中国科学技术大学：《分子光谱分析进展》课程教学课件（PPT讲稿）第三章 分子荧光分析新技术（下）3.3 同步荧光光谱法 3.4 时间分辨荧光法 3.5 相分辨荧光法 3.6 荧光动力学分析法

3-3同步荧光光谱法Fluorescence(Synchronous

3-3 同步荧光光谱法 ( Synchronous Fluorescence)

同步荧光分析原理同步荧光技术是同时扫描激发单色器和发射单色器波长的情况下来测绘荧光光谱图。由测得的荧光强度信号对发射或激发波长作图，称为同步荧光光谱

一、同步荧光分析原理 同步荧光技术是同时扫描激发单色器和发 射单色器波长的情况下来测绘荧光光谱图。由 测得的荧光强度信号对发射或激发波长作图， 称为同步荧光光谱

exnmNOFLUORECATTERLINE三维荧光 /nmem

NOR. EM. SCAN NOR. EX. SCAN NO FLUORE em ex /nm nm 三维荧光

1、固定波长的同步荧光光谱(Constantwavelengthsynchronousluminescence，CWSL)(1)在同步扫描中，使激发波长与发射波长保持固定的波长间距，即△=m一=常数。将同步荧光信号对发射或激发波长测绘荧光光谱图则为固定波长的同步荧光光谱

1、固定波长的同步荧光光谱 (Constant wavelength synchronous luminescence , CWSL) (1) 在同步扫描中，使激发波长与发射波长保持 固定的波长间距，即 常数。将 同步荧光信号对发射或激发波长测绘荧光光谱图， 则为固定波长的同步荧光光谱。  = em − ex =

(2)定量依据Is(aex,2em) = KCb.Ex(aex)Em(aem)(1)Ex激发光谱强度分布EM发射光谱强度分布M=1em -1。: Is = KCb·Ex(aem -△a)E(aem)(2)(3)Is = KCb·Ex(aex)EM(2ex +△a)同步扫描激发波长时的发射光谱同步扫描发射波长时的激发光谱

（2）定量依据 ( , ) ( ) ( ) S ex em KCb EX ex E M em I   =    EX EM 激发光谱强度分布 发射光谱强度分布  = em − ex ( ) ( ) ( ) ( )       =  +  =  −  S X ex M ex S X em M em I KCb E E I KCb E E （2）同步扫描激发波长时的发射光谱 （3）同步扫描发射波长时的激发光谱  （2） （3） （1）