启动子结构对表达效率的影响 启动子-35区和-10区序列与通用转录序列 致,间距为17bp,大于17bp效果差, 不同产物选用不同启动子,如尿激酶用 ptac,IL2/2FUV用PP启动子效果好
启动子结构对表达效率的影响 • 启动子-35区和-10区序列与通用转录序列 一致，间距为17 bp，大于17bp效果差， 不同产物选用不同启动子，如尿激酶用 ptac，IL2/2FU-V用PRPL启动子效果好
表达载体的选择 载体分子量不宜过大,以2.5-56kb为佳, 高拷贝,不同产物选用不同类型表达载 体
表达载体的选择 • 载体分子量不宜过大，以2.5-5.6kb为佳， 高拷贝，不同产物选用不同类型表达载 体
外源基因(cDNA)中密码子 的作用 细菌中基因表达对密码子有偏爱性,不 偏爱的稀有密码子(AGA、AGG)表达 效果差,特别当有AGA-AGG连续序列存 在时表达效率低
外源基因（cDNA）中密码子 的作用 • 细菌中基因表达对密码子有偏爱性，不 偏爱的稀有密码子（AGA、AGG）表达 效果差，特别当有AGA-AGG连续序列存 在时表达效率低
mRNA的一级结构与基因表达 1.启始密码子:表达效率 AUG>GUGPUUG 2.SD序列:较长的效率高,如 UAAGGAGG比 AAGAA高三倍;SD序 列与AUG间距一般6-12bp,4-10bp较佳 9bp最佳;SD序列的5非翻译区,若有 5 UGAUCU,则有增强作用
mRNA的一级结构与基因表达 1. 启始密码子：表达效率 AUG>GUG>UUG 2. SD序列：较长的效率高，如 UAAGGAGG比AAGAA高三倍；SD序 列与AUG间距一般6-12bp，4-10bp较佳， 9bp最佳；SD序列的5’非翻译区，若有 5’-UGAUCU，则有增强作用
mRNA的二级结构对翻译起始 的影响 mRNA形成二级结构时,可产生茎环。 若SD序列、AUG位于茎环内或发夹内 转译受抑制;在茎环外则有利于转译 见表6-1
mRNA的二级结构对翻译起始 的影响 • mRNA形成二级结构时，可产生茎环。 若SD序列、AUG位于茎环内或发夹内， 转译受抑制；在茎环外则有利于转译。 见表6-1