1Types of host cell usedfor111gentic engineering111TypeExamplesMajor groupE. coliBacteriaProkaryoticGram+Gram一B.Subtilis（枯草杆菌）FungiMicrobialS. cerevisiaeEukaryoticFilamentousA.Nidulans（构巢曲霉2PlantsEukaryoticVarious typesProtoplastsIntact cellsVarious typesVarious typesWhole organismAnimalsInsect cellsVarious typesEukaryoticMammalian cellsVarious typesOocytesVarious typesWhole organismVarious types
Types of host cell used for gentic engineering Major group Type Examples Bacteria Prokaryotic Gram+ Gram－ E.coli B.Subtilis (枯草杆 菌 ) Fungi Eukaryotic Microbial Filamentous S.cerevisiae A.Nidulans(构巢曲霉 ) Plants Eukaryotic Protoplasts Intact cells Whole organism Various types Various types Various types Animals Eukaryotic Insect cells Mammalian cells Oocytes Whole organism Various types Various types Various types Various types
二 重组体DNA分子的转化或转染V①转化（transformation）：适合质粒（plasmid)作载体；E②转染（transfection)：适合噬菌体作载体：③转导（transduction）：适合噬菌体作载体：④脂质体-介导(liposome-mediated)基因转移；1③微注射(microinjection)：适合真核细胞;③电穿孔（electroporation)法：适合真核细胞
二 重组体DNA分子的转化或转染 ①转化(transformation):适合质粒(plasmid) 作载体; ②转染(transfection):适合噬菌体作载体; ③转导(transduction):适合噬菌体作载体; ④脂质体-介导(liposome-mediated)基因转 移; ⑤微注射(microinjection):适合真核细胞; ⑥电穿孔(electroporation)法:适合真核细胞 ; ⑦基因枪(biolistics,gene gun):适合植物细 胞;
票DNA-coatedProjectiletungstengunInjectionTransformation1Virus麺Transgene福
吉1111S细胞穿透肽（cellHIVTAT1permeatespenetrating peptides,membraneCPPs）：1型人免疫缺陷病毒转录激活因子TAT（HIVHIVTATentersthroughan-1TAT）是第一个被发现的1inducedpore11细胞穿透肽。888111HIVTAT interacts with cytoskeletonS包括小分子化合物、染料、11（PNA)多肽、多肽核酸A：倒置胶粒模型（invertedmicelle蛋白质、质粒DNA、siRNA、mode1），CPPs通过细胞膜上磷脂分子的移动形成倒置胶粒结构，而进入胞浆。200nm的脂质体、噬菌体颗B：直接穿透，即孔隙结构模型（pore粒和超顺磁性粒子等。formationmodel)，CPPs在细胞膜上组成跨1膜的孔隙结构而进入胞浆。11111C：内吞方式进行细胞摄取。111111
§ 细胞穿透肽（cell penetrating peptides， CPPs）：1型人免疫缺陷病 毒转录激活因子TAT（HIV -1 TAT）是第一个被发现的 细胞穿透肽 。 § 包括小分子化合物、染料、 多肽、多肽核酸（PNA）、 蛋白质、质粒DNA、siRNA、 200nm的脂质体、噬菌体颗 粒和超顺磁性粒子等。 A: 倒置胶粒模型（inverted micelle model），CPPs通过细胞膜上磷脂分子的移 动形成倒置胶粒结构，而进入胞浆。 B: 直接穿透，即孔隙结构模型 (pore formation model)，CPPs在细胞膜上组成跨 膜的孔隙结构而进入胞浆 。 C: 内吞方式进行细胞摄取
肽核酸PNA)(peptide nucleic acids,S以中性了DNA中的戊B糖磷酸NA可以通过CO2HA或RNA序列Watson-形成稳NHBOCPNADNAPNAPNA:DNAtcypTriplexQuadruplexDuplex3'-endH,N-R戊糖磷酸二酯键肽链酰胺2-氨基N乙基甘氨酸键0HNCRepeatunitO=P-HNBThymineCytosineO=P-UAdenineORHNRGuanine生物通ONAPNAOCONHProteinPNADNA5'-endC-terminus
肽核酸（peptide nucleic acids，PNA） § 以中性的肽链酰胺2-氨基乙基甘氨酸键取代了DNA中的戊 糖磷酸二酯键骨架，其余的与DNA相同，PNA可以通过 Watson-Crick碱基配对的形式识别并结合DNA或RNA序列， 形成稳定的双螺旋结构