药理学实验讲义 江汉大学医学与生命科学学院 药理教研室 二零零五年六月 PdfcreatedwithFineprintpdffactoryProtrialversionhttp://www.fineprint.com
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录 药理学实验的基本知识和技术· 实验一剂量对药物作用的影响 实验二钡盐的溶解度与作用关系 实验三不同给药途径对药物作用的影响 实验四pA2的测定··· 实验五药物血浆半衰期及表观分布容积的测定 实验六有机磷农药中毒与解救· 实验七综合实验药物对家兔血压、心律的影响。···· 实验八综合实验:药物利尿作用观察· 实验九综合实验:药物对呼吸的抑制及兴奋作用观察····· 实验十病例讨论· PdfcreatedwithFineprintpdffactoryProtrialversionhttp://www.fineprint.com
目 录 药理学实验的基本知识和技术················ 实验一 剂量对药物作用的影响················ 实验二 钡盐的溶解度与作用关系··············· 实验三 不同给药途径对药物作用的影响············ 实验四 pA2的测定····················· 实验五 药物血浆半衰期及表观分布容积的测定········ 实验六 有机磷农药中毒与解救··············· 实验七 综合实验 药物对家兔血压、心律的影响······· 实验八 综合实验:药物利尿作用观察············· 实验九 综合实验：药物对呼吸的抑制及兴奋作用观察····· 实验十 病例讨论····················· PDF created with FinePrint pdfFactory Pro trial version http://www.fineprint.com
药理学实验的基本知识和技术 药理学实验目的 药理学实验是药理学教学的一个重要组成部分,它包括实验操作、整理分析并讨论实验 结果、正确书写实验报告。目的在于通过实验验证理论、巩固并加强对理论知识的理解;同 时通过实验,使学生掌握药理实验的基本方法和技能,培养对科学工作严肃的态度,严密的 方法和严格的要求,培养根据客观实际分析问题和解决问题的能力,为今后进行科学研究打 下初步基础 、药理学实验设计的基本知识 (一)基本要求 1、明确实验目的,立题即需达到什么学习或研究目的,选择合适研究课题。课题应 具有科学性、创新性、可行性等。 2、通过文献检索了解待研究内容的国内外研究现状 3、选择合适的实验动物及模型如在研究强心甙药理正肌作用时,常选用豚鼠或猫而 不选用大鼠,这是因为大鼠心肌Na-K'sm酶亚型对强心甙不敏感之故。 4、确定实验方法在整体水平还是离体器官、组织水平或细胞、分子水平进行实验, 宜根据实验室条件合理选择可行的实验方法 5、完整的实验设计应包括实验目的、方法、材料、指标、数据收集与分析、统计学处 理、预期结果等 (二)基本原则 药理学实验设计应遵循的基本原则是:随机、对照、重复 1、随机原则 药理学实验的对象是生物活体或组织标本,存在个体间差异,因此,采用随机原则, 可把实验对象在机会均等的条件下分配到实验各组,从而有效地消除分组时主观因素或其 它客观因素的干扰,排除偏因,减少误差。但应注意随机不等于随意 (1)完全随机化法 把实验对象完全随机地分配到各实验组中去,此法最简单、常用,一般适用于单因素大 样本实验。如随机数字法、抓阄等。 (2)均衡随机法 先将动物按性别、体重、或者其他因素加以均衡,将条件基本相同的动物随机分配于各 组中以减少组间的差异。 率较高。 2、对照原则 在药理学实验中,影响实验结果的因素很多,有些因素是可以控制的,有些则难以控 制,为了减少多因素及难以控制因素的影响,实验中应同时设立对照组,用对照组和实验组 PdfcreatedwithFineprintpdffactoryProtrialversionhttp://www.fineprint.com
药理学实验的基本知识和技术 一、药理学实验目的 药理学实验是药理学教学的一个重要组成部分，它包括实验操作、整理分析并讨论实验 结果、正确书写实验报告。目的在于通过实验验证理论、巩固并加强对理论知识的理解；同 时通过实验，使学生掌握药理实验的基本方法和技能，培养对科学工作严肃的态度，严密的 方法和严格的要求，培养根据客观实际分析问题和解决问题的能力，为今后进行科学研究打 下初步基础。 二、药理学实验设计的基本知识 （一）基本要求 1、 明确实验目的，立题 即需达到什么学习或研究目的，选择合适研究课题。课题应 具有科学性、创新性、可行性等。 2、 通过文献检索了解待研究内容的国内外研究现状。 3、 选择合适的实验动物及模型 如在研究强心甙药理正肌作用时，常选用豚鼠或猫而 不选用大鼠，这是因为大鼠心肌 Na+ -K+ ATP酶亚型对强心甙不敏感之故。 4、 确定实验方法 在整体水平还是离体器官、组织水平或细胞、分子水平进行实验， 宜根据实验室条件合理选择可行的实验方法。 5、 完整的实验设计应包括实验目的、方法、材料、指标、数据收集与分析、统计学处 理、预期结果等。 （二）基本原则 药理学实验设计应遵循的基本原则是：随机、对照、重复。 1、随机原则 药理学实验的对象是生物活体或组织标本，存在个体间差异，因此，采用随机原则， 可把实验对象在机会均等的条件下分配到实验各组，从而有效地消除分组时主观因素或其 它客观因素的干扰，排除偏因，减少误差。但应注意随机不等于随意。 ⑴ 完全随机化法 把实验对象完全随机地分配到各实验组中去，此法最简单、常用，一般适用于单因素大 样本实验。如随机数字法、抓阄等。 ⑵ 均衡随机法 先将动物按性别、体重、或者其他因素加以均衡，将条件基本相同的动物随机分配于各 组中以减少组间的差异。此法效率较高。 2、对照原则 在药理学实验中，影响实验结果的因素很多，有些因素是可以控制的，有些则难以控 制，为了减少多因素及难以控制因素的影响，实验中应同时设立对照组，用对照组和实验组 PDF created with FinePrint pdfFactory Pro trial version http://www.fineprint.com
间的比较来消除各种无关因素的影响,使实验结果误差尽可能地缩小,达到正确评价药物效 果的目的。 没有比较就没有鉴别,对照是比较的基础。没有设立对照组的药理学实验就是缺乏科学 性的实验。根据实验研究内容不同,选用不同的对照形式,常用的有下列5种 ①空白对照指不加任何处理条件下进行观察的对照 ②阴性对照除不用被研究的药物外,对照组的动物要经受同样的处理,如给予生理盐水 或不含药物的溶媒 ③阳性对照指已知经典药物在标准条件下与实验药物进行的对照。它既可验证实验方法 是否可靠,又便于受试药与经典药比较,评价药物的效价强度等。 ④组间对照实验中设立若干个平行组,进行组间比较。如受试药分成若干剂量,分别给 予分组,进行组间比组,以便说明量效关系(或剂量依赖性)。一般至少设3个剂量组。 ⑤自身对照指对照与实验在同一受试对象上进行,观察同一受试者给药前后变化即为自 身对照,这一对照可以较好地减少个体差异的影响,省时节力 实验设计中,无论采用何种对照形式,其前提必须要符合“齐同对比”即同时、同地 同环境、同种、同重(或同体表面积)、同批号的要求,对照方才有意义 3、重复原则 其目的就是排除实验结果的偶然性,肯定其客观规律性。 由于生物个体差异和实验误差,仅根据一次实验或一个样本所得结果就草率下结论,是 不科学的,因而往往也是错误的,重复是指在类似的条件下,把实验结果重复(复制,重现) 出来,稳定的重复性是评价实验结果可靠性的重要依据,在具体应用重复原则指导实验设计 时,它主要有两方面的作用 (1)确定样本大小 一般情况下,小动物,每组10~30例,计量资料组间对比时,每组应不少于10例,计 数资料则每组不少于50例。中等动物每组8-12例,大动物每组5-15例 按照统计学原理,每组样本数相同时,实验效率最高:量反应比质反应指标效率高;自 体实验比分组实验效率高 (2)控制干扰因素 可从动物方面、测定仪器方面、药物方面减少不确定因素的影响。如药物结构或药物主要 成分含量能否明确和控制对实验能否重复至关重要,尤其是中药研究 三、实验动物用药量的计算 动物实验所用的药物剂量,一般按mg/kg体重或g/kg体重计算,应用时须从已知药液 的浓度换算出相当于每kg体重应注射的药液量(m1数),以便给药 例1:计算给体重1.8kg的家兔,静脉注射20%氨基甲酸乙酯溶液麻醉,按每kg体重 lg的剂量注射,应注射多少m1? PdfcreatedwithFineprintpdffactoryProtrialversionhttp://www.fineprint.com
间的比较来消除各种无关因素的影响，使实验结果误差尽可能地缩小，达到正确评价药物效 果的目的。 没有比较就没有鉴别，对照是比较的基础。没有设立对照组的药理学实验就是缺乏科学 性的实验。根据实验研究内容不同，选用不同的对照形式，常用的有下列 5 种 ①空白对照 指不加任何处理条件下进行观察的对照 ②阴性对照 除不用被研究的药物外，对照组的动物要经受同样的处理，如给予生理盐水 或不含药物的溶媒 ③阳性对照 指已知经典药物在标准条件下与实验药物进行的对照。它既可验证实验方法 是否可靠，又便于受试药与经典药比较，评价药物的效价强度等。 ④组间对照 实验中设立若干个平行组，进行组间比较。如受试药分成若干剂量，分别给 予分组，进行组间比组，以便说明量效关系（或剂量依赖性）。一般至少设 3 个剂量组。 ⑤自身对照 指对照与实验在同一受试对象上进行，观察同一受试者给药前后变化即为自 身对照，这一对照可以较好地减少个体差异的影响，省时节力。 实验设计中，无论采用何种对照形式，其前提必须要符合“齐同对比”即同时、同地、 同环境、同种、同重（或同体表面积）、同批号的要求，对照方才有意义。 3、重复原则 其目的就是排除实验结果的偶然性，肯定其客观规律性。 由于生物个体差异和实验误差，仅根据一次实验或一个样本所得结果就草率下结论，是 不科学的，因而往往也是错误的，重复是指在类似的条件下，把实验结果重复（复制，重现） 出来，稳定的重复性是评价实验结果可靠性的重要依据，在具体应用重复原则指导实验设计 时，它主要有两方面的作用。 ⑴ 确定样本大小 一般情况下，小动物，每组 10~30 例，计量资料组间对比时，每组应不少于 10 例，计 数资料则每组不少于 50 例。中等动物每组 8~12 例，大动物每组 5~15 例。 按照统计学原理，每组样本数相同时，实验效率最高；量反应比质反应指标效率高；自 体实验比分组实验效率高。 ⑵ 控制干扰因素 可从动物方面、测定仪器方面、药物方面减少不确定因素的影响。如药物结构或药物主要 成分含量能否明确和控制对实验能否重复至关重要，尤其是中药研究。 三、实验动物用药量的计算 动物实验所用的药物剂量，一般按 mg/kg 体重或 g/kg 体重计算，应用时须从已知药液 的浓度换算出相当于每 kg 体重应注射的药液量（ml 数），以便给药。 例 1：计算给体重 1.8kg 的家兔，静脉注射 20%氨基甲酸乙酯溶液麻醉，按每 kg 体重 1g 的剂量注射，应注射多少 ml？ PDF created with FinePrint pdfFactory Pro trial version http://www.fineprint.com
计算方法:家兔每kg体重需注射1g,注射液为20%,则氨基甲酸乙酯溶液的注射量应 为5ml/kg体重,现在兔体重为1.8kg,应注射20%氨基甲酸乙酯溶液用量=5×1.8=9ml 例2:计算给体重23g的小鼠,注射盐酸吗啡15ng/kg重,溶液浓度为0.1%,应注射多 少m1? 计算方法:小白鼠每kg体重需吗啡的量为15mg,则0.1%盐酸吗啡溶液的注射量应为 l5ml/kg体重,现小白鼠体重为23g,应注射0.1%盐酸吗啡溶液的用量=15×0.023=0.345ml PdfcreatedwithFineprintpdffactoryProtrialversionhttp://www.fineprint.com
计算方法：家兔每 kg 体重需注射 1g，注射液为 20％，则氨基甲酸乙酯溶液的注射量应 为 5ml/kg 体重，现在兔体重为 1.8kg，应注射 20%氨基甲酸乙酯溶液用量=5×1.8=9ml。 例 2：计算给体重 23g 的小鼠，注射盐酸吗啡 15mg/kg 重，溶液浓度为 0.1%，应注射多 少 ml？ 计算方法：小白鼠每 kg 体重需吗啡的量为 15mg，则 0.1%盐酸吗啡溶液的注射量应为 15ml/kg 体重，现小白鼠体重为 23g，应注射 0.1%盐酸吗啡溶液的用量=15×0.023=0.345ml。 PDF created with FinePrint pdfFactory Pro trial version http://www.fineprint.com