2重组DNA技术与基因工程的基本原理 C基因工程的基本原理 提高外源基因的剂量分子遗传学原理 筛选修饰重组基因表达的转录调控元件,如:启动子 增强子、操作子、终止子、上游调控序列等 分子生物学原理 修饰构建蛋白质生物合成的翻译调控元件,如:SD序 列、mRNA非编码区、密码子等 分子生物学原理 基因工程菌(微型生物反应器)的增殖及稳定生产 生化工程学原理
C 基因工程的基本原理 2 重组DNA技术与基因工程的基本原理 提高外源基因的剂量——分子遗传学原理 筛选修饰重组基因表达的转录调控元件，如：启动子、 增强子、操作子、终止子、上游调控序列等 列、mRNA非编码区、密码子等 ——分子生物学原理 修饰构建蛋白质生物合成的翻译调控元件，如：SD序 基因工程菌（微型生物反应器）的增殖及稳定生产 ——生化工程学原理 ——分子生物学原理
2重组DNA技术与基因工程的基本原理 D基因工程的支撑技术 ●核酸凝胶电泳技术 ●核酸分子杂交技术 细菌转化转染技术 DNA序列分析技术 ●寡核苷酸合成技术 ●基因定点突变技术 ●聚合酶链反应(PCR)技术
D 基因工程的支撑技术 2 重组DNA技术与基因工程的基本原理 核酸凝胶电泳技术 核酸分子杂交技术 细菌转化转染技术 DNA序列分析技术 寡核苷酸合成技术 基因定点突变技术 聚合酶链反应（PCR）技术
2重组DNA技术与基因工程的基本原理 A重组DNA技术的理论基础 B基因的分子生物学 C基因工程的基本原理 D基因工程的支撑技术
D 基因工程的支撑技术 2 重组DNA技术与基因工程的基本原理 C 基因工程的基本原理 B 基因的分子生物学 A 重组DNA技术的理论基础
3重组DNA技术所需的基本条件 A用于核酸操作的工具酶 狠制性核酸内切酶 DNA连接酶 DNA聚合酶 ●核酸酶 核酸修饰酶
A 用于核酸操作的工具酶 3 重组DNA技术所需的基本条件 限制性核酸内切酶 DNA连接酶 DNA聚合酶 核酸酶 核酸修饰酶
限制性核酸内切酶 限制性核酸内切酶的发现及其生物功能 识别双链DNA分子中的特定序列,并切割DNA双链 主要存在于原核细菌中,帮助细菌限制外来DNA的入侵 细菌的限制与修饰作用 hsdR:编码限制性核酸內切酶 hsdM:编码限制性甲基化酶 hsdS:编码限制性酶和甲基化酶的协同表达 1968年, Smith等人首先从流感嗜血杆菌d株中分离出 Hind‖和HindⅢ
限制性核酸内切酶 限制性核酸内切酶的发现及其生物功能 识别双链DNA分子中的特定序列，并切割DNA双链 主要存在于原核细菌中，帮助细菌限制外来DNA的入侵 细菌的限制与修饰作用 hsd R：编码限制性核酸内切酶 hsd M：编码限制性甲基化酶 hsd S：编码限制性酶和甲基化酶的协同表达 1968年，Smith等人首先从流感嗜血杆菌d株中分离出 Hind II和Hind III