第九章实验室检验概述 实验室检验一一是采取畜禽的血液、尿液、粪便或其他体液（如胃液、脑脊液、 胸腹腔穿刺液等)及病理产物（如肝、脾、淋巴结、骨、肌肉等），在实验室特定的 设备与条件下，测定其物理性状、分析其化学成分，或借助于显微镜而观察其有形成 分的方法。实验室检验对许多疾病的确定诊断、判断预后和观察疗效等都具有重要意 义。可以说，没有实验室检验的诊断结果，往往是不够完善的。因此，实验室检验已 成为兽医临床上不可忽视的工作。实验室检验应注意的几个问题： 送往实验室的材料，应该随时附上病史、临床病案报告、任何尸体剖检的结果以 及请求需要检查的种类和范围。材料收集以后应迅速发送。同时必须根据国家要求， 仔细做好材料的包装和标签工作。 要复习有关基础课程（如化学、生理、病理和生化等）； 要了解各项化验的原理、方法、注意事项和化验标本的采集方法等。 建立诊断时，要结合病史和临床资料综合分析化验结果。 正确解释检验结果的临床意义，不应盲目地套用人医的结论，而应根据兽医的特 点加以解释。 选择检验项目要有针对性： 严格遵守操作规程，防止发生实验事故。 第一节血液标本的采取和抗凝剂 一、血液标本的采取 根据检查目的或需血量的不同，血液标本可取自末梢血或静脉血。 1、末梢采血适用于需血量少而且采血后立即进行稀释的项目。如制作血 片、血红蛋白测定、各种血细胞计数、出血和凝血时间测定等，大动物可在耳尖部剪 毛、并用酒精棉球消毒，待酒精干燥后，以16或18号针头刺入1厘米左右，血液即可流 出。擦去第一滴血（因其混有组织液），取第二滴血检查。中小动物可穿刺耳边缘的 小静脉
第九章 实验室检验概述 实验室检验——是采取畜禽的血液、尿液、粪便或其他体液（如胃液、脑脊液、 胸腹腔穿刺液等）及病理产物（如肝、脾、淋巴结、骨、肌肉等），在实验室特定的 设备与条件下，测定其物理性状、分析其化学成分，或借助于显微镜而观察其有形成 分的方法。实验室检验对许多疾病的确定诊断、判断预后和观察疗效等都具有重要意 义。可以说，没有实验室检验的诊断结果，往往是不够完善的。因此，实验室检验已 成为兽医临床上不可忽视的工作。实验室检验应注意的几个问题： 送往实验室的材料，应该随时附上病史、临床病案报告、任何尸体剖检的结果以 及请求需要检查的种类和范围。材料收集以后应迅速发送。同时必须根据国家要求， 仔细做好材料的包装和标签工作。 要复习有关基础课程（如化学、生理、病理和生化等）； 要了解各项化验的原理、方法、注意事项和化验标本的采集方法等。 建立诊断时，要结合病史和临床资料综合分析化验结果。 正确解释检验结果的临床意义，不应盲目地套用人医的结论，而应根据兽医的特 点加以解释。 选择检验项目要有针对性； 严格遵守操作规程，防止发生实验事故。 第一节 血液标本的采取和抗凝剂 一、血液标本的采取 根据检查目的或需血量的不同，血液标本可取自末梢血或静脉血。 1、末梢采血 适用于需血量少而且采血后立即进行稀释的项目。如制作血 片、血红蛋白测定、各种血细胞计数、出血和凝血时间测定等，大动物可在耳尖部剪 毛、并用酒精棉球消毒，待酒精干燥后，以16或18号针头刺入1厘米左右，血液即可流 出。擦去第一滴血（因其混有组织液），取第二滴血检查。中小动物可穿刺耳边缘的 小静脉
2、静脉采血 凡需血量较多，或需要血浆，或在现场不便检查的项目，均应 静脉采血。 (1)马、牛、羊的采血，可利用颈静脉，犬可利用臂或小隐静脉（后肢），奶牛 还可利用乳静脉或尾中静脉。乳静脉采血时，要用细些的针头，以防止发生血肿。尾 中静脉采血时，较容易保定，只需将尾部尽量高抬，枕头在第2、3尾椎间，由下向上 垂直刺入约1厘米，然后缓慢向下拔出，直至血液流出。 猪的采血，大猪可利用耳静脉，中小猪可用前腔静脉采血，方法如下： 保定：将猪仰卧或右侧卧，把两前指向后上方拉直，同时将头向下压，使头颈伸 展。这样可使前腔静脉紧张并可使胸前窝充分暴露出来（也可取站立保定，见“基 础”195页)。 部位：在左侧（右侧亦可）胸前窝，即由胸骨柄、胸头肌和胸骨舌骨肌的起始部 构成的陷窝内。 方法：在玻璃注射器内事先吸入适量的抗凝剂（制备血清则否），右手持针管， 使针头与地面垂直，或斜向后上方与地面呈60度角，刺入2一3cm即可抽出血液。术前 术后均按常规消毒。 (3)鸡的采血可利用翼下静脉或心脏穿刺采血。翼下静脉采血时，可用小 针头刺入静脉，任其自由流入装有抗凝剂（制血清不加抗凝剂）的小瓶内，不可用注 射器抽取，因其容易引起静脉塌陷和出现气泡。心脏穿刺采血时，将鸡右侧卧（或仰 卧)保定，左胸部向上（或胸前窝向上），用注射器接上16号针头，在胸骨脊前端与 背部下凹处连线的中点，垂直或稍向前（后）内方刺入2一3cm,可采得心血。鸡的静 脉采血时应注意： 针头要干燥、洁净，以防发生溶血。 在将血液注入容器时，要拔去针头，沿管壁缓缓注入。 注射器用完后立即清洗，以防血液凝固在注射器内。 (4)鹅、鸭的采血可利用枕静脉窦穿刺采血。其部位在枕骨后缘和第一颈椎 骨前缘正中位置（绘枕静脉窦位置图）。操作时，令助手保定鹅、鸭体呈腹卧或侧卧
2、静脉采血 凡需血量较多，或需要血浆，或在现场不便检查的项目，均应 静脉采血。 （1）马、牛、羊的采血，可利用颈静脉，犬可利用臂或小隐静脉（后肢），奶牛 还可利用乳静脉或尾中静脉。乳静脉采血时，要用细些的针头，以防止发生血肿。尾 中静脉采血时，较容易保定，只需将尾部尽量高抬，枕头在第2、3尾椎间，由下向上 垂直刺入约1厘米，然后缓慢向下拔出，直至血液流出。 猪的采血，大猪可利用耳静脉，中小猪可用前腔静脉采血，方法如下： 保定：将猪仰卧或右侧卧，把两前指向后上方拉直，同时将头向下压，使头颈伸 展。这样可使前腔静脉紧张并可使胸前窝充分暴露出来（也可取站立保定，见“基 础”195页）。 部位：在左侧（右侧亦可）胸前窝，即由胸骨柄、胸头肌和胸骨舌骨肌的起始部 构成的陷窝内。 方法：在玻璃注射器内事先吸入适量的抗凝剂（制备血清则否），右手持针管， 使针头与地面垂直，或斜向后上方与地面呈60度角，刺入2—3cm即可抽出血液。术前 术后均按常规消毒。 （3）鸡的采血 可利用翼下静脉或心脏穿刺采血。翼下静脉采血时，可用小 针头刺入静脉，任其自由流入装有抗凝剂（制血清不加抗凝剂）的小瓶内，不可用注 射器抽取，因其容易引起静脉塌陷和出现气泡。心脏穿刺采血时，将鸡右侧卧（或仰 卧）保定，左胸部向上（或胸前窝向上），用注射器接上16号针头，在胸骨脊前端与 背部下凹处连线的中点，垂直或稍向前（后）内方刺入2—3cm，可采得心血。鸡的静 脉采血时应注意： 针头要干燥、洁净，以防发生溶血。 在将血液注入容器时，要拔去针头，沿管壁缓缓注入。 注射器用完后立即清洗，以防血液凝固在注射器内。 （4）鹅、鸭的采血 可利用枕静脉窦穿刺采血。其部位在枕骨后缘和第一颈椎 骨前缘正中位置（绘枕静脉窦位置图）。操作时，令助手保定鹅、鸭体呈腹卧或侧卧
(左右均可)式，术者于助手左侧（或右侧），用左手握住鹅（鸭）的喙部（不能堵 塞鼻孔)以固定头部，使鹅头背侧朝向外侧方：右手持针头(12一20号)刺入0.5一 1.5cm,即见血流出。用于制备血清的成鹅，一次采血150ml左右，每周一次：成鸭 次可采60ml左右，每周一次。 (5)血清的制备方法 ①由静脉采血，不加抗凝剂，任其自然凝固，析出血清。 ②牛羊的血样应立即离心沉淀。如无离心设备，则应将盛血容器斜放，使血液凝 固形成斜面，以析出足量的血清。 ③在冬天，血块收缩缓慢，应将血液置于装有25一37℃温水浴中，促使血清快速 析出。 二、抗凝剂 1、EDTA(乙二胺四乙酸二钠)其优点很多，主要是对血细胞的形态影响不 大，可防止血小板聚集，在室温下数小时，对血红蛋白、血小板、血片染色均无不良 影响。如在冰箱内保存，24小时内，对细胞压积容量和血红蛋白测定，以及红、白细 胞计数均无影响。EDTA的抗凝机理是夺取血液中的游离Ca2十，形成EDTACa螯合物。其 用量一般为1一2mg/ml血液，超过2mg时，可使细胞皱缩：也可配成10%的水溶液， 每2滴可使51血液不凝固。 2、草酸盐(Na、K、NH4等) 其抗凝作用是夺取血中游离的Ca2十，以形成 不溶解的草酸钙。草酸钾的溶解度大，抗凝作用强，可使红细胞皱缩：草酸铵则使红 细胞膨胀，两者按一定比例混合，可使红细胞大小不变，适用于细胞压积容量的测 定。其配方是：草酸钾0.8g,草酸铵1.2g,馏水100ml。取此液0.5ml,(在40一60℃ 的烘箱中烘干备用)可使5ml血液不凝固。 3、柠檬酸钠又名枸橼酸钠，其抗凝机理是与血中游离C2+松散地结合为 柠檬酸钙复合物。常用于血沉测定及输血时的抗凝剂，不适用于血液的化学检验。配 成3.8%的水溶液，此液0.5ml可使5ml血液不凝固
（左右均可）式，术者于助手左侧（或右侧），用左手握住鹅（鸭）的喙部（不能堵 塞鼻孔）以固定头部，使鹅头背侧朝向外侧方；右手持针头（12—20号）刺入0.5— 1.5 cm，即见血流出。用于制备血清的成鹅，一次采血150ml左右，每周一次；成鸭一 次可采60ml左右，每周一次。 （5）血清的制备方法 ①由静脉采血，不加抗凝剂，任其自然凝固，析出血清。 ②牛羊的血样应立即离心沉淀。如无离心设备，则应将盛血容器斜放，使血液凝 固形成斜面，以析出足量的血清。 ③在冬天，血块收缩缓慢，应将血液置于装有25—37℃温水浴中，促使血清快速 析出。 二、抗凝剂 1、EDTA（乙二胺四乙酸二钠） 其优点很多，主要是对血细胞的形态影响不 大，可防止血小板聚集，在室温下数小时，对血红蛋白、血小板、血片染色均无不良 影响。如在冰箱内保存，24小时内，对细胞压积容量和血红蛋白测定，以及红、白细 胞计数均无影响。EDTA的抗凝机理是夺取血液中的游离Ca2＋,形成EDTACa螯合物。其 用量一般为1—2 mg/ml血液，超过2mg时，可使细胞皱缩；也可配成10%的水溶液， 每2滴可使5ml血液不凝固。 2、草酸盐（Na、K、NH4等） 其抗凝作用是夺取血中游离的Ca2＋，以形成 不溶解的草酸钙。草酸钾的溶解度大，抗凝作用强，可使红细胞皱缩；草酸铵则使红 细胞膨胀，两者按一定比例混合，可使红细胞大小不变，适用于细胞压积容量的测 定。其配方是：草酸钾0.8g，草酸铵1.2g，馏水100ml。取此液0.5ml，（在40—60℃ 的烘箱中烘干备用）可使5ml血液不凝固。 3、柠檬酸钠 又名枸橼酸钠，其抗凝机理是与血中游离Ca2＋松散地结合为 柠檬酸钙复合物。常用于血沉测定及输血时的抗凝剂，不适用于血液的化学检验。配 成3.8%的水溶液，此液0.5ml可使5ml血液不凝固
4、肝素肝素可阻止凝血酶原转变成凝血酶而起抗凝血酶的作用，其优点是 抗凝作用强，不影响红细胞的大小，对血液化学分析干扰小，多用于科研工作。但缺 点是价格昂贵，且不宜作纤维蛋白原的测定和细胞形态学研究（血片染色后呈淡兰色 背景，使细胞轮廓浓染而不清晰)。常用1%肝素钠水溶液，此液0.1ml可使5ml血液不 凝固。 血液采集后最好尽快处理，除作凝固试验以外的其他检验，可允许放置若干小 时。必要时可暂时放冰箱保存。 三、血液标本变异因素的控制方法 静脉采血后，血液虽离开血管，但血细胞的代谢活动并未终止，血液接触空气 后，气体含量也发生改变，结果引起细胞内外一系列成分的变动。因此，必须对其变 异因素进行控制，以免影响检验结果的正确性。其控制方法如下： (一)空腹采血血液中化学成分可受饮食、药物及离体后物理化学因素的 影响。因此，首先应在病畜基础代谢状态采取标本。即早晨空腹或禁食6小时后采取血 液，其分析结果才具有较真实的代表性。在进食后采取的标本，往往出现血糖、甘油 三酯和麝香草酚浊度增加，血清无机磷降低。 (二)防止气体逸散血液暴露于空气中后，C02迅速逸出，并吸收02而提高 血O2饱和度，进而引起血液PH及其他血浆成分的某些改变，因此在测定血液PH及气体 时，要求以密闭手续采血。 (三)防止分解血样要尽快分析，以减少分解的影响，必要时可加保存剂 (如用氟化钠作测血糖血液的保存剂)以防止分解。有些检测项目（如丙酮酸、无机 盐等)可于半小时内做成血滤液，以防分解。 (四)防止污染采血器具及标本容器都必须化学清洁，尤其是测定蛋白结 合碘、血氨及血清中微量元素如C、Fe等，均须经化学处理并用重蒸馏水冲洗过的器 材，不能用普通注射器和标本容器，以防污染而影响结果
4、肝素 肝素可阻止凝血酶原转变成凝血酶而起抗凝血酶的作用，其优点是 抗凝作用强，不影响红细胞的大小，对血液化学分析干扰小，多用于科研工作。但缺 点是价格昂贵，且不宜作纤维蛋白原的测定和细胞形态学研究（血片染色后呈淡兰色 背景，使细胞轮廓浓染而不清晰）。常用1%肝素钠水溶液，此液0.1ml可使5ml血液不 凝固。 血液采集后最好尽快处理，除作凝固试验以外的其他检验，可允许放置若干小 时。必要时可暂时放冰箱保存。 三、血液标本变异因素的控制方法 静脉采血后，血液虽离开血管，但血细胞的代谢活动并未终止，血液接触空气 后，气体含量也发生改变，结果引起细胞内外一系列成分的变动。因此，必须对其变 异因素进行控制，以免影响检验结果的正确性。其控制方法如下： （一）空腹采血 血液中化学成分可受饮食、药物及离体后物理化学因素的 影响。因此，首先应在病畜基础代谢状态采取标本。即早晨空腹或禁食6小时后采取血 液，其分析结果才具有较真实的代表性。在进食后采取的标本，往往出现血糖、甘油 三酯和麝香草酚浊度增加，血清无机磷降低。 （二）防止气体逸散 血液暴露于空气中后，CO2迅速逸出，并吸收O2而提高 血O2饱和度，进而引起血液PH及其他血浆成分的某些改变，因此在测定血液PH及气体 时，要求以密闭手续采血。 （三）防止分解 血样要尽快分析，以减少分解的影响，必要时可加保存剂 （如用氟化钠作测血糖血液的保存剂）以防止分解。有些检测项目（如丙酮酸、无机 盐等）可于半小时内做成血滤液，以防分解。 （四）防止污染 采血器具及标本容器都必须化学清洁，尤其是测定蛋白结 合碘、血氨及血清中微量元素如Cu、Fe等，均须经化学处理并用重蒸馏水冲洗过的器 材，不能用普通注射器和标本容器，以防污染而影响结果
(五)防止溶血溶血可影响理化检验结果。例如，谷一草转氨酶(G0T)、 乳酸脱氢酶(LDH)、酸性磷酸酶(ACP)及钾等，红细胞中的含量超过血浆10多倍乃 至100多倍。溶血后，血清中这些成分就会显著增高。且溢出的可直接抑制脂肪酶等 活性，影响胆红素的重氮反应，或由于其颜色而干扰比色测定。 起溶血的原因 ①注射器或试管潮湿： ②抽血后未卸下针头而将血液强力注入试管中： ③用强力摇动血液或剥动血块： ④离心速度过高： ⑤冷藏温度过低： ⑥抗凝剂使用不当： ⑦采血时压迫静脉过久等。 2、防止溶血的方法 ①注射器、试管必须干燥洁净，采血后卸下针头再将血液沿管壁徐徐注入试管 内，若为抗凝血，应请轻轻倒转试管与抗凝剂混和，切忌用力振摇。 ②防止过多过早剥动血块，寒冷使红细胞脆性增大，应将血液放于37℃温水浴中 预温半小时后，再用竹签将血块从管壁剥离，并继续保温，促使血清析出。 ③如不能很快检验，血液应放于4℃保存。 (六)标本来源一致 采血部位一致； 动物的状态一致（如均于饥饿时采），即时间大致相同。 作比较研究时，被采血动物的种类、性别、年龄（日龄）等均须一致。1.贫 血。红血球数和血红蛋白含量减少：血红蛋白减少症：异形红血球症：红血球大小不 均症；嗜多色性红细胞。 2.哺乳动物白血病。(a)淋巴性白血病。主要发生于犬和牛。淋巴细胞数量大大 增加，数量大大增加。曾证实每立方毫米血液中的白血球数量在犬为624,000，而在
（五）防止溶血 溶血可影响理化检验结果。例如，谷—草转氨酶（GOT）、 乳酸脱氢酶（LDH）、酸性磷酸酶（ACP）及钾等，红细胞中的含量超过血浆10多倍乃 至100多倍。溶血后，血清中这些成分就会显著增高。且溢出的Hb可直接抑制脂肪酶等 活性，影响胆红素的重氮反应，或由于其颜色而干扰比色测定。 起溶血的原因 ①注射器或试管潮湿； ②抽血后未卸下针头而将血液强力注入试管中； ③用强力摇动血液或剥动血块； ④离心速度过高； ⑤冷藏温度过低； ⑥抗凝剂使用不当； ⑦采血时压迫静脉过久等。 2、防止溶血的方法 ①注射器、试管必须干燥洁净，采血后卸下针头再将血液沿管壁徐徐注入试管 内，若为抗凝血，应请轻轻倒转试管与抗凝剂混和，切忌用力振摇。 ②防止过多过早剥动血块，寒冷使红细胞脆性增大，应将血液放于37℃温水浴中 预温半小时后，再用竹签将血块从管壁剥离，并继续保温，促使血清析出。 ③如不能很快检验，血液应放于4℃保存。 （六）标本来源一致 采血部位一致； 动物的状态一致（如均于饥饿时采），即时间大致相同。 作比较研究时，被采血动物的种类、性别、年龄（日龄）等均须一致。1. 贫 血。红血球数和血红蛋白含量减少；血红蛋白减少症；异形红血球症；红血球大小不 均症；嗜多色性红细胞。 2．哺乳动物白血病。(a)淋巴性白血病。主要发生于犬和牛。淋巴细胞数量大大 增加，数量大大增加。曾证实每立方毫米血液中的白血球数量在犬为624，000，而在