精选习题一、判断题：判断以下各题,正确的标T，错误的标F。在使用光学显微镜时，如果物镜不变，用10X的目镜时的分辨率比用5X的高一倍。1.2CsCI密度梯度离心法分离纯化样品时样品要和CsCI混匀后分装离心时，样品中不同组分的重力不同，停留在不同区带。3.提高显微镜的分辨率，可通过缩短波长，或给标本染色。X.在光学显微镜下观察到的细胞结构，称为显微结构，在电子显微镜下观察到的结构称为亚显微结构或超微结构。5.相差显微镜可用来观察活细胞和未经染色的标本。二、选择题1.通过选择性或克隆形式从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志的细胞群体称作(【)。a Cell Linec. Cell Libraryb. Cell Straind. Others2.研究DNA在细胞中的代谢，常用的同位素标记物有（)。a.14C-戊糖C.15N-鸟嘌岭b.32P-磷酸d.3H-胸腺嘧啶3.细胞融合的诱导剂主要有(）。a.PEG(聚乙二醇)c.亚硝酸-诱变剂b.TMV(烟草花叶病)病毒d.PHV(植物凝集素)-外围培养4.细胞培养技术()。a.可用来研究细胞生理和细胞各种功能c.用小牛血清配制的培养基进行培养b.首先用胰蛋白酶将动物或植物组织进行酶解，d.培养过程可用普通光学显微镜进行观察游离出单细胞再进行培养5. 在杂交瘤技术中,()。c.氨基噪呤可抑制瘤细胞的蛋白质合成a.B淋巴细胞与B淋巴瘤细胞融合，目的是抑制瘤细胞无限生长d.氨基噪呤能导致B淋巴细胞无限分裂b.在培养基中加入氨基噪呤可选出杂交细胞6.光镜同电镜比较，下列各项中，()是不正确的。a.电镜用的是电子束，而不是可见光c.电镜和光镜的样品都需要用化学染料染色b.电镜样品要在真空中观察，而非暴露在空气中d.用于电镜的标本要彻底脱水，光镜则不必7在动物细胞培养过程中要用(）来进行观察。a.相差显微镜c.倒置显微镜b.荧光显微镜d.普通光学显微镜8.在递增细胞匀浆液的离心转速过程中最先沉淀下来的是（).a核糖体c.未破碎的细胞核b.线粒体d.微粒体9.单个植物细胞在体外经过诱导并培养成为完整的植物小植株的实验最好地证明了，（）。a.细胞是构成有机体的基本单位c.细胞是有机体生长发育的基础b.一切有机体均来自于细胞d.细胞具有遗传的全能性10.显微镜的分辨率与下列哪一项无关？
精选习题 一、判断题：判断以下各题,正确的标 T，错误的标 F。 1. 在使用光学显微镜时, 如果物镜不变, 用 10X 的目镜时的分辨率比用 5X 的高一倍。 2. CsCl 密度梯度离心法分离纯化样品时, 样品要和 CsCl 混匀后分装 , 离心时, 样品中不同组分的重力 不同, 停留在不同区带。 3. 提高显微镜的分辨率, 可通过缩短波长, 或给标本染色。 4. 在光学显微镜下观察到的细胞结构, 称为显微结构, 在电子显微镜下观察到的结构称为亚显微结构或 超微结构。 5. 相差显微镜可用来观察活细胞和未经染色的标本。 二、选择题 1. 通过选择性或克隆形式从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志的细胞群体称作( )。 a. Cell Line b. Cell Strain c. Cell Library d. Others 2. 研究 DNA 在细胞中的代谢, 常用的同位素标记物有( )。 a．14 C-戊糖 b．32 P-磷酸 c．15 N-鸟嘌呤 d. 3 H-胸腺嘧啶 3.细胞融合的诱导剂主要有( )。 a. PEG(聚乙二醇) b. TMV(烟草花叶病)病毒 c. 亚硝酸-诱变剂 d. PHV(植物凝集素)-外围培养 4. 细胞培养技术( )。 a. 可用来研究细胞生理和细胞各种功能 b. 首先用胰蛋白酶将动物或植物组织进行酶解, 游离出单细胞再进行培养 c. 用小牛血清配制的培养基进行培养 d. 培养过程可用普通光学显微镜进行观察 5. 在杂交瘤技术中,( )。 a. B 淋巴细胞与 B 淋巴瘤细胞融合, 目的是抑制 瘤细胞无限生长 b. 在培养基中加入氨基喋呤可选出杂交细胞 c. 氨基喋呤可抑制瘤细胞的蛋白质合成 d. 氨基喋呤能导致 B 淋巴细胞无限分裂 6. 光镜同电镜比较, 下列各项中, ( )是不正确的。 a. 电镜用的是电子束, 而不是可见光 b. 电镜样品要在真空中观察, 而非暴露在空气中 c. 电镜和光镜的样品都需要用化学染料染色 d. 用于电镜的标本要彻底脱水, 光镜则不必 7 在动物细胞培养过程中要用( ) 来进行观察。 a. 相差显微镜 b. 荧光显微镜 c. 倒置显微镜 d. 普通光学显微镜 8. 在递增细胞匀浆液的离心转速过程中最先沉淀下来的是( )。 a. 核糖体 b. 线粒体 c. 未破碎的细胞核 d. 微粒体 9. 单个植物细胞在体外经过诱导并培养成为完整的植物小植株的实验最好地证明了,( )。 a. 细胞是构成有机体的基本单位 b. 一切有机体均来自于细胞 c. 细胞是有机体生长发育的基础 d. 细胞具有遗传的全能性 10. 显微镜的分辨率与下列哪一项无关?
a.光源的波长入c.介质的折射率 nb.物镜的镜口角ad.放大2.分泌到细胞外的糖蛋白激素，其糖基是在细胞的三、比较题：哪一部分被加上去的？放大率和分辨率1.五、问答题2.透射电子显微镜和扫描电子显微镜3.差速离心和密度梯度离心1.动物体细胞克隆有什么意义？四、命名题请你为解决下列问题所采取的技术命名：1.在犯罪现场找到的头发中的DNA与犯罪审判中的被告的DNA吻合吗？
a. 光源的波长λ b. 物镜的镜口角α c. 介质的折射率 n d. 放大 三、比较题： 1. 放大率和分辨率 2. 透射电子显微镜和扫描电子显微镜 3. 差速离心和密度梯度离心 四、命名题 请你为解决下列问题所采取的技术命名： 1. 在犯罪现场找到的头发中的 DNA 与犯罪审判中 的被告的 DNA 吻合吗？ 2. 分泌到细胞外的糖蛋白激素，其糖基是在细胞的 哪一部分被加上去的？ 五、问答题 1. 动物体细胞克隆有什么意义?
习题解答一、判断题1.答：F，10X目镜比5X的目镜放大倍数高，但分辩率没有变：2答：F，CsCI密度梯度离心法分离纯化样品是根据浮力而不是重力3.答：F，染色只是增强反差，但不能提高分辩率：4.答：T，电子显微镜观察到的结构比光学显微镜观察的显微结构精细，故称为超微结构。5.答：T，相差显微镜通过相位差观察标本，故可不需染色。二、选择题1.a22.d3.a4.a5.b6.c7.c8.a9.d10.d三、比较题：1.放大率和分辨率答：这两个概念都用于衡量显微镜的显微功能。放大率指显微镜所成像的大小与标本实际大小的比率。而分辨率指可视为明显实体的两个点间的最小距离。放大率对分辨率有影响，但分辨率不仅仅取决于放大率。两者都是观察亚细胞结构的必要参数。2.透射电子显微镜和扫描电子显微镜答：都用于放大与分辨微小结构，这两种技术通过标本对电子束的影响来探测标本结构。TEMs的电子束穿过标本，聚焦成像于屏幕或显像屏上，SEMs的电子束在标本表面进行扫描，反射的电子聚焦成像于屏幕或显像屏。TEMs用于研究超薄切片标本，有极高分辨率，可给出细微的胞内结构。SEMs可以反映未切片标本的表面特征。3.差速离心和密度梯度离心答：两者都是依靠离心力对细胞匀浆悬浮物中的颗粒进行分离的技术。差速离心通常用于分离细胞器与较大的细胞碎片，分离的对象都比介质密度大。密度梯度离心也可用于分离较大的颗粒和细胞器，但更常用来分离小颗粒和大分子物质。密度梯度离心的介质形成一个密度梯度，所分离的颗粒密度小于介质底部的密度。因此颗粒从梯度的顶层沉降到与之密度相同的介质层停住，四、命名题请你为解决下列问题所采取的技术命名：1.在犯罪现场找到的头发中的DNA与犯罪审判中的被告的DNA吻合吗？答：采用PCR技术。2.分泌到细胞外的糖蛋白激素，其糖基是在细胞的哪一部分被加上去的？答：用放射性标记糖类示踪，然后放射自显影。五、问答题1.动物体细胞克隆有什么意义？答：动物体细胞克隆技术的成功对生命科学的发展具有重要的推动作用，不仅证明了动物的体细胞具有全能性，而且有巨大的应用前景。例如结合转基因技术生产药物。现在很多药物如胰岛素、生长激素、表皮生长因子等都是动物细胞体内正常的代谢物，某些病人由于产生这些物质的功能发生缺陷，导致了相应疾病的发生，目前的治疗方法就是给这些病人注射这类药物。由于这类药物本身是来自动物的某些脏器，制备这种药物就需要大量的动物提供脏器，因此成本就很高，如果通过转基因技术把相应的基因转入到哺
习题解答 一、判断题 1. 答：F，10X 目镜比 5X 的目镜放大倍数高, 但分辩率没有变； 2. 答：F，CsCl 密度梯度离心法分离纯化样品是根据浮力而不是重力； 3. 答：F，染色只是增强反差, 但不能提高分辩率； 4. 答：T，电子显微镜观察到的结构比光学显微镜观察的显微结构精细,故称为超微结构。 5. 答：T，相差显微镜通过相位差观察标本, 故可不需染色。 二、选择题 1. a 2. d 3. a 4. a 5. b 6. c 7. c 8. a 9. d 10. d 三、比较题： 1. 放大率和分辨率 答: 这两个概念都用于衡量显微镜的显微功能。 放大率指显微镜所成像的大小与标本实际大小的比率。而分辨率指可视为明显实体的两个点间的最小 距离。放大率对分辨率有影响，但分辨率不仅仅取决于放大率。两者都是观察亚细胞结构的必要参数。 2． 透射电子显微镜和扫描电子显微镜 答: 都用于放大与分辨微小结构，这两种技术通过标本对电子束的影响来探测标本结构。TEMs 的电子 束穿过标本，聚焦成像于屏幕或显像屏上，SEMs 的电子束在标本表面进行扫描，反射的电子聚焦成像于 屏幕或显像屏。TEMs 用于研究超薄切片标本，有极高分辨率，可给出细微的胞内结构。SEMs 可以反映未 切片标本的表面特征。 3． 差速离心和密度梯度离心 答: 两者都是依靠离心力对细胞匀浆悬浮物中的颗粒进行分离的技术。差速离心通常用于分离细胞器 与较大的细胞碎片，分离的对象都比介质密度大。密度梯度离心也可用于分离较大的颗粒和细胞器，但更 常用来分离小颗粒和大分子物质。密度梯度离心的介质形成一个密度梯度，所分离的颗粒密度小于介质底 部的密度。因此颗粒从梯度的顶层沉降到与之密度相同的介质层停住， 四、命名题 请你为解决下列问题所采取的技术命名： 1. 在犯罪现场找到的头发中的 DNA 与犯罪审判中的被告的 DNA 吻合吗？ 答：采用 PCR 技术。 2. 分泌到细胞外的糖蛋白激素，其糖基是在细胞的哪一部分被加上去的？ 答: 用放射性标记糖类示踪，然后放射自显影。 五、问答题 1. 动物体细胞克隆有什么意义? 答: 动物体细胞克隆技术的成功对生命科学的发展具有重要的推动作用，不仅证明了动物的体细胞具 有全能性, 而且有巨大的应用前景。例如结合转基因技术生产药物。现在很多药物如胰岛素、生长激素、 表皮生长因子等都是动物细胞体内正常的代谢物，某些病人由于产生这些物质的功能发生缺陷，导致了相 应疾病的发生，目前的治疗方法就是给这些病人注射这类药物。由于这类药物本身是来自动物的某些脏器， 制备这种药物就需要大量的动物提供脏器，因此成本就很高，如果通过转基因技术把相应的基因转入到哺
乳动物，让动物的乳汁生产具有疗效的蛋白质就会降低成本，再结合动物体细胞克隆技术，将这种转基因动物大量无性繁殖克隆，就可以大大提高产量，大幅度降低成本，同时也保证了所转基因的稳定。该项技术也可以生产供动物本身和人类器官移植的动物，解决器官捐赠长期缺乏的问题。另外，动物体细胞克隆技术在基因结构和功能、基因治疗、遗传病及人类衰老等的研究方面都具有巨大的潜力
乳动物，让动物的乳汁生产具有疗效的蛋白质就会降低成本，再结合动物体细胞克隆技术，将这种转基因 动物大量无性繁殖克隆，就可以大大提高产量，大幅度降低成本，同时也保证了所转基因的稳定。该项技 术也可以生产供动物本身和人类器官移植的动物, 解决器官捐赠长期缺乏的问题。另外，动物体细胞克隆 技术在基因结构和功能、基因治疗、遗传病及人类衰老等的研究方面都具有巨大的潜力
问题思考1.图2-3的解释答：两个儿童共同振动一根绳子产生的波动类似于光子光子和电子形成的波，以此说明物体的大小对波的干扰。(a)两个儿童振动绳子产生的特征波长;(b)向绳子波中扔进一个球或一个物体，如果扔进物体的直径与绳子波长相近，就会干扰绳子波的移动（3）如果扔进一个垒球或其他物体比绳子波长小得多，对绳子波的移动只有很小或没有干扰(d)如果将绳子快速振动，波长就会大大缩短；（e)此时扔进垒球就会干扰绳子波的移动。2.为什么电子显微镜需要真空系统(vacuumsystem)？答：由于电子在空气中行进的速度很慢，所以必须由真空系统保持电镜的真空度，否则，空气中的分子会阻挠电子束的发射而不能成像。用两种类型的真空泵申连起来获得电子显微镜镜筒中的真空，当电子显微镜启动时，第一级旋转式真空泵(rotary pump)获得低真空，作为二级泵的预真空：第二级采用油扩散泵(oildiffusionpump)获得高真空。3.什么是相位和相差？答：所谓相位是光波在前进时，电振动呈现的交替的波形变化。由于光是电磁波，其电振动与磁振动垂直，又与波的传播方向垂直，导致了传播时波形的变化。同一种光波通过折射率不同的物质时，光的相位就会发生变化，波长和振幅也会发生变化。所谓相差是指两束光波在某一位置时，由于波峰和波谷不一致，即存在着相位上的差异，叫相差。同一种光通过细胞时，由于细胞不同部分的折射率不同，通过细胞的光线比未通过细胞的光线相位落后，而通过细胞核的光线比通过细胞其他部位的相位落后，这就是相位差。4.与光镜相比，用于电子显微镜的组织固定有什么特殊的要求？答：比光镜的要求更高。首先是样品要薄，这是因为电子的穿透能力十分有限，即使是100～200kV高压，电子穿透厚度仅为1μm。通常把样品制成50～100nm厚的薄片（一个细胞切成100~200片），称超薄切片(ultrathinsection)。其次是要求很好地保持样品的精细结构，特别是在组织固定时要求既要终止细胞生命，又不破坏细胞的结构。第三是要求样品要具有一定的反差。电子显微镜的样品切片最后被放置在载网上而不是玻片上。5.什么是细胞分选？基本原理是什么？答：用流式细胞计将特定的细胞分选分选出来的技术，分选前，细胞要被戴上特殊的标记。所用的标记细胞的探针是能够同待分选细胞表面特征性蛋白（抗原）结合的抗体，而这种抗体文能够同某种荧光染料结合。当结合有荧光染料的探针与细胞群温育时，探针就会同具有特异表面抗原的细胞紧紧结合，由于抗体的结合，被结合的细胞带上了荧光标记。细胞被标记之后，除去游离的抗体，并将细胞进行稀释。当稀释的细胞进入超声波振荡器时，极稀的细胞悬浮液形成很小的液滴，一个液滴中只含有一个细胞。液滴一日形成并通过激光束时，激光束激发结合在细胞表面抗体分子成为一种标签。当液滴逐个通过激光束时，受到两种检测器的检测：如果液滴中含有细胞就会激活干涉检测器(interferencedetector)，只有带有荧光标记细胞的液滴才会激活荧光检测器(fluorescencedetector)。当带有荧光标记的液滴通过激光束时，将两种检测器同时激活，引起液滴充电信号使鞘液带上负电荷。由于液滴带有负电荷，移动时就会向正极移动，进入到荧光标记细胞收集器中。如果是含有非荧光标记细胞的液滴进入激光束，只会被干涉检测器检测到，结果使充电信号将液滴的鞘液带上正电荷，从而在移动时偏向负极，被非荧光标记细胞收集器所收集。如果是不含有细胞的液滴进入激光束，则不会被任何检测器所检测，因而不会产生充电信号，液滴的鞘液不会带上任何电荷，所以在移动时不受任何影响直接进入非检测的收集器
问题思考 1. 图 2-3 的解释 答：两个儿童共同振动一根绳子产生的波动类似于光子光子和电子形成的波，以此说明物体的大小对波的 干扰。(a)两个儿童振动绳子产生的特征波长;(b)向绳子波中扔进一个球或一个物体，如果扔进物体的直径与 绳子波长相近，就会干扰绳子波的移动;(3)如果扔进一个垒球或其他物体比绳子波长小得多，对绳子波的移 动只有很小或没有干扰;(d)如果将绳子快速振动，波长就会大大缩短;(e)此时扔进垒球就会干扰绳子波的移 动。 2. 为什么电子显微镜需要真空系统(vacuum system)? 答：由于电子在空气中行进的速度很慢，所以必须由真空系统保持电镜的真空度，否则，空气中的分子会 阻挠电子束的发射而不能成像。用两种类型的真空泵串连起来获得电子显微镜镜筒中的真空，当电子显微 镜启动时，第一级旋转式真空泵(rotary pump)获得低真空，作为二级泵的预真空；第二级采用油扩散泵(oil diffusion pump)获得高真空。 3. 什么是相位和相差? 答：所谓相位是光波在前进时，电振动呈现的交替的波形变化。由于光是电磁波，其电振动与磁振动垂直， 又与波的传播方向垂直，导致了传播时波形的变化。同一种光波通过折射率不同的物质时，光的相位就会 发生变化，波长和振幅也会发生变化。所谓相差是指两束光波在某一位置时，由于波峰和波谷不一致，即 存在着相位上的差异，叫相差。同一种光通过细胞时，由于细胞不同部分的折射率不同，通过细胞的光线 比未通过细胞的光线相位落后，而通过细胞核的光线比通过细胞其他部位的相位落后， 这就是相位差。 4. 与光镜相比， 用于电子显微镜的组织固定有什么特殊的要求? 答：比光镜的要求更高。首先是样品要薄，这是因为电子的穿透能力十分有限，即使是 100～200kV 高压， 电子穿透厚度仅为 1μm。通常把样品制成 50～100nm 厚的薄片(一个细胞切成 100～200 片)，称超薄切片 (ultrathin section)。其次是要求很好地保持样品的精细结构，特别是在组织固定时要求既要终止细胞生命， 又不破坏细胞的结构。第三是要求样品要具有一定的反差。电子显微镜的样品切片最后被放置在载网上而 不是玻片上。 5. 什么是细胞分选？基本原理是什么？ 答：用流式细胞计将特定的细胞分选分选出来的技术， 分选前， 细胞要被戴上特殊的标记。所用的标记 细胞的探针是能够同待分选细胞表面特征性蛋白(抗原)结合的抗体，而这种抗体又能够同某种荧光染料结 合。当结合有荧光染料的探针与细胞群温育时，探针就会同具有特异表面抗原的细胞紧紧结合，由于抗体 的结合，被结合的细胞带上了荧光标记。细胞被标记之后，除去游离的抗体，并将细胞进行稀释。当稀释 的细胞进入超声波振荡器时，极稀的细胞悬浮液形成很小的液滴，一个液滴中只含有一个细胞。液滴一旦 形成并通过激光束时，激光束激发结合在细胞表面抗体分子成为一种标签。当液滴逐个通过激光束时，受 到两种检测器的检测:如果液滴中含有细胞就会激活干涉检测器(interference detector)，只有带有荧光标记细 胞的液滴才会激活荧光检测器(fluorescence detector)。当带有荧光标记的液滴通过激光束时，将两种检测器 同时激活，引起液滴充电信号使鞘液带上负电荷。由于液滴带有负电荷，移动时就会向正极移动，进入到 荧光标记细胞收集器中。如果是含有非荧光标记细胞的液滴进入激光束，只会被干涉检测器检测到，结果 使充电信号将液滴的鞘液带上正电荷，从而在移动时偏向负极，被非荧光标记细胞收集器所收集。如果是 不含有细胞的液滴进入激光束，则不会被任何检测器所检测，因而不会产生充电信号，液滴的鞘液不会带 上任何电荷，所以在移动时不受任何影响直接进入非检测的收集器