DNA超螺旋结构
DNA超螺旋结构
常用的质粒载体 • 是通过DNA重组技术构建而成的。pUC18, pUC19(500~700 pUC19 2686 bp APr P(BLA) ALPHA P(LAC) ORI AvaI (413) BamHI (418) EcoRI (397) HindIII (448) PstI (440) SmaI (415) XmaI (413) ApaLI (178) ApaLI (1121) ApaLI (2367)
常用的质粒载体 • 是通过DNA重组技术构建而成的。pUC18, pUC19(500~700 pUC19 2686 bp APr P(BLA) ALPHA P(LAC) ORI AvaI (413) BamHI (418) EcoRI (397) HindIII (448) PstI (440) SmaI (415) XmaI (413) ApaLI (178) ApaLI (1121) ApaLI (2367)
细菌质粒: 细菌质粒是用的最多的质粒类 群，其大小从1Kb-200Kb，它们复 制时利用宿主细胞复制自身基因组 DNA的同一组酶系
细菌质粒: 细菌质粒是用的最多的质粒类 群，其大小从1Kb-200Kb，它们复 制时利用宿主细胞复制自身基因组 DNA的同一组酶系
• 严谨型：这些质粒的复制是在寄主细胞严格控 制之下的，与寄主细胞的复制偶联同步。所以， 往往在一个细胞中只有一份或几份拷贝； • 松驰型：这些质粒的复制是在寄主细胞的松弛 控制之下的，每个细胞中含有10-200份拷贝， 如果用一定的药物处理抑制寄主蛋白质的合成 才会使质粒拷贝数增至几千份。如较早的质粒 pBR322即属于松弛型质粒，要经过氯霉素处理 才能达到更高拷贝数。 质粒类型：
• 严谨型：这些质粒的复制是在寄主细胞严格控 制之下的，与寄主细胞的复制偶联同步。所以， 往往在一个细胞中只有一份或几份拷贝； • 松驰型：这些质粒的复制是在寄主细胞的松弛 控制之下的，每个细胞中含有10-200份拷贝， 如果用一定的药物处理抑制寄主蛋白质的合成 才会使质粒拷贝数增至几千份。如较早的质粒 pBR322即属于松弛型质粒，要经过氯霉素处理 才能达到更高拷贝数。 质粒类型：
载体(Vector)： 用于携带重组DNA，并且能够使外源DNA一起复制 与表达的质粒(运载工具)。 具备的条件： • 易于鉴定； • 在受体细胞中可以独立复制； • 易于筛选； • 易于导入受体细胞
载体(Vector)： 用于携带重组DNA，并且能够使外源DNA一起复制 与表达的质粒(运载工具)。 具备的条件： • 易于鉴定； • 在受体细胞中可以独立复制； • 易于筛选； • 易于导入受体细胞