化学实验国家级化学实验教学示范中心镇痛药百服宁和散利痛的薄层色谱分析【实验目的】1.理解薄层色谱法的原理及其应用：2.掌握薄层色谱法的实验操作技术：3.了解对多组分混合物中各组分进行分别鉴定的一般方法。【知识点】1.硅胶层析板的制作；2.薄层层析和显色操作；3.比移值的计算和理解。【实验原理）色谱分析是利用不同物质在两相（流动相和固定相）中具有不同的分配系数，当两相作相对运动时，这些物质在两相中进行多次反复的分配来达到分离的目的。在各种色谱技术中，薄层色谱法（ThinLayerChromatography，简写TLC）是一种经典的混合物分离技术。薄层层析中的吸附剂对混合物各成分的吸附能力不同，在展开剂作用下，它们发生解析的速度不同，迁移的速度也不同，从而得以分离；进而结合其他谱学分析方法确定各组分的结构。本实验分离分析镇痛药中扑热息痛和咖啡因，其分子结构式如下：NHCOCH3CH3H3C扑热息痛咖啡因OHCH3由于镇痛药中不同成分结构不同，可以通过薄层色谱分离各成分，并通过比较样品斑点与纯组分的比移值（R）初步确定其化学组成。当实验条件固定时，任何一种特定化合物的R。值是一个常数，可作为定性分析的依据。a层析板Pb展开剂层析缸
镇痛药百服宁和散利痛的薄层色谱分析 NHCOCH3 OH 国家级化学实验教学示范中心 化学实验 【实验原理】 色谱分析是利用不同物质在两相（流动相和固定相）中具有不同的分配 系数，当两相作相对运动时，这些物质在两相中进行多次反复的分配来达到分离的目的。在 各种色谱技术中，薄层色谱法 (Thin Layer Chromatography, 简写 TLC) 是一种经典的混 合物分离技术。薄层层析中的吸附剂对混合物各成分的吸附能力不同，在展开剂作用下，它 们发生解析的速度不同，迁移的速度也不同，从而得以分离；进而结合其他谱学分析方法确 定各组分的结构。本实验分离分析镇痛药中扑热息痛和咖啡因，其分子结构式如下： N N N N O CH3 H3C CH3 扑热息痛 O 咖啡因 由于镇痛药中不同成分结构不同，可以通过薄层色谱分离各成分，并通过比较样品斑点 与纯组分的比移值 (Rf) 初步确定其化学组成。当实验条件固定时，任何一种特定化合物的 Rf 值是一个常数，可作为定性分析的依据。 【实验目的】 1.理解薄层色谱法的原理及其应用； 2.掌握薄层色谱法的实验操作技术； 3.了解对多组分混合物中各组分进行分别鉴定的一般方法。 【知 识 点】 1.硅胶层析板的制作；2.薄层层析和显色操作；3.比移值的计算和理解。 层析缸 展开剂 层析板 a b Rf = a b
化学实验国家级化学实验教学示范中心【实验步骤】1.制板（2人一组，铺板6块）称取3g硅胶GF254于研钵中，加入8mL2.5%CMC调成糊状，研磨5min，待溶胀后铺板。即用研钵棒将调好的糊状硅胶均匀地涂在洗净干燥后的载玻片上在桌面上轻轻平敲，使薄层表面光滑并不含气泡，厚度0.25～1.0mm；置于白瓷盘中晾10~15min。2.活化将制好的薄板放入烘箱，升温至50C，烘15min；再升温到105～110℃，烘30min。3.样品液的制备（全班制备一份，在通风橱内操作）将半颗药片研成粉状，加15mL乙醇：二氯甲烷混合液（体积比1:2）搅拌10min后过滤，滤液收集于小试管中，用于薄层点样。4.点样取一块硅胶板，在距一端1cm处用铅笔轻轻画一条横线作为起始线。用毛细管在薄层板上点药品提取液，咖啡因标样和扑热息痛标样。样点间距1cm。如果样点颜色太浅，可重复点样，但必须待前次样点干燥后进行，点样原点不易过大。5.展开百服宁样品以乙酸乙酯为展开剂，散利痛样品以3：1的乙酸乙酯：石油醚为展开剂，均为8mL。待样点干燥后，小心地把层析板放入加有相应展开剂的125mL广口瓶中进行展开。盖好瓶盖，至展开剂前沿上升至距板的上端约1cm时取出并立即用铅笔标记展开剂前沿位置。6.鉴定待溶剂挥发干后，将层析板放在紫外灯下观察，可清晰看到对应组分的斑点，用铅笔绕斑点作出记号，计算各斑点的比移值，并将未知物和标准样品比较。【注意事项】1.薄层板制备好之后，一定要进行活化，除去水分。2.点样时要注意样点直径要不超过2mm。点几个样点时间隔应11.5cm。一次点样若不够，可多点几次，但要等溶剂挥发后再点下一次，防止量多出现拖尾现象。3.展开剂液面应始终低于点样线
国家级化学实验教学示范中心 化学实验 【注意事项】 1. 薄层板制备好之后，一定要进行活化，除去水分。 2. 点样时要注意样点直径要不超过 2 mm。点几个样点时间隔应 1～1.5 ㎝。一次点 样若不够，可多点几次，但要等溶剂挥发后再点下一次，防止量多出现拖尾现象。 3. 展开剂液面应始终低于点样线。 【实验步骤】 1.制板（2人一组，铺板6块） 称取 3g 硅胶 GF254 于研钵中，加入 8 mL 2.5‰ CMC 调成糊状，研磨 5min， 待溶胀后铺板。即用研钵棒将调好的糊状硅胶均匀地涂在洗净干燥后的载玻片上 ， 在桌面上轻轻平敲，使薄层表面光滑并不含气泡，厚度 0.25～1.0mm；置于白瓷 盘中晾 10～15 min。 2.活化 将制好的薄板放入烘箱，升温至 50 °C，烘 15 min；再升温到 105～110 °C，烘 30 min。 3.样品液的制备（全班制备一份，在通风橱内操作） 将半颗药片研成粉状，加 15 mL乙醇:二氯甲烷混合液（体积比 1:2）搅拌 10 min 后过滤，滤液收集于小试管中，用于薄层点样。 4.点样 取一块硅胶板，在距一端 1cm处用铅笔轻轻画一条横线作为起始线。用毛细管在 薄层板上点药品提取液，咖啡因标样和扑热息痛标样。样点间距 1cm。如果样点 颜色太浅，可重复点样，但必须待前次样点干燥后进行，点样原点不易过大。 5.展开 百服宁样品以乙酸乙酯为展开剂，散利痛样品以 3:1 的乙酸乙酯:石油醚为展开 剂,均为 8 mL。待样点干燥后，小心地把层析板放入加有相应展开剂的 125 mL 广口瓶中进行展开。盖好瓶盖，至展开剂前沿上升至距板的上端约 1cm时取出并 立即用铅笔标记展开剂前沿位置。 6.鉴定 待溶剂挥发干后，将层析板放在紫外灯下观察，可清晰看到对应组分的斑点，用 铅笔绕斑点作出记号，计算各斑点的比移值，并将未知物和标准样品比较