分析对象：测量含量很低的生物活性化合物：如蛋白质（酶，接受体，抗体）激素（留族化合物，甲状腺激素，酞激素）药物及微生物等。优点：专一性强，灵敏度高缺点：①放射性同位素可能损害人们的身体健康，以致于实验室要有特殊防护技术②该法还需要用贵重的闪烁计数器和试剂③稳定性-同位素的寿命相对较短
分析对象： 测量含量很低的生物活性化合物： 如蛋白质（酶，接受体，抗体） 激素（甾族化合物，甲状腺激素，酞激素） 药物及微生物等。 优点：专一性强，灵敏度高 缺点： ①放射性同位素可能损害人们的身体健康，以致 于实验室要有特殊防护技术 ②该法还需要用贵重的闪烁计数器和试剂 ③稳定性-同位素的寿命相对较短
3酶免疫分析法用酶标记抗原或抗体例：酶联免疫法测定氯霉素微量反应板一一羊抗兔IgG抗体兔抗氯霉素抗体+氯霉素酶结合物+氯霉素样品没有结合的酶结合物被洗去，再向相应孔中加入过氧化氢和邻苯二胺，作用一定时间后，结合后的酶结合物将无色的邻苯二胺转化为蓝色的产物，加入终止液后颜色由蓝变黄，用波长450nm（双波长时最适参考波长≥600nm）酶标仪进行检测，吸光值与样品中氯霉素含量成反比。酶不稳定、光度分析线性范围窄
3 酶免疫分析法 用酶标记抗原或抗体 例：酶联免疫法测定氯霉素 微量反应板——羊抗兔IgG抗体 兔抗氯霉素抗体+氯霉素酶结合物 +氯霉素样品 没有结合的酶结合物被洗去，再向相应孔中加入 过氧化氢和邻苯二胺，作用一定时间后，结合后的酶 结合物将无色的邻苯二胺转化为蓝色的产物，加入终 止液后颜色由蓝变黄，用波长450nm（双波长时最适 参考波长≥600nm）酶标仪进行检测，吸光值与样品 中氯霉素含量成反比。 酶不稳定、光度分析线性范围窄
包被羊抗免IgG抗体兔抗氯霉素抗体洗涤洗涤氯霉素X在包被羊抗免IgG抗体震加入酶偶联加入酶底物并在酶偶联氯霉素的薇量反粒板别人和待测氣素进行相应波长下测定墨抗氰塞素抗体形成#学塑解猴接吸光度固箱抗体载体酶底物5竞争型酶联免疫法测定氯霉素含量示意图
竞争型酶联免疫法测定氯霉素含量示意图
4.发光免疫分析法荧光免疫分析法化学发光免疫分析法以荧光物质或化学发光反应物质作为标记物优点：专一性强灵敏度高稳定性好，可避免放射性污染标记物不同，因而检测方法也不同
4.发光免疫分析法 荧光免疫分析法 化学发光免疫分析法 以荧光物质或化学发光反应物质作为标记物。 优点： 专一性强 灵敏度高 稳定性好，可避免放射性污染 标记物不同，因而检测方法也不同
荧光免疫分析法Fluonescense Immuuoassay荧光探针1.一般要求1检测最常遇到的样品为血清，它有很高的荧光a背景。血清蛋白入em325-350nm(^ex280nm)血清中NADH和胆红素430-470nm(ex330-360nm)探针入em>500nm
二．荧光免疫分析法 Fluonescense Immuuoassay 1．荧光探针 （1） 一般要求 a 检测最常遇到的样品为血清，它有很高的荧光 背景。 血清蛋白 λem 325-350 nm (λex 280 nm) 血清中NADH和胆红素 430-470 nm (λex 330-360 nm) 探针λem > 500 nm