解和有氧氧化的起始物、终产物、ATP 数目及进行部位的异同。 3、有氧氧化有什么生理意义? 4、筒述糖酵解的生理童义。 5、简述磷酸戊糖途径的生理童义。 6、筒述血糖有哪些来源与去路。 7、肌糖原能否直接分解为葡萄糖?筒述其理由。 8、乙酰 CoA 可由哪些物质代谢产生?它又有哪些代谢去路? 9、什么是酮体? 如何产生，又如何被氧化利用？ 10、葡萄糖能变成脂肪吗？脂肪能变成葡萄糖吗? 若能，写出简要反应过程(中文)；若不能 则需说明理由。 11、试以脂类代谢及代谢紊乱的理论分析酮症、脂肪肝和动脉粥样硬化的成因。 12、举例说明蛋白质一级结构与功能的关系，空间结构与功能的关系。 13、举例说明实际工作中应用和避免蛋白质变性的例子。 14、试述三大营养物质相互联系。 15、何谓遗传学的中心法则？ 实验十 实验考试 时数：4 学时 【内容】 每位同学独立完成某一定量实验，检测是否掌握生化基本技能。 六、理论及实验考核形式和要求： 理论考试，由教研室从国家试题库组题，分 A,B 卷，闭卷考试。 实验技能考试和理论考试，成绩分别占 30%，70%。 七、推荐教材与参考书： 1、《生物化学》（第七版），查锡良主编，人民卫生出版社（2008）。 2、《生物化学》（导读本），（英）黑姆斯等主编，科学出版社（2009）。 3、《BIOCHEMISTRY》 Authors:Reginald H. Garrett, Charles M. Grisham Publisher: Brooks Cole Published: 2008 4、《普通生物化学》(第 4 版)，郑集，陈钧辉编著。高等教育出版社（2007）。 5、《现代生物化学》（第二版），黄熙泰，于自然，李翠凤主编，化学工业出版社（2005）。 6、《生物化学》（第三版，中译本），（英）黑姆斯 等编著，王学敏，焦炳华主译，科学出版
社（2010）。7、《高级生物化学与分子生物学实验教程》，袁榴娣主编，东南大学出版社（2006）。基础学院生物化学教研室编制37
37 社（2010）。 7、《高级生物化学与分子生物学实验教程》，袁榴娣主编，东南大学出版社（2006）。 基础学院生物化学教研室编制
《分子生物学》教学大纲《MoleculeBiology》课程类型：必修课/专业基础课30总学时：36实验学时：6理论学时：适用专业：生物技术课程简介：本课程分理论和实验两部分，教学大纲按教学内容分为重点掌握、熟悉、一般了解三个等级。理论部分：掌握分子生物学的基本理论和概念，熟悉研究动态和发展趋势及应用意义。实验部分：熟悉或掌握真核、原核DNA和RNA制备及含量测定，掌握Southern杂交，斑点杂交，酶切电泳，PCR等技术，熟悉DNA重组，探针制备，了解基因诊断和基因治疗，基因组和人类基因组计划。课程性质、目的和任务一、分子生物学（MolecularBiology）是当今生命科学的领先学科，其基本理论和技术，是生命科学和医学实践及研究的共同语言与工具。通过本课程的学习，指在使学生掌握分子生物学的基本理论与常用实验技术与方法，培养学生从分子水平认识和研究生命现象的能力，为后续课程的学习及今后的工作实践和科学研究奠定基础。二、学时分配章节及内容总学时理论学时实验学时教学方法99讲授第一章重组DNA技术66第二章核酸杂交技术讲授讲授第三章聚合酶链反应（PCR）4422讲授第四章转基因生物66讲授第五章基因诊断33第六章 基因治疗讲授33实验实验一质粒提取33实验实验二质粒鉴定36306合计二、理论教学内容及基本要求第一章 重组 DNA 技术教学时数：9学时教学目的与要求：【掌握】常用工具酶的作用，克隆载体的种类及应用，重组DNA技术的基本过程。【熟悉】真核细胞转染，克隆基因的表达。【了解】基因的定点诱变和蛋白质工程。第二章核酸分子杂交教学时数：6学时教学目的与要求：【掌握】Southern印迹杂交，Northern印迹杂交，斑点杂交，原位杂交的基本原理、步骤及其应用，核酸探针的概念及标记法。【熟悉】核酸分子杂交原理，限制性酶谱分析。38
38 《分子生物学》教学大纲 《Molecule Biology》 课程类型：必修课/专业基础课 总学时： 36 理论学时： 30 实验学时：6 适用专业：生物技术 课程简介： 本课程分理论和实验两部分，教学大纲按教学内容分为重点掌握、熟悉、一般了解三个 等级。理论部分：掌握分子生物学的基本理论和概念，熟悉研究动态和发展趋势及应用意义。 实验部分：熟悉或掌握真核、原核 DNA 和 RNA 制备及含量测定，掌握 Southern 杂交，斑点 杂交，酶切电泳，PCR 等技术，熟悉 DNA 重组，探针制备，了解基因诊断和基因治疗，基因 组和人类基因组计划。 一、 课程性质、目的和任务 分子生物学（Molecular Biology）是当今生命科学的领先学科，其基本理论和技术， 是生命科学和医学实践及研究的共同语言与工具。通过本课程的学习，旨在使学生掌握分子 生物学的基本理论与常用实验技术与方法，培养学生从分子水平认识和研究生命现象的能 力，为后续课程的学习及今后的工作实践和科学研究奠定基础。 二、学时分配 章节及内容 总学时 理论学时 实验学时 教学方法 第一章 重组 DNA 技术 第二章 核酸杂交技术 第三章 聚合酶链反应（PCR） 第四章 转基因生物 第五章 基因诊断 第六章 基因治疗 实验一 质粒提取 实验二 质粒鉴定 合 计 9 6 4 2 6 3 3 3 36 9 6 4 2 6 3 30 3 3 6 讲授 讲授 讲授 讲授 讲授 讲授 实验 实验 二、 理论教学内容及基本要求 第一章 重组 DNA 技术 教学时数：9 学时 教学目的与要求： 【掌握】常用工具酶的作用，克隆载体的种类及应用，重组 DNA 技术的基本过程。 【熟悉】真核细胞转染，克隆基因的表达。 【了解】基因的定点诱变和蛋白质工程。 第二章 核酸分子杂交 教学时数：6 学时 教学目的与要求： 【掌握】Southern 印迹杂交，Northern 印迹杂交，斑点杂交，原位杂交的基本原理、步骤 及其应用，核酸探针的概念及标记法。 【熟悉】核酸分子杂交原理，限制性酶谱分析
【了解】DNA芯片技术。第三章聚合酶链式反应教学时数：4学时教学目的与要求：【掌握】PCR反应原理与基本操作【熟悉】耐热DNA聚合酶，引物设计原理。【了解】反应条件优化及改进技术。第四章 转基因生物教学时数：2学时教学目的与要求：【掌握】掌握转基因动物及转基因植物的基本概念，掌握转基因动物的主要技术【熟悉】熟悉转基因动物技术的主要用途，熟悉转基因植物基因工程技术【了解】了解转基因植物的应用第五章基因诊断教学时数：6学时教学目的与要求：【掌握】掌握基因诊断、RFLP、微卫星、DNA指纹的概念。掌握等位基因特异寡核苷酸探针杂交法、限制性内切酶酶谱分析法、RFLP连锁分析法的基本原理及流程。【熟悉】熟悉基因诊断的特点。熟悉基因诊断常用技术的原理。熟悉单链构象多态性分析法的原理及流程。【了解】了解DNA指纹法的基本原理。了解基因诊断的应用。第六章 基因治疗教学时数：3学时教学目的与要求：【掌握】掌握基因治疗、基因增补、基因修饰、基因失活、病毒载体的概念。掌握基因治疗的基本策略掌握基因增补策略中常用技术的原理。掌握基因失活策略中常用技术的原理。【熟悉】熟悉反转录病毒载体和腺病毒载体的优缺点。熟悉基因治疗的基本程序。【了解】了解基因治疗的应用及存在的间题。四、实验名称及学时分配章节内容学时数实验一3质粒提取实验二3质粒鉴定合计6五、各实验教学内容及基本要求实验一质粒提取教学时数：3学时教学目的与要求：【掌握】质粒提取的原理和方法。【熟悉】熟悉质粒的基本特性。39
39 【了解】DNA 芯片技术。 第三章 聚合酶链式反应 教学时数：4 学时 教学目的与要求： 【掌握】PCR 反应原理与基本操作。 【熟悉】耐热 DNA 聚合酶，引物设计原理。 【了解】反应条件优化及改进技术。 第四章 转基因生物 教学时数：2 学时 教学目的与要求： 【掌握】掌握转基因动物及转基因植物的基本概念,掌握转基因动物的主要技术 【熟悉】熟悉转基因动物技术的主要用途,熟悉转基因植物基因工程技术 【了解】了解转基因植物的应用 第五章 基因诊断 教学时数：6 学时 教学目的与要求： 【掌握】 掌握基因诊断、RFLP、微卫星、DNA 指纹的概念。掌握等位基因特异寡核苷酸探 针杂交法、限制性内切酶酶谱分析法、RFLP 连锁分析法的基本原理及流程。 【熟悉】 熟悉基因诊断的特点。 熟悉基因诊断常用技术的原理。熟悉单链构象多态性分析 法的原理及流程。 【了解】 了解 DNA 指纹法的基本原理。了解基因诊断的应用。 第六章 基因治疗 教学时数：3 学时 教学目的与要求： 【掌握】掌握基因治疗、基因增补、基因修饰、基因失活、病毒载体的概念。掌握基因治疗 的基本策略. 掌握基因增补策略中常用技术的原理。 掌握基因失活策略中常用技术的原 理。 【熟悉】熟悉反转录病毒载体和腺病毒载体的优缺点。熟悉基因治疗的基本程序。 【了解】了解基因治疗的应用及存在的问题。 四、实验名称及学时分配 章节 内容 学时数 实验一 实验二 质粒提取 质粒鉴定 3 3 合 计 6 五、各实验教学内容及基本要求 实验一 质粒提取 教学时数：3 学时 教学目的与要求： 【掌握】质粒提取的原理和方法。 【熟悉】熟悉质粒的基本特性