瓊 荧光法测定 硫酸奎宁溶液的含量 复旦大学版权所有 自
荧光法测定 硫酸奎宁溶液的含量 复旦大学版权所有 1
Experimental purposes 1.掌握荧光法的原理与定量分析方法（标准曲线 法)； 2.熟悉荧光分光光度计的使用方法； 复旦大学版权所有
Experimental purposes 1. 掌握荧光法的原理与定量分析方法（标准曲线 法）； 2. 熟悉荧光分光光度计的使用方法； 复旦大学版权所有 2
Experimental Principle 物质分子接受光子能量被激发后，从第一激发 单重态的最低振动能级返回基态时发射出的光即为 荧光。 由于各种去活化过程的存在，荧光辐射能通常 要比激发能量低，或者说，荧光波长大于激发波长。 复旦大学版权所有
Experimental Principle 物质分子接受光子能量被激发后，从第一激发 单重态的最低振动能级返回基态时发射出的光即为 荧光。 由于各种去活化过程的存在，荧光辐射能通常 要比激发能量低，或者说，荧光波长大于激发波长。 复旦大学版权所有 3
Experimental Principle 荧光仪器 1)光源：氙灯、高压 激发单色器 样品池 汞灯、激光； 光源 2)样品池：石英（无 荧光发射)； 3)两个单色器：激发 发射单色 和发射； 指示器 4)检测系统：检测器 和放大器(PMT)。 放大器 检测器 记录器 复旦大学版权所有
Experimental Principle 1）光源：氙灯、高压 汞灯、激光； 2）样品池：石英（无 荧光发射）； 3）两个单色器：激发 和发射； 4）检测系统：检测器 和放大器（PMT）。 荧光仪器 光源 激发单色器 样品池 发 射 单 色 器 放大器 检测器 指示器· 记录器 复旦大学版权所有 4
Experimental Principle 1)激发光谱 (excitation spectrum,即EX) 激发光谱 荧光光谱 将激发光的光源用激发单色器分 光，使不同波长的入射光激发荧光体， 磷光光谱 然后让所产生的荧光通过固定波长的 要 发射单色器而照到检测器上，测定不 同波长光照射下荧光强度的变化，以 激发波长（ex)为横坐标，荧光强 200 300 400】 500 度（F)为纵坐标，可得荧光物质的 4nm 激发光谱。 复旦大学版权所有
Experimental Principle 激发光谱 荧光光谱 磷光光谱 复旦大学版权所有 5 1）激发光谱（excitation spectrum，即EX） 将激发光的光源用激发单色器分 光，使不同波长的入射光激发荧光体， 然后让所产生的荧光通过固定波长的 发射单色器而照到检测器上，测定不 同波长光照射下荧光强度的变化，以 激发波长（ λex ）为横坐标，荧光强 度（ F）为纵坐标，可得荧光物质的 激发光谱