第23卷第7 水产科学 Vol. 23, N. 7 FISHERIES SCIENCE 恩诺沙星及其代谢产物在吉富罗非鱼 中国对虾体内的残留规律研究 徐维海3,林黎明,朱校斌!,王新亭,黄新苹,康兴伦 (1.中国科学院海洋研究所生物工程中心,山东青岛266071;2.青岛出入境检验检疫局食品实验 室,山东青岛26602;3.中国科学院研究生院,北京100039) 摘要:模拟水产养殖实际,每天以剂量为50ugg(鱼体重)的恩诺沙星分别给吉富罗非鱼、中国 对虾投喂药饵,周期为7d,研究恩诺沙星在罗非鱼和对虾体内的残留与代谢规律,制定停药期。实 验结果发现,恩诺沙星在鱼、虾体内均代谢为环丙沙星。在停药的“零”时,鱼肌肉、肝脏和血液中 恩诺沙星的含量分别为(3.61±1.02)gg、(5.%±.12)ugg、(1.25±0.23)ugm,消除半衰期 分别为15.61,16.83,17.19h。鱼肌肉中代谢物环丙沙星的最高含量为(0.22±0.06)ugg,消除半衰 期673h;中国对虾体内恩诺沙星与环丙沙星的最高含量分别为(1.68±.41)ug!g、(0.066±0.03)ug g,消除半衰期分别为279,3.6h。在本实验条件下,建议罗非鱼的停药期为22d,中国对虾为12d 关键词:吉富罗非鱼;中国对虾;恩诺沙星;环丙沙星;代谢物 中图分类号:S963.732文献标识码:A 文章编号:1003-1111204)07-000504 吉富罗非鱼( Jifu Tilapia)具有生长速率快、实行全面禁运,直到6月才陆续开关,禁运期限达 鱼体高、背厚、出肉率高、遗传性状稳定等优点,6个月之久,给国家造成的损失近10亿元。2003 我国己经开展大规模的养殖,人工养殖产量已经居年,日本大量销毁从我国进口的鳗鱼,并停止向我 世界第一位1。中国对虾( Penaeus chinensis)是我国进口鳗鱼,给国家造成巨大的损失,原因就是因 国水产养殖重要种类,与墨西哥的棕虾、圭那亚的为鳗鱼中恩诺沙星含量超标。笔者研究了恩诺沙星 白虾并称世界三大名虾,全世界对虾的年贸易额已及其代谢产物在罗非鱼、中国对虾体内转化和残留 达70多亿美元。近年来,国际市场的对虾需求量规律,确定药物的停药期,以指导水产养殖合理用 不断增加,中国对虾尤其受欢迎,且价格稳中有药,确保水产品无药物残留,保障消费者身体健 升。日本是中国对虾出口的最大市场,占中国对虾康,扩大我国水产品出口。 出口总量的70%以上。恩诺沙星和环丙沙星是喹1材料与方法 诺酮类药物的第三代产品,对链球菌和表皮葡萄球1.1实验动物与养殖条件 菌有抑菌和杀菌作用,抗菌力强、体内分布广,抑 罗非鱼购自国家级青岛罗非鱼良种场,体重 菌和杀菌作用迅速、彻底,在水产养殖中应用非常(200±40)g,水温(27±2)℃,放养密度10尾/m3 广泛。但是由于缺乏相应的理论指导,忽略了养殖中国对虾购自青岛市水产品批发市场,体长(12± 环境恶化和药物滥用的问题,造成喹诺酮类药物在2)cm,体重(15+3)g,水温(17±3)℃,充气。实验动 水产品体内严重积累。我国出口水产品中抗菌药物物均在中国科学院海洋研究所水族楼暂养1个月 的残留超标问题已经引起世界各国的关注。2002每日换水1次,并投喂无药物残留饵料(青岛长生 年1月,因为“氯霉素”事件,欧盟对我国水产品中科水产饲料有限公司生产的“海森特”牌鱼饲 :说地 修回日期:2004-0 项目(20020B412402);中国科学院重大项目(KCX35W-215) ),男,硕士研究生,主要从事鱼虾病害的研究 2 01994-2007 China Academie Journal Electronie Publishing House. All rights reserved hup: /ws cnki.net
第 23 卷第 7 期 2004 年 7 月 水 产 科 学 FISHERIES SCIENCE Vol123 ,No17 July , 2004 恩诺沙星及其代谢产物在吉富罗非鱼、 ① 中国对虾体内的残留规律研究 徐维海1 ,3 , 林黎明2 , 朱校斌1 , 王新亭1 , 黄新苹1 , 康兴伦1 (11 中国科学院海洋研究所 生物工程中心 , 山东 青岛 266071 ; 21 青岛出入境检验检疫局 食品实验 室 , 山东 青岛 266002 ; 31 中国科学院 研究生院 , 北京 100039) 摘 要 : 模拟水产养殖实际 , 每天以剂量为 50μg/ g (鱼体重) 的恩诺沙星分别给吉富罗非鱼、中国 对虾投喂药饵 , 周期为 7 d , 研究恩诺沙星在罗非鱼和对虾体内的残留与代谢规律 , 制定停药期。实 验结果发现 , 恩诺沙星在鱼、虾体内均代谢为环丙沙星。在停药的“零”时 , 鱼肌肉、肝脏和血液中 恩诺沙星的含量分别为 (3161 ±1102) μg/ g、 (5196 ±2112) μg/ g、 (1125 ±0123) μg/ mL , 消除半衰期 分别为 15161 , 16183 , 17119 h。鱼肌肉中代谢物环丙沙星的最高含量为 (0122 ±0106) μg/ g , 消除半衰 期 6713 h ; 中国对虾体内恩诺沙星与环丙沙星的最高含量分别为 (1168 ±0141) μg/ g、(01066 ±0103) μg/ g , 消除半衰期分别为 2719 , 3316 h。在本实验条件下 , 建议罗非鱼的停药期为 22 d , 中国对虾为 12 d。 关键词 : 吉富罗非鱼 ; 中国对虾 ; 恩诺沙星 ; 环丙沙星 ; 代谢物 中图分类号 : S9631732 文献标识码 : A 文章编号 : 100321111 (2004) 0720005204 吉富罗非鱼 (Jifu Tilapia) 具有生长速率快、 鱼体高、背厚、出肉率高、遗传性状稳定等优点 , 我国已经开展大规模的养殖 , 人工养殖产量已经居 世界第一位[1 ]。中国对虾 ( Penaeus chinensis) 是我 国水产养殖重要种类 , 与墨西哥的棕虾、圭那亚的 白虾并称世界三大名虾 , 全世界对虾的年贸易额已 达 70 多亿美元。近年来 , 国际市场的对虾需求量 不断增加 , 中国对虾尤其受欢迎 , 且价格稳中有 升。日本是中国对虾出口的最大市场 , 占中国对虾 出口总量的 70 %以上。恩诺沙星和环丙沙星是喹 诺酮类药物的第三代产品 , 对链球菌和表皮葡萄球 菌有抑菌和杀菌作用 , 抗菌力强、体内分布广 , 抑 菌和杀菌作用迅速、彻底 , 在水产养殖中应用非常 广泛。但是由于缺乏相应的理论指导 , 忽略了养殖 环境恶化和药物滥用的问题 , 造成喹诺酮类药物在 水产品体内严重积累。我国出口水产品中抗菌药物 的残留超标问题已经引起世界各国的关注。2002 年 1 月 , 因为“氯霉素”事件 , 欧盟对我国水产品 实行全面禁运 , 直到 6 月才陆续开关 , 禁运期限达 6 个月之久 , 给国家造成的损失近 10 亿元。2003 年 , 日本大量销毁从我国进口的鳗鱼 , 并停止向我 国进口鳗鱼 , 给国家造成巨大的损失 , 原因就是因 为鳗鱼中恩诺沙星含量超标。笔者研究了恩诺沙星 及其代谢产物在罗非鱼、中国对虾体内转化和残留 规律 , 确定药物的停药期 , 以指导水产养殖合理用 药 , 确保水产品无药物残留 , 保障消费者身体健 康 , 扩大我国水产品出口。 1 材料与方法 111 实验动物与养殖条件 罗非鱼购自国家级青岛罗非鱼良种场 , 体重 (200 ±40) g ,水温 (27 ±2) ℃,放养密度 10 尾/ m3 ; 中国对虾购自青岛市水产品批发市场 , 体长(12 ± 2) cm ,体重(15 ±3) g ,水温(17 ±3) ℃,充气。实验动 物均在中国科学院海洋研究所水族楼暂养 1 个月 , 每日换水 1 次 , 并投喂无药物残留饵料 (青岛长生 中科水产饲料有限公司生产的“海森特”牌鱼饲 ① 收稿日期 : 2003 - 12 - 30 ; 修回日期 : 2004 - 03 - 01 基金项目 : “973”课题资助项目 (2002CB412402) ; 中国科学院重大项目 ( KJCX315W - 215) 1 作者简介 : 徐维海 (1978 - ) , 男 , 硕士研究生 , 主要从事鱼虾病害的研究 1 © 1994-2007 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http://www.cnki.net
水产科学 第23卷 用25m1%醋酸乙腈溶液重复提取1次,离心, 1.2仪器和设备 合并上清液,在分液漏斗中加入25m乙腈饱和正 Water∞2695高效液相色谱仪,配有二极管阵列己烷,反复震荡脱脂净化,静置分层后将下层液移 检测器和助温箱;均质器( ULTRA TURRAX);氮至100m蒸发瓶中,于40℃旋转蒸发近干,用氮 气浓缩装置( PIERCE MODEL1878);快速混匀器气吹干。加入1.5m流动相,快速混匀后置于超 (美国 MODEL M37610-26);旋转蒸发仪;高速台声波池中超声1min,移至1m一次性注射器中 式离心机( EPPENDOF,5810R);电子分析天平通过0.45um膜过滤到液相进样瓶中,待测 ( SARTORIUS R0D,精确至0.0001g);精密pH1.6色谱条件及工作曲线 计;一次性注射器滤器;过滤膜(0.45μm,DU 色谱条件:色谱柱ODS-C18(46mm×250 RAPORE)等。 mm);柱温35℃;流速1.0n/min;进样量30叽 1.3化学试剂与溶液 检测波长278mm。流动相:0.01ml/L磷酸盐/三 乙腈(色谱纯);冰醋酸(分析纯);磷酸(分乙胺缓冲液·乙腈按(80+20)混合,使用前超声 析纯);正己烷(色谱纯,经乙腈饱和);三乙胺脱气10mn (分析纯);无水硫酸钠(500℃灼烧4h,置于干燥 工作曲线:取一系列标准混合溶液,在上述色 器中备用);恩诺沙星、环丙沙星标准品(SAM谱条件下检测药物含量,作出标准曲线。 公司,含量大于999%;恩诺沙星原粉(河南大 结果与分析 明实业有限公司生产,含量大于98%,批号 2.1线形范围 在0~10ugym范围内线性关系良好,恩诺沙 质量浓度为50g/m.的恩诺沙星和环丙沙星星和环丙沙星的标准曲线回归方程分别为r 混合标准溶液;1%醋酸乙腈溶液(1000n的容2.873×102+3.39×103X,y=-4.55×103+3.02 量瓶中加入10m的醋酸,乙腊定容至刻度);X0x(药物浓度,x平均峰面积);相关系数 0.01m/L磷酸盐/三乙胺缓冲液(在1000n的 容量瓶中加入0.68nL磷酸,重蒸水定容至刻度 2.2恩诺沙星和环丙沙星的分离与检测 三乙胺调节pH3.0)。 恩诺沙星和环丙沙星同是喹诺酮类药物,并且 1.4给药方式及取样 环丙沙星是恩诺沙星脱去乙基后的产物,所以二者 将实验用罗非鱼、中国对虾随机分组,罗非鱼在化学性质上有一定的相似,作者采用HHC法同 每组6尾,中国对虾每组12尾,每天按50ug/g 时分离并检测了样品中恩诺沙星和环丙沙星的含 的剂量投喂药饵(称取72g恩诺沙星原粉和199量,操作简单、分离度好、准确度高,最低检出限 g无药物残留饵料混合后制成药饵),连续投喂7可达0.01uyg。图1为鱼肌肉中恩诺沙星和环丙 d,同时设对照组。停药后0,12,24,48,96 沙星的色谱图 144,192,288,384,528h取样,罗非鱼取其背部 肌肉、肝脏和血液,对虾取肌肉。 1.5药物的提取方法 准确称取4.0g样品放入50mL塑料离心管中 加入25mI%醋酸乙腈溶液(血液样品,需要加 入10g无水硫酸钠),高速均质3min后放入超声 波池中超声2min,然后6000r/min离心10min,把 上清液转移到250的棕色分液漏斗中,将残渣 图1鱼肌肉样品中恩诺沙星和环丙沙星的色谱图 2 01994-2007 China Academie Journal Electronie Publishing House. All rights reserved hup: /ws cnki.net
料) 。 112 仪器和设备 Waters2695 高效液相色谱仪 , 配有二极管阵列 检测器和助温箱 ; 均质器 (ULTRA TURRAX) ; 氮 气浓缩装置 (PIERCE MODEL 1878) ; 快速混匀器 (美国 MODEL M37610 - 26) ; 旋转蒸发仪 ; 高速台 式离心机 ( EPPENDOF , 5810R) ; 电子分析天平 (SARTORIUS R200D , 精确至 010001 g) ; 精密 pH 计 ; 一次性注射器滤器 ; 过滤膜 (0145μm , DU2 RAPORE) 等。 113 化学试剂与溶液 乙腈 (色谱纯) ; 冰醋酸 (分析纯) ; 磷酸 (分 析纯) ; 正己烷 (色谱纯 , 经乙腈饱和) ; 三乙胺 (分析纯) ; 无水硫酸钠 (500 ℃灼烧 4 h , 置于干燥 器中备用) ; 恩诺沙星、环丙沙星标准品 (SIGMA 公司 , 含量大于 9919 %) ; 恩诺沙星原粉 (河南大 明实 业 有 限 公 司 生 产 , 含 量 大 于 98 % , 批 号 20020804) 。 质量浓度为 50μg/ mL 的恩诺沙星和环丙沙星 混合标准溶液 ; 1 %醋酸乙腈溶液 (1000 mL 的容 量瓶中加入 10 mL 的醋酸 , 乙腈定容至刻度) ; 0101 mol/ L 磷酸盐/ 三乙胺缓冲液 (在 1000 mL 的 容量瓶中加入 0168 mL 磷酸 , 重蒸水定容至刻度 , 三乙胺调节 pH 310) 。 114 给药方式及取样 将实验用罗非鱼、中国对虾随机分组 , 罗非鱼 每组 6 尾 , 中国对虾每组 12 尾 , 每天按 50μg / g 的剂量投喂药饵 (称取 712 g 恩诺沙星原粉和 1993 g 无药物残留饵料混合后制成药饵) , 连续投喂 7 d , 同时设对照组。停药后 0 , 12 , 24 , 48 , 96 , 144 , 192 , 288 , 384 , 528 h 取样 , 罗非鱼取其背部 肌肉、肝脏和血液 , 对虾取肌肉。 115 药物的提取方法 准确称取 410 g 样品放入 50 mL 塑料离心管中 , 加入 25 mL 1 %醋酸乙腈溶液 (血液样品 , 需要加 入 10 g 无水硫酸钠) , 高速均质 3 min 后放入超声 波池中超声 2 min , 然后 6000 r/ min 离心 10 min , 把 上清液转移到 250 mL 的棕色分液漏斗中 , 将残渣 用 25 mL 1 %醋酸乙腈溶液重复提取 1 次 , 离心 , 合并上清液 , 在分液漏斗中加入 25 mL 乙腈饱和正 己烷 , 反复震荡脱脂净化 , 静置分层后将下层液移 至 100 mL 蒸发瓶中 , 于 40 ℃旋转蒸发近干 , 用氮 气吹干。加入 115 mL 流动相 , 快速混匀后置于超 声波池中超声 1 min , 移至 1 mL 一次性注射器中 , 通过 0145μm 膜过滤到液相进样瓶中 , 待测。 116 色谱条件及工作曲线 色谱条件 : 色谱柱 ODS - C18 ( 46 mm ×250 mm) ; 柱温 35 ℃; 流速 110 mL/ min ; 进样量 30μL ; 检测波长 278 nm。流动相 : 0101 mol/ L 磷酸盐/ 三 乙胺缓冲液 - 乙腈按 (80 + 20) 混合 , 使用前超声 脱气 10 min。 工作曲线 : 取一系列标准混合溶液 , 在上述色 谱条件下检测药物含量 , 作出标准曲线。 2 结果与分析 211 线形范围 在 0～10μg/ mL 范围内线性关系良好 , 恩诺沙 星和环丙沙星的标准曲线回归方程分别为 Y = - 21873 ×102 + 3139 ×105 X , Y = - 4155 ×103 + 3102 ×104 X ( Y 药物浓度 , X 平均峰面积) ; 相关系数 r > 019999。 212 恩诺沙星和环丙沙星的分离与检测 恩诺沙星和环丙沙星同是喹诺酮类药物 , 并且 环丙沙星是恩诺沙星脱去乙基后的产物 , 所以二者 在化学性质上有一定的相似 , 作者采用 HPLC 法同 时分离并检测了样品中恩诺沙星和环丙沙星的含 量 , 操作简单、分离度好、准确度高 , 最低检出限 可达 0101μg/ g。图 1 为鱼肌肉中恩诺沙星和环丙 沙星的色谱图。 图 1 鱼肌肉样品中恩诺沙星和环丙沙星的色谱图 6 水 产 科 学 第 23 卷 © 1994-2007 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http://www.cnki.net
第7期徐维海等恩诺沙星及其代谢产物在吉富罗非鱼、中国对虾体内的残留规律研究7 23恩诺沙星及其代谢物环丙沙星在罗非鱼、中织中大部分为其原形药物,而在牛及犬等动物体 国对虾组织中的浓度 内,约有23%及45%的恩诺沙星在体内代谢为环 将高效液相色谱测得的峰面积代入标准曲线所丙沙星,研究说明,动物的种属不同,其体内恩诺 绘制的回归方程,计算出药物在罗非鱼、中国对虾沙星代谢变化会有很大的差异。恩诺沙星的代谢物 组织中的浓度值(见表1、表2),对照组均未检环丙沙星同样具有抗菌活性,对多种致病菌的最低 出 抑菌浓度(MC)低于原型药物,而且分布快、作 表1罗非鱼组织中恩诺沙星和环丙沙星的残留量 用迅速、杀菌效果好,所以,恩诺沙星及其代谢产 环丙沙星 物环丙沙星在动物体内的共同作用是本药的最大特 t/ h 肌肉些g肝胖Bg血液m”肌肉点,也是此药效果优于其他同类药物而在动物中广 03.61±1.025.%6±.121.25±.230.15±0.08 122.16±.823.67±010.721.210.22±.06 泛应用的一个重要原因 240.901.161.9510.320.50±0.090.16±0.07 3.2恩诺沙星及其代谢物环丙沙星的残留 480.55±.111.91±0.240.34±0.070.14±.07 本实验严格模拟水产养殖实际状况,实验结果 960.24±0.091.091.120.059±.020.067±0.04 是多次喂药累积的结果。恩诺沙星在罗非鱼和中国 1440.12±.040.63±0.080.010.085±0.05 对虾体内呈有规律的递减。停药“零”点,罗非鱼 1920.11±.030.54±0.04 0.091±0.05 肌肉、肝脏和血液中药物累积达到最高,分别为 2880.087±0 0.38±0.05 0.069±0.04 (3.61±1.02)μg/g、(5.%6±.12)μglg、(1.25± 3840.056±0.010.18±0.02 0.23)ug/m,消除半衰期分别为15.61,16.8 17.19h。而中国对虾肌肉中恩诺沙星的最高含量 表2中国对虾肌肉中恩诺沙星和环丙沙星的残留量 仅为(1.68±0.41)ugg,消除半衰期为27.9h 说明以喂药饵的方式,罗非鱼对恩诺沙星的生物利 t/h恩诺沙星吗g 环丙沙星/哗gg1 用度要明显高于中国对虾。对于鱼虾,通常只把肌 1.68±0.41 0.066±0.06 肉作为可食部分,鱼肌肉和对虾肌肉中恩诺沙星含 1.62±0.57 0.061±0.04 量分别在384,288h低于0.1ug/g,符合欧盟、 0.931.16 0.045±0.03 0.38±0.05 0.015±0.01 日本等国家对我国水产品的残留要求。与恩诺沙 0.17±0.06 星相比,鱼肌肉中环丙沙星的消除呈不规则变化 0.06±0.03 在停药12h后含量达最高0.23ug/g,在停药96h 192 0.024±0.02 后又上升,528h后,则未检出,消除半衰期为 67.3h。由于恩诺沙星在中国对虾体内的代谢率很 注:“”未检出 低,所以中国对虾体内的环丙沙星的含量最高仅为 3讨论 (0.066±0.03)gg,消除半衰期为36h。环丙 3.1恩诺沙星的代谢 沙星在罗非鱼、中国对虾体内呈不规则变化主要是 恩诺沙星在牛、犬、兔、鸡28等体内均可以因为恩诺沙星在罗非鱼、中国对虾体内不断的代谢 脱去乙基产生活性代谢物环丙沙星。我们的研究结为环丙沙星,同时环丙沙星在不断地进行自身的代 果发现恩诺沙星在罗非鱼、中国对虾体内同样可以谢,鱼肌肉中环丙沙星的含量是恩诺沙星的代谢和 脱去乙基产生活性代谢物环丙沙星。但恩诺沙星在环丙沙星自身代谢的一个平衡。只要罗非鱼体内的 罗非鱼体内仅有很少一部分脱去乙基产生活性代谢恩诺沙星没有完全消除,其代谢物的生成过程就不 物环丙沙星,代谢率相对较低,而在中国对虾中代会停止,将一直影响环丙沙星的代谢。所以在水产 谢率更低。所以,恩诺沙星在罗非鱼和中国对虾组养殖中使用恩诺沙星要适当延长其停药期,以确 2 c1994-2007 China Academic Joumal Electronic Publishing House. All rights reserved. htp: /wne. cnki. net
213 恩诺沙星及其代谢物环丙沙星在罗非鱼、中 国对虾组织中的浓度 将高效液相色谱测得的峰面积代入标准曲线所 绘制的回归方程 , 计算出药物在罗非鱼、中国对虾 组织中的浓度值 (见表 1、表 2) , 对照组均未检 出。 表 1 罗非鱼组织中恩诺沙星和环丙沙星的残留量 t/ h 恩 诺 沙 星 肌肉/μg1g - 1 肝脏/μg1g - 1 血液/μg·mL - 1 环丙沙星 肌肉/μg·g - 1 0 3161 ±1102 5196 ±2112 1125 ±0123 0115 ±0108 12 2116 ±0182 3167 ±1101 0172 ±0121 0122 ±0106 24 0190 ±0116 1195 ±0132 0150 ±0109 0116 ±0107 48 0155 ±0111 1191 ±012 40134 ±0107 0114 ±0107 96 0124 ±0109 1109 ±0112 01059 ±0102 01067 ±0104 144 0112 ±0104 0163 ±0108 < 0101 01085 ±0105 192 0111 ±0103 0154 ±0104 / 01091 ±0105 288 01087 ±0102 0138 ±0105 / 01069 ±0104 384 01056 ±0101 0118 ±0102 / 01056 ±0103 528 / < 0101 / / 表 2 中国对虾肌肉中恩诺沙星和环丙沙星的残留量 t/ h 恩诺沙星/μg1g - 1 环丙沙星/μg1g - 1 0 1168 ±0141 01066 ±0106 12 1162 ±0157 01061 ±0104 24 0193 ±0116 01045 ±0103 48 0138 ±0105 01015 ±0101 96 0117 ±0106 < 0101 144 0106 ±0103 / 192 01024 ±0102 / 288 < 0101 / 注 : “/ ”未检出 3 讨论 311 恩诺沙星的代谢 恩诺沙星在牛、犬、兔、鸡[2～8 ]等体内均可以 脱去乙基产生活性代谢物环丙沙星。我们的研究结 果发现恩诺沙星在罗非鱼、中国对虾体内同样可以 脱去乙基产生活性代谢物环丙沙星。但恩诺沙星在 罗非鱼体内仅有很少一部分脱去乙基产生活性代谢 物环丙沙星 , 代谢率相对较低 , 而在中国对虾中代 谢率更低。所以 , 恩诺沙星在罗非鱼和中国对虾组 织中大部分为其原形药物 , 而在牛及犬等动物体 内 , 约有 23 %及 45 %的恩诺沙星在体内代谢为环 丙沙星 , 研究说明 , 动物的种属不同 , 其体内恩诺 沙星代谢变化会有很大的差异。恩诺沙星的代谢物 环丙沙星同样具有抗菌活性 , 对多种致病菌的最低 抑菌浓度 (MIC) 低于原型药物 , 而且分布快、作 用迅速、杀菌效果好 , 所以 , 恩诺沙星及其代谢产 物环丙沙星在动物体内的共同作用是本药的最大特 点 , 也是此药效果优于其他同类药物而在动物中广 泛应用的一个重要原因。 312 恩诺沙星及其代谢物环丙沙星的残留 本实验严格模拟水产养殖实际状况 , 实验结果 是多次喂药累积的结果。恩诺沙星在罗非鱼和中国 对虾体内呈有规律的递减。停药“零”点 , 罗非鱼 肌肉、肝脏和血液中药物累积达到最高 , 分别为 (3161 ±1102) μg/ g、(5196 ±2112) μg / g、(1125 ± 0123) μg / mL , 消除半衰期分别为 15161 , 16183 , 17119 h。而中国对虾肌肉中恩诺沙星的最高含量 仅为 (1168 ±0141) μg/ g , 消除半衰期为 2719 h , 说明以喂药饵的方式 , 罗非鱼对恩诺沙星的生物利 用度要明显高于中国对虾。对于鱼虾 , 通常只把肌 肉作为可食部分 , 鱼肌肉和对虾肌肉中恩诺沙星含 量分别在 384 , 288 h 低于 011μg / g , 符合欧盟、 日本等国家对我国水产品的残留要求[9 ] 。与恩诺沙 星相比 , 鱼肌肉中环丙沙星的消除呈不规则变化 , 在停药 12 h 后含量达最高 01223μg/ g , 在停药 96 h 后又上升 , 528 h 后 , 则未检出 , 消除半衰期为 6713 h。由于恩诺沙星在中国对虾体内的代谢率很 低 , 所以中国对虾体内的环丙沙星的含量最高仅为 (01066 ±0103) μg/ g , 消除半衰期为 3316 h。环丙 沙星在罗非鱼、中国对虾体内呈不规则变化主要是 因为恩诺沙星在罗非鱼、中国对虾体内不断的代谢 为环丙沙星 , 同时环丙沙星在不断地进行自身的代 谢 , 鱼肌肉中环丙沙星的含量是恩诺沙星的代谢和 环丙沙星自身代谢的一个平衡。只要罗非鱼体内的 恩诺沙星没有完全消除 , 其代谢物的生成过程就不 会停止 , 将一直影响环丙沙星的代谢。所以在水产 养殖中使用恩诺沙星要适当延长其停药期 ,以确 第 7 期 徐维海等 :恩诺沙星及其代谢产物在吉富罗非鱼、中国对虾体内的残留规律研究 7 © 1994-2007 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http://www.cnki.net
水产科学 第23卷 保水产品中无药物残留。在本实验条件下,建议罗1940 非鱼的停药期为22d,中国对虾为12d [5]胡功政,冯淇辉.恩诺沙星及其活性代谢物在鸡体内 的药物动力学[.中国兽医学报,1999,19(2):171 参考文献 l李家乐,李思发.中国大陆尼罗罗非鱼引进及研究进6】 Cinquin A L, Roberti F, Giannetti,ed. Determination of 展[]水产学报,2001,25(1):90-95 enrofloxacin and its metabolite ciprofloxacin in gpat milk by [2 Nitesh K, Singh S D, Jayachandran C Pharmacokinetics of highperformance liquid chromatography with diode array de Enrofloxacin and Its Active metabolite floxacin and Its tection Optimization and validation J]. Journal g Chromatog Interaction with diclofenac after Intravenous administration raphy 4,2003,987221-226 in Buffalo Calves[J]. The Veterinary Journal, 2003, 165 [7 Barron D JimenezLoza E, Cam J, et al. Determination of residues of enrofloxacin and its metabolite ciprofloxacin in br B3 Kung K, Pond J L, Wanner M Pharmacokinetics of Err logical materials by capillary electrophoresis[J]-Joumal d rofloxacin and Its Metabolite Ciprofloxacin after intravenous Chromatograp/y B,2001,759:73-79 and oral administration of Enrofloxacin in dogs [J].Jver8]祝万菊邓旭明,张艳萍等 沙星缓释溶液在猪 Phanmnco Therap, 1993, 16: 462-468 体内的药物动力学及生物利用度[].吉林农业大学学 [4 Brome RL, Brooks D L Pharmacokinetics properities of Er 报200325(3):335-338 rofloxacin in rabbits[J]. Am J Vet, 1992, 52(10): 1935 [9]庄无忌.各国食品和饲料中农药、兽药残留限量大全 [M]北京中国对外贸易出版社,1995 Residues of Enrofloxacin and Its Meta bolite in Jifu Tilapia and Penaeus chinensis XU Werhai'3LIN Liming, ZHU Xiaorbin', WANG Xirrting', HUANG Xirping',KANG Xing-lun (1. Center of Biotechology, Institute of Oceaplogy, Chinese Academy of Science, Qingdao 266071 2 Food Laboratory of Qingdao Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau of P. R. China, Qingdao 266002, China; 3. Graduate School Academy of Science Beijing 100039. China Abstract: The residues of enrofloxacin and its metabolite in Jifu Tilapia and Penaeus chinensis were determined after a single oral administration at a dose of 50 mg/ kg for 7 days. The results showed that enrofloxacin was changed into ciprofloxacin in Tilapia and Penaeus chinensis. The concentration of enrofloxacin in muscle, liver and blood of tilapia were(3. 61 t1. 02)Hg/ g, (5.96 +2. 12)Hg/g, (1. 25 +0. 23)ug/mL, respectively. And the elimination half-life were 15.61 h, 16.83 h, 17 19 h, respectively. The maximal concentration of ciprofloxacin in muscle was(0. 22 t0. 06) Hg/g, and the elimination half-life was 67 3 h. The maximal concentration of enrofloxacin and ciprofloxacin in Penaeus chinensis were(1. 68+0. 41)ug/g, (0.066 +0. 03)ug/g, respectively, And the elimination half-life were 27.9 h, 33.6 h, respectively. The predicted withdrawal time was 22 d in Tilapia, and 12 d in Penaeus chinensis Key words Jifu Tilapia, Penaeus chinensis; enrofloxacin; ciprofloxacin; metabolite 责任编辑:小舟) 2 01994-2007 China Academic Journal Electronie Publishing House. All rights reserved hp: /we cnki.net
保水产品中无药物残留。在本实验条件下 , 建议罗 非鱼的停药期为 22 d , 中国对虾为 12 d。 参考文献 : [1 ] 李家乐 ,李思发 1 中国大陆尼罗罗非鱼引进及研究进 展[J ]1 水产学报 ,2001 ,25(1) :90 - 951 [2 ] Nitesh K, Singh S D , Jayachandran C1Pharmacokinetics of Enrofloxacin and Its Active Metabolite Ciprofloxacin and Its Interaction With Diclofenac After Intravenous Administration in Buffalo Calves [J ]1 The Veterinary Journal , 2003 ,165 : 302 - 3061 [3 ] Kung K, Piond J L , Wanner M1 Pharmacokinetics of En2 rofloxacin and Its Metabolite Ciprofloxacin after intraverous and oral administration of Enrofloxacin in dogs [J ]1J Vet Pharmcol Therap , 1993 ,16 :462 - 4681 [4 ] Brome R L ,Brooks D L1Pharmacokinetics properities of En2 rofloxacin in rabbits [J ]1Am J Vet , 1992 ,52 (10) : 1935 - 19401 [5 ] 胡功政 ,冯淇辉 1 恩诺沙星及其活性代谢物在鸡体内 的药物动力学[J ]1 中国兽医学报 , 1999 ,19 (2) :171 - 1741 [6 ] Cinquina A L ,Roberti P , Giannetti F , et al1Determination of enrofloxacin and its metabolite ciprofloxacin in goat milk by high2performance liquid chromatography with diode2array de2 tection Optimization and validation[J ]1Journal of Chromatog2 raphy A ,2003 ,987 :221 - 2261 [7 ] Barron D ,Jimenez2Lozano E ,Cano J , et al1 Determination of residues of enrofloxacin and its metabolite ciprofloxacin in bi2 ological materials by capillary electrophoresis[J ]1Journal of Chromatography B ,2001 ,759 :73 - 791 [8 ] 祝万菊 ,邓旭明 ,张艳萍 ,等 1 恩诺沙星缓释溶液在猪 体内的药物动力学及生物利用度[J ]1 吉林农业大学学 报 ,2003 ,25(3) :335 - 3381 [9 ] 庄无忌 1 各国食品和饲料中农药、兽药残留限量大全 [M]1 北京 :中国对外贸易出版社 ,19951 Residues of Enrofloxacin and Its Metabolite in Jifu Tilapia and Penaeus chinensis XU Wei2hai1 ,3 ,LIN Li2ming2 , ZHU Xiao2bin1 , WANG Xin2ting1 ,HUANG Xin2ping1 , KANG Xing2lun1 (11Center of Biotechnology , Institute of Oceanology ,Chinese Academy of Science ,Qingdao 266071 ,China ;21Food Laboratory of Qingdao Entry2Exit Inspection and Quaranrine Bureau of P1R1China , Qingdao 266002 ,China ;31Graduate School , Chinese Academy of Science ,Beijing 100039 ,China) Abstract : The residues of enrofloxacin and its metabolite in Jifu Tilapia and Penaeus chinensis were determined after a single oral administration at a dose of 50 mg/ kg for 7 days1 The results showed that enrofloxacin was changed into ciprofloxacin in Tilapia and Penaeus chinensis1 The concentration of enrofloxacin in muscle , liver and blood of Tilapia were (3161 ±1102) μg/ g , (5196 ±2112) μg/ g , (1125 ±0123) μg/ mL , respectively1 And the elimination half2life were 15161 h ,16183 h ,17119 h , respectively1 The maximal concentration of ciprofloxacin in muscle was (0122 ±0106) μg/ g ,and the elimination half2life was 6713 h1 The maximal concentration of enrofloxacin and ciprofloxacin in Penaeus chinensis were (1168 ±0141) μg/ g ,(01066 ±0103)μg/ g , respectively ,And the elimination half2life were 2719 h ,3316 h , respectively1 The predicted withdrawal time was 22 d in Tilapia , and 12 d in Penaeus chinensis1 Key words :Jifu Tilapia ; Penaeus chinensis ; enrofloxacin ; ciprofloxacin ; metabolite (责任编辑 :小 舟) 8 水 产 科 学 第 23 卷 © 1994-2007 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http://www.cnki.net