克2、定性分析天每种物质都有一定的吸收光谱曲线,当未知物质与已知物质的吸收光谱曲线比较时,若两者相同,即可推断为同一种物质。3、物质纯度分析可用来测定物质相对纯度。例如:低DNA纯品的A260/A280=1.8,高于1.8,说明含RNA;于1.8,说明含蛋白质。RNA纯品的A260/A280=2.0,低于1.7,说明含蛋白质
2、定性分析 每种物质都有一定的吸收光谱曲线,当未知物质与 已知物质的吸收光谱曲线比较时,若两者相同,即 可推断为同一种物质。 3、物质纯度分析 可用来测定物质相对纯度。 例如: DNA纯品的A260/A280=1.8,高于1.8,说明含RNA;低 于1.8,说明含蛋白质。 RNA纯品的A260/A280=2.0,低于1.7,说明含蛋白质
二、层析(chromatography)(一)层析法原理是利用混合物中各组分物理化学性质(如吸附力、溶解度、分子形状、分子大小以及分子极性等)的差异,使各组分不同程度地分布于两相(流动相和固定相)中,从而使各组分以不同的速度随流动相向前移动而达到分离的目的。-花-固定相:相对固定不动的相流动相:流过固定相的液体或气体
二、层析(chromatography) (一)层析法原理 是利用混合物中各组分物理化学性质(如吸附力、溶解度、 分子形状、分子大小以及分子极性等)的差异,使各组分 不同程度地分布于两相(流动相和固定相)中,从而使 各组分以不同的速度随流动相向前移动而达到分离的目 的。 固定相:相对固定不动的相 流动相:流过固定相的液体或气体
(二)层析的主要类型:s1.分配层析S2.吸附层析(柱层析、氵薄层层析法)S3.离子交换层析4.凝胶层析(分子筛层析)S5.亲和层析景
(二)层析的主要类型: § 1.分配层析 § 2.吸附层析(柱层析、薄层层析法) § 3.离子交换层析 § 4.凝胶层析(分子筛层析) § 5.亲和层析
1.分配层析(partition克chromatography)S分配层析是利用混合物在两种或两种以上的不同溶剂中的分配系数不同而使物质分离的方法。载体:起负载固定相的作用。是一些吸附力小反应性弱的惰性物质,如淀粉,纤维素粉,滤纸等。」固定相:固定相可以用水、稀硫酸、甲醇、仲酰胺等强极性溶液--烧流动相:采用比固定相极性小或非极性的有机溶剂。IS
1.分配层析(partition chromatography) 分配层析是利用混合物在两种或两种以上的不同 溶剂中的分配系数不同而使物质分离的方法。 载体:起负载固定相的作用。是一些吸附力小、 反应性弱的惰性物质,如淀粉,纤维素粉,滤纸 等。 固定相:固定相可以用水、稀硫酸、甲醇、仲 酰胺等强极性溶液 流动相:采用比固定相极性小或非极性的有机溶 剂
纸层析(paperchromatography)最广泛应用的一种分配层析:载体:滤纸固定相:滤纸上吸附的水酚流动相:某些有机溶剂如醇、酉在固定相中分配系数较高的成分,随流动相移动的速口度较慢:反之,在流动相中分配系数较高的成分,随流动相移动速度较快。花馨例:转氨基实验
• 纸层析(paperchromatography): 最广泛应用的一种分配层析: 载体:滤纸 固定相:滤纸上吸附的水 流动相:某些有机溶剂如醇、酚 在固定相中分配系数较高的成分,随流动相移动的速 度较慢;反之,在流动相中分配系数较高的成分,随 流动相移动速度较快。 例:转氨基实验