化学实验国家级化学实验教学示范中心分光光度法基本原理简介【光度分析基本原理】分光光度法（spectrophotometry）是基于物质分子对光的选择性吸收而建立起来的分析方法。物质对单色光的吸收程度，可用透过率工或吸光度A表示（如图）：I0工（出射光强度）x100%.A=-1gTI.（入射光强度）06510m05用不同波长入的单色光照射，04测定吸光度A，如果以入为横坐标，4 0302A为纵坐标即可得一条曲线称为吸收01曲线（入~A曲线），并得到最大吸C40460500550600650收波长入max。长(m)吸收曲线朗伯-比耳定律表示：当一束单0.806A色光通过溶液时，其吸光度A与溶液OA浓度c和吸收光程b的乘积成正比，即02A=Ebc，式中E为比例常数，配制系06020.4列标准溶液，测定后得标准曲线（c(mmolL)c~A曲线）。标准曲线【分光光度计的基本组成】光源单色器样品室检测器显示器光路示意图a.光源：通常钨灯作为可见光区的光源，其辐射波长范围在320~~2500nm。氙灯作为紫外区的光源，其发射波长为185~400nm。b.单色器（又称波长控制器）：其作用是将光源发射的复合光分解成单色光，并可从中选出任一波长单色光的光学系统。包括狭缝、色散元件和准光装置。色散元件的作用是将复合光分解成单色光，有棱镜或光两种。c.样品室：样品室放置各种类型的吸收池（比色血）和相应的池架附件。吸收池主要有石英池（紫外）和玻璃池（可见）两种。d.检测器：利用光电效应将透过吸收池的光信号变成可测的电信号，比色Ⅱ常用的有光电池、光电管或光电倍增管等。e.结果显示记录系统上分7225K型可见分光光度计
化学实验国家级化学实验教学示范中心分光光度法测定阿司匹林中残留的水杨酸【实验目的】11.了解糖的基本性质和作用；2.掌握比色法定量分析的原理和方法；3.掌握分光光度计的基本构造及其使用方法。【知识点】1.朗伯-比耳定律；2.吸收曲线和标准曲线；3.显色反应；4.参比溶液。【实验原理】水杨酸(SA)与Fe3+在pH=3下发生1:1的络合反应，形成稳定的紫红色络合物，该络合物的在一定浓度范围内，络合物的浓度与吸光度满足朗伯一比尔定律：A=E-b·C。考虑到Fe3+水合离子（黄色）对吸光度的影响，选用相同浓度的Fe3+溶液作参比液。【实验步骤】1.0.0100molL-水杨酸标准溶液的配制取0.1000mol·L-水杨酸乙醇溶液10.00mL，用HAc-NaAc溶液定容于100mL容量瓶中。2.标准溶液的配制按表配制标准溶液于50mL的比色管中，用HAc-NaAc缓冲液定容。3.吸收曲线的绘制以0号的溶液为参比，在500-550nm的波长范围内以5nm为间隔，测定3号标准溶液的吸光度A并绘制吸收曲线（2~A曲线），确定入max。4.标准曲线的绘制在入max下，以0号的溶液为参比，测定1-6号溶液的A，绘制标准曲线（c~A）。5.自制样品中水杨酸残留的测定准确称取自制的乙酰水杨酸0.5~0.6g于100mL小烧杯中，用95%乙醇溶解并定容于50mL容量瓶。准确移取上述溶液3.00mL（视水杨酸含量适当调整）于50mL比色管中，加入3.00mL0.0100molL-1Fe3+标准溶液，用的HAc-NaAc溶液定容。以“0"号的溶液为参比，测定该溶液的A。【实验结果】1.绘制吸收曲线；2.绘制标准曲线；3.计算自制样品中水杨酸的含量（用mggl表示）
【实验结果】 1.绘制吸收曲线； 2.绘制标准曲线； 3.计算自制样品中水杨酸的含量（用mg·g-1表示）。 【实验步骤】 分光光度法测定阿司匹林中残留的水杨酸 【实验目的】1.了解糖的基本性质和作用； 2. 掌握比色法定量分析的原理和方法； 3. 掌握分光光度计的基本构造及其使用方法。 【知 识 点】1. 朗伯-比耳定律；2. 吸收曲线和标准曲线；3. 显色反应；4. 参比溶液。 国家级化学实验教学示范中心 化学实验 【实验原理】 水杨酸(SA)与Fe3+在pH=3下发生1:1的络合反应，形成稳定的紫红色络合物，该络合物的 在一定浓度范围内，络合物的浓度与吸光度满足朗伯一比尔定律：A=Ɛ·b·C。考虑到Fe3+水合 离子(黄色)对吸光度的影响，选用相同浓度的Fe3+溶液作参比液。 1. 0.0100 mol·L-1水杨酸标准溶液的配制 取0.1000mol·L-1水杨酸乙醇溶液10.00mL，用HAc-NaAc溶液定容于100 mL容量瓶中。 2．标准溶液的配制 按表配制标准溶液于50mL的比色管中，用HAc-NaAc缓冲液定容。 3. 吸收曲线的绘制 以0号的溶液为参比，在500-550nm的波长范围内以5nm为间隔,测定3号标准溶液的吸光度A 并绘制吸收曲线（λ ~A曲线），确定λ max。 4. 标准曲线的绘制 在λ max下，以0号的溶液为参比，测定1-6号溶液的A，绘制标准曲线(c~A）。 5. 自制样品中水杨酸残留的测定 准确称取自制的乙酰水杨酸0.5~0.6 g于100 mL小烧杯中，用95%乙醇溶解并定容于50 mL容 量瓶。准确移取上述溶液3.00mL（视水杨酸含量适当调整）于50mL比色管中，加入3.00mL 0.0100 mol·L-1 Fe3+标准溶液，用的HAc-NaAc溶液定容。以“0”号的溶液为参比，测定该溶液 的A