分光光度法测定阿司匹林中的残留酚一、实验目的1.掌握分光光度法的基本原理；2.掌握分光光度计的基本结构及其实验方法二、实验原理水杨酸(SA)与Fe3+pH值=3.0下发生1:1的络合反应，形成稳定的紫红色络合物，该络合物的在一定浓度范围内，络合物的浓度与吸光度满足朗伯一比尔定律：A=ε-b·C。考虑到Fe3+水合离子（黄色）对吸光度的影响，选用相同浓度的Fe3+溶液作参比液。有关分光光度法以及分光光度计的基本内容请参照书本P228页，并做好预习。三、仪器与试剂仪器：722分光光度计：电子分析天平；容量瓶；比色管：移液管。试剂：自制阿司匹林；乙醇pH值=3.0的CH:COOH一CH:COONa缓冲溶液：取冰醋酸50mL，加水800mL混合后，用NaOH调节pH值至3.0，再加水稀释至1000mL。0.0100mol-L-Fe3+标准溶液：准确称取FeC13-6HzO0.2703g，用上述pH值=3.0的缓冲溶液稀释定容于100mL容量瓶。0.01000mol-L-水杨酸（SA）标准乙醇溶液：准确称取0.6904g水杨酸，用乙醇稀释定容于500mL容量瓶中。四、实验步骤1.标准溶液的配制按表1配制标准溶液于25mL的比色管中，用pH值=3.0的HAc-NaAc缓冲液定容。表1标准溶液的配制5670234序号15.005.005.00Fe3+溶液/ml5.005.005.005.005.001.001.500.80SA加入量/ml00.100.200.400.602.吸收曲线的绘制以0号的溶液为参比，在500-550nm的波长范围内以5nm为间隔测定6号标准溶液的吸光度，以吸光度为纵坐标，相应的波长为横坐标，绘制吸收曲线，确定该实验条件下最大吸收波长。3.7标准曲线的绘制在上述实验得到的最大吸收波长下，以“0”号的溶液为参比，测定1-7号溶液的吸光度，以测得的吸光度为纵坐标，相应的水杨酸总量（mg）为横坐标，绘制标准曲线。自制样品中水杨酸残留的测定4.准确称取自制的乙酰水杨酸0.8~0.9g于100mL小烧杯中，用95%乙醇溶解，并定容于50mL容量瓶，摇匀。在比色管中，加入5.00mL0.0100mol-L-Fe3+标准溶液，用pH值=3.0的HAc-NaAc缓冲溶液稀释至约2/3（小于20mL）处，准确移取上述溶液1.00-5.00mL（视水杨酸含量适当调整），分几次加入样品溶液并轻轻摇匀后观察溶液颜色，使颜色处于标准溶液系列的中间准确记录加入的样品溶液体积数后，再稀释至25.00mL。以“0”号的溶液为参比，测定该溶液的吸光度。五、实验结果1.吸收曲线的绘制2
分光光度法测定阿司匹林中的残留酚 一、实验目的 1. 掌握分光光度法的基本原理； 2. 掌握分光光度计的基本结构及其实验方法 二、 实验原理 水杨酸(SA)与Fe3+pH值=3.0下发生1:1的络合反应，形成稳定的紫红色络合物，该络合 物的在一定浓度范围内，络合物的浓度与吸光度满足朗伯一比尔定律：A=ε·b·C。考虑到 Fe3+水合离子(黄色)对吸光度的影响，选用相同浓度的Fe3+溶液作参比液。 有关分光光度法以及分光光度计的基本内容请参照书本P228页，并做好预习。 三、仪器与试剂 仪器：722 分光光度计；电子分析天平；容量瓶；比色管；移液管。 试剂： 自制阿司匹林；乙醇 pH值=3.0的CH3COOH—CH3COONa缓冲溶液：取冰醋酸50mL，加水800mL混合后， 用NaOH调节pH值至3.0，再加水稀释至1000mL。 0.0100mol·L -1 Fe3+标准溶液：准确称取FeC13·6H2O 0.2703g，用上述pH值=3.0的缓冲 溶液稀释定容于100mL容量瓶。 0.01000mol·L-1水杨酸（SA）标准乙醇溶液：准确称取0.6904g水杨酸，用乙醇稀释定 容于500mL容量瓶中。 四、实验步骤 1. 标准溶液的配制 按表1 配制标准溶液于25mL的比色管中，用pH值=3.0的HAc-NaAc缓冲液定容。 表1 标准溶液的配制 2. 吸收曲线的绘制 以 0 号的溶液为参比，在 500-550nm 的波长范围内以 5nm 为间隔测定 6 号标准溶液的 吸光度，以吸光度为纵坐标，相应的波长为横坐标，绘制吸收曲线，确定该实验条件下最大 吸收波长。 3. 标准曲线的绘制 在上述实验得到的最大吸收波长下，以“0”号的溶液为参比，测定1-7号溶液的吸光 度，以测得的吸光度为纵坐标，相应的水杨酸总量（mg）为横坐标，绘制标准曲线。 4. 自制样品中水杨酸残留的测定 准确称取自制的乙酰水杨酸 0.8~0.9 g 于 100 mL 小烧杯中，用 95%乙醇溶解，并定容于 50 mL 容量瓶，摇匀。 在比色管中，加入 5.00mL0.0100mol·L-1Fe3+标准溶液，用 pH 值=3.0 的 HAc-NaAc 缓冲 溶液稀释至约 2/3（小于 20mL）处，准确移取上述溶液 1.00-5.00mL（视水杨酸含量适当调 整），分几次加入样品溶液并轻轻摇匀后观察溶液颜色，使颜色处于标准溶液系列的中间， 准确记录加入的样品溶液体积数后，再稀释至 25.00mL。以“0”号的溶液为参比，测定该 溶液的吸光度。 五、 实验结果 1. 吸收曲线的绘制 λ 序号 0 1 2 3 4 5 6 7 Fe3+溶液/ml 5.00 5.00 5.00 5.00 5.00 5.00 5.00 5.00 SA 加入量/ml 0 0.10 0.20 0.40 0.60 0.80 1.00 1.50
520525530波长（nm）500505510515吸光度波长（nm）535540545550吸光度标准曲线的绘制（由1-7号作图，列出拟合方程和相关系数）2.序号1235674水杨酸（mg）吸光度自制样品中水杨酸残留的测定3.样品质量：ms=g:mL加入的样品溶液体积数Vx-吸光度Ax-从标准曲线中查得相应的水杨酸的质量：ms=mg:样品中水杨酸的质量分数W1=（计算过程请详细列出）六、思考题分光光度法定量分析的基本原理是什么？1.分光光度计是由哪些基本构件组成的？2.3.讨论影响本实验结果准确度的因素
2．标准曲线的绘制（由 1-7 号作图，列出拟合方程和相关系数） 3. 自制样品中水杨酸残留的测定 样品质量：ms = g； 加入的样品溶液体积数 Vx= mL 吸光度 Ax= ； 从标准曲线中查得相应的水杨酸的质量：mx = m g； 样品中水杨酸的质量分数 w1= （计算过程请详细列出） 六、思考题 1．分光光度法定量分析的基本原理是什么？ 2．分光光度计是由哪些基本构件组成的？ 3．讨论影响本实验结果准确度的因素。 波长（nm） 500 505 510 515 520 525 530 吸光度 波长（nm） 535 540 545 550 吸光度 序号 1 2 3 4 5 6 7 水杨酸（mg） 吸光度