一常量凯氏定氮法1.原理样品与浓硫酸和催化剂一同加热消化,使蛋白质分解,其中碳和氢被氧化为二氧化碳和水逸出,而样品中的有机氮转化为氨与硫酸结合成硫酸铵。然后加碱蒸馏,使氨蒸出。用HBO3吸收后再以标准HCI溶液滴定。根据标准酸消耗量可以计算出蛋白质的含量。也可以用过量的标准HSO4或标准HCI溶液吸收后再以标准NaOH滴定过量的酸
(一)常量凯氏定氮法 1. 原理 样品与浓硫酸和催化剂一同加热消化,使蛋白质分 解,其中碳和氢被氧化为二氧化碳和水逸出,而样品中 的有机氮转化为氨与硫酸结合成硫酸铵。然后加碱蒸馏, 使氨蒸出。 用H3BO3吸收后再以标准HCl溶液滴定。根据标准酸 消耗量可以计算出蛋白质的含量。 也可以用过量的标准H2SO4或标准HCl溶液吸收后再 以标准NaOH滴定过量的酸
2.过程:消化、蒸馏、吸收与滴定1):消化总反应式:2NH, ((CH,) 2COOH+13H,SO4(NH4) 2SO4+6CO,+12SO2+16H,0一定要用浓硫酸(98%)<1>98%浓硫酸浓硫酸具有脱水性,使有机物脱水后被炭化为碳、氢、氮。浓硫酸具有氧化性,将有机物炭化后的碳氧化为二氧化碳,硫酸则被还原成二氧化硫。HSO+C=2SO+2H0+CO二氧化硫使氮还原为氨,本身则被氧化为三氧化硫,氨随之与硫酸作用生成酸铵留在酸性溶液中。HSO十2NH3=(NH)2SO
2.过程:消化、蒸馏、吸收与滴定 1). 消化 总反应式: 2NH2(CH2)2COOH+13H2SO4 (NH4)2SO4+6CO2+12SO2+16H2O 一定要用浓硫酸(98%) <1> 98%浓硫酸 浓硫酸具有脱水性,使有机物脱水后被炭化为碳、氢、氮。 浓硫酸具有氧化性,将有机物炭化后的碳氧化为二氧化碳, 硫酸则被还原成二氧化硫。 H2SO4 +C =2SO2+ 2H2O +CO2 二氧化硫使氮还原为氨,本身则被氧化为三氧化硫,氨随 之与硫酸作用生成硫酸铵留在酸性溶液中。 H2SO4+2NH3 = (NH4 )2SO4
<2>加硫酸钾作为增温剂,提高溶液沸点,纯硫酸沸点340℃,加入硫酸钾之后可以提高至400℃以上。也可加入硫酸钠,氯化钾等提高沸点,但效果不如硫酸钾。<3>加硫酸铜作为催化剂。还可以作消化终点指示剂(做蒸馏时碱性指示剂)。还可以加氧化汞、汞(均有毒,价格贵)、硒粉、二氧化钛。<4>加氧化剂如双氧水、次氯酸钾等加速有机物氧化速度
<3> 加硫酸铜 作为催化剂。还可以作消化终点指示剂 (做蒸馏时碱性指示剂)。还可以加氧化汞、汞(均有 毒,价格贵)、硒粉、二氧化钛。 <4> 加氧化剂 如双氧水、次氯酸钾等加速有机 物氧化速 度。 <2>加硫酸钾 作为增温剂,提高溶液沸点, 纯硫酸沸点 340℃,加入硫酸钾之后可以提高 至400℃以上。也可加入硫酸钠,氯化钾等提 高沸点,但效果不如硫酸钾
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仪器: 消化装置
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