上游充通大睾 Shanghai Jiao Tong University Hpa的识别序列： 5-GTTAAC-3 3-CAATTG-5 5-GTT AAC-3 3-CAA TTG-5 切割后形成具有平末端 (blunt end)的DNA片段： 具有平末端的DNA片段也可以在DNA连接酶的作用连接起来 上海交大生命学院陈峰
Shanghai Jiao Tong University 上海交大生命学院陈峰 HpaI的识别序列： 5` - G T T A A C - 3` 3` - C A A T T G - 5` 5` - G T T A A C - 3` 3` - C A A T T G - 5` 切割后形成具有平末端（blunt end）的DNA片段： 具有平末端的DNA片段也可以在DNA连接酶的作用连接起来
上游克通大睾 Shanghai Jiao Tong University 不同的限制性核酸内切酶识别DNA中的碱基对序列长短不同 在随机排列的DNA序列中，识别位点序列长的限制酶，在酶切 后所得到的DNA片段长，相反识别位点序列短的限制酶，酶切 后所得到DNA片段短。 上海交大生命学院陈峰
Shanghai Jiao Tong University 上海交大生命学院陈峰 不同的限制性核酸内切酶识别DNA中的碱基对序列长短不同 在随机排列的DNA序列中，识别位点序列长的限制酶，在酶切 后所得到的DNA片段长，相反识别位点序列短的限制酶，酶切 后所得到DNA片段短
上泽克通大￥ Shanghai Jiao Tong University 同裂酶 (Isoschizomers 来源不同的限制酶却识别和切割相同的序列 同裂酶的反应条件可能存在差异 上海交大生命学院陈峰
Shanghai Jiao Tong University 上海交大生命学院陈峰 同裂酶（Isoschizomers） 来源不同的限制酶却识别和切割相同的序列 同裂酶的反应条件可能存在差异
上浒充通大睾 Shanghai Jiao Tong University 同尾酶(Isocaudomers) 来源不同的限制酶，识别及切割序列各不相同，但却能产生 出相同的粘性末端。 5-CAATTG-3 5-C AATTG-3 3-GTTAA C-5 3-GTTAA C-5 EcoRI: 5-GAATTC-3 5-G AATTC-3 3-CTTAA G-5 3-CTTAA G-5 重新连接后的序列： 5-CAATTC-3 3-GTTAAG-5 上海交大生命学院陈峰
Shanghai Jiao Tong University 上海交大生命学院陈峰 同尾酶 (Isocaudomers) 来源不同的限制酶，识别及切割序列各不相同，但却能产生 出相同的粘性末端。 MunI： 5` - C A A T T G - 3` 3` - G T T A A C - 5` EcoRI： 5` - G A A T T C - 3` 3` - C T T A A G - 5` 5` - C A A T T G - 3` 3` - G T T A A C - 5` 5` - G A A T T C - 3` 3` - C T T A A G - 5` 重新连接后的序列： 5` - C A A T T C - 3` 3` - G T T A A G - 5`
上浒克通大￥ Shanghai Jiao Tong University 二、DNA连接酶 (DNA ligase) T4DNA连接酶 两种常用连接酶 大肠杆菌DNA连接酶 在体外将目的基因和载体共价连接构成重 组DNA分子 上海交大生命学院陈峰
Shanghai Jiao Tong University 上海交大生命学院陈峰 二、DNA连接酶（DNA ligase） T4 DNA连接酶 大肠杆菌DNA连接酶 在体外将目的基因和载体共价连接构成重 组DNA分子 两种常用连接酶