磺基水杨酸比色法测定微量铁的 条件筛选与含量测定 复且大学版权所有
磺基水杨酸比色法测定微量铁的 条件筛选与含量测定 复旦大学版权所有 1
Experimental purposes and requirements 1. 了解紫外-可见分光光度法和比色法测定物质含 量的原理和方法。 2.学习紫外-可见分光光度计的使用。 复旦大学版权所有
Experimental purposes and requirements 1. 了解紫外-可见分光光度法和比色法测定物质含 量的原理和方法。 2. 学习紫外-可见分光光度计的使用。 2 复旦大学版权所有
Experimental Principle 分光光度法基本原理 分光光度法(spectrophotometry)是基于物质分子对光的选择性吸收而建 立起来的分析方法。按物质吸收光的波长不同，分光光度法可分为紫外分 光光度法、可见分光光度法、红外分光光度法。 Lambert-Beer定律：当用适当波长的单色光照射一固定浓度的溶液时，液 层厚度()一定，溶液均匀时，吸光度与浓度成正比。 A=-Ig(I/Io)=Ig(Io /I )=cl. 分光光度法的灵敏度较高，适用于微量组分的测定。其灵敏度一般能达到 1~10μgL的数量级。但该方法的相对误差较大，一般可达到2~5%。 复旦大学版权所有
Experimental Principle 3 分光光度法（spectrophotometry）是基于物质分子对光的选择性吸收而建 立起来的分析方法。按物质吸收光的波长不同，分光光度法可分为紫外分 光光度法、可见分光光度法、红外分光光度法。 Lambert-Beer定律：当用适当波长的单色光照射一固定浓度的溶液时，液 层厚度（l）一定，溶液均匀时，吸光度与浓度成正比。 A= -lg(It／I0 )= lg(I0／It )=εcl。 分光光度法的灵敏度较高，适用于微量组分的测定。其灵敏度一般能达到 1～10μg/L的数量级。但该方法的相对误差较大，一般可达到2 ～5%。 分光光度法基本原理 复旦大学版权所有
Experimental principle 本实验测量的Fe3+溶液的浓度很稀(50μg/mL)，基本可以 认为是无色的，直接使用紫外-可见分光光度法测量得不到有强 度的信号。因此，需要加入显色剂进行比色法测定。 比色法：以生成有色化合物的显色反应为基础，通过比较 或测量有色物质溶液颜色深度来确定待测组分含量的方法。 复旦大学版权所有
Experimental Principle 4 本实验测量的Fe3+溶液的浓度很稀（50μg/mL），基本可以 认为是无色的，直接使用紫外-可见分光光度法测量得不到有强 度的信号。因此，需要加入显色剂进行比色法测定。 比色法：以生成有色化合物的显色反应为基础，通过比较 或测量有色物质溶液颜色深度来确定待测组分含量的方法。 复旦大学版权所有
Experimental Principle 磺基水杨酸(CH,OS2H,0)与Fe3+可以形成稳定的配合 物，其组成随溶液pH值的不同而改变。在不同的pH下，磺基水 杨酸与F3+能分别形成三种不同颜色的配离子： pH=23,生成n=1,磺基水杨酸合铁（Ⅲ）紫红色配合物； pH=49,生成n=2,二磺基水杨酸合铁（Ⅲ）红色配合物； pH=9~11,生成=3，三磺基水杨酸合铁（Ⅲ)黄色配合物。 本实验使用紫外-可见分光光度法测定H>9时所形成的黄色 三磺基水杨酸合铁（Ⅲ）的浓度来定量测定。 复旦大学版权所有
Experimental Principle 磺基水杨酸（ C7H6O6S·2H2O）与Fe3+可以形成稳定的配合 物，其组成随溶液pH值的不同而改变。在不同的pH下，磺基水 杨酸与Fe3+能分别形成三种不同颜色的配离子： pH=2～3，生成n=1，磺基水杨酸合铁（Ⅲ）紫红色配合物； pH=4 ～9，生成n=2 ，二磺基水杨酸合铁（Ⅲ）红色配合物； pH= 9 ～11，生成n=3，三磺基水杨酸合铁（Ⅲ） 黄色配合物。 本实验使用紫外-可见分光光度法测定pH>9时所形成的黄色 三磺基水杨酸合铁（Ⅲ）的浓度来定量测定。 5 复旦大学版权所有