四、转基因动物技术路线中的 转基因胚胎干细胞 胚胎干细胞(ES)可从鼠胚胎外胚层中 分离获得,既可体外培养建株,又具全 能分化潜能。ES细胞接种适当小鼠胚胎 中产生嵌合小鼠。若将外源基因转入ES 细胞后,再接种到胚胎中可产生转基因 嵌合小鼠。迄今,只有培养的小鼠ES细 胞可以分化为体细胞或胚系细胞。而其 他动物如羊、牛和猪的ES细胞都没有这 种能力。(采用ES细胞的优点)
四、转基因动物技术路线中的 转基因胚胎干细胞 • 胚胎干细胞(ES)可从鼠胚胎外胚层中 分离获得,既可体外培养建株,又具全 能分化潜能。ES细胞接种适当小鼠胚胎 中产生嵌合小鼠。若将外源基因转入ES 细胞后,再接种到胚胎中可产生转基因 嵌合小鼠。迄今,只有培养的小鼠ES细 胞可以分化为体细胞或胚系细胞。而其 他动物如羊、牛和猪的ES细胞都没有这 种能力。(采用ES细胞的优点)
五、基因敲除的小鼠模型的建 立方法 培育基因靶向性敲除小鼠的实施步骤为: 1.首先将某基因突变位点经同源重组引入小鼠 ES细胞。 2将含有靶向敲除的突变基因位点的ES细胞注 入小鼠早期胚胎中,孕育出嵌合小鼠,此嵌合小 鼠体内胚系细胞群和体细胞群都会有来自ES细 胞和受者胚胎鼠细胞的DNA。 3检测嵌合小鼠交配后的生殖细胞内是否整合 有突变的基因位点。 4在各只敲除的突变基因位点杂合性小鼠之间 交配,以产生纯合性基因敲除小鼠
五、基因敲除的小鼠模型的建 立方法 培育基因靶向性敲除小鼠的实施步骤为: • 1.首先将某基因突变位点经同源重组引入小鼠 ES细胞。 • 2.将含有靶向敲除的突变基因位点的ES细胞注 入小鼠早期胚胎中, 孕育出嵌合小鼠, 此嵌合小 鼠体内胚系细胞群和体细胞群都会有来自ES细 胞和受者胚胎鼠细胞的DNA。 • 3.检测嵌合小鼠交配后的生殖细胞内是否整合 有突变的基因位点。 • 4.在各只敲除的突变基因位点杂合性小鼠之间 交配, 以产生纯合性基因敲除小鼠