上游充通大睾 Shanghai Jiao Tong University 常用的几种体外DNA连接方法: a)用T4或E.coli连接酶连接具有互补粘性末端的DNA 片段; b)用T4连接酶连接具有平末端的DNA片段; C)先在DNA片段末端加上人工接头,使其形成粘性末端, 然后再行连接。 d) 将粘性末端补平或修平(用单链酶,如绿豆芽核酸酶) 再连接 上海交大生命学院陈峰
Shanghai Jiao Tong University 上海交大生命学院陈峰 常用的几种体外DNA连接方法: a)用T4或E.coli 连接酶连接具有互补粘性末端的DNA 片段; b)用T4连接酶连接具有平末端的DNA片段; c)先在DNA片段末端加上人工接头,使其形成粘性末端, 然后再行连接。 d)将粘性末端补平或修平(用单链酶,如绿豆芽核酸酶) 再连接
上游充通大¥ Shanghai Jiao Tong University 三、其它酶 DNA聚合酶: 从大肠杆菌中提取,用于体外合成DNA 碱性磷酸脂酶: 用于DNA连接时对载体的某段末端进行 修饰,以减少载体的自身环化 核酸外切酶: 用于DNA的缺失分析 单链核酸内切酶: 用于修饰粘性末端及进行DNA结构分析: 上海交大生命学院陈峰
Shanghai Jiao Tong University 上海交大生命学院陈峰 三、其它酶 DNA聚合酶: 从大肠杆菌中提取,用于体外合成DNA 碱性磷酸脂酶: 用于DNA连接时对载体的某段末端进行 修饰,以减少载体的自身环化 核酸外切酶: 用于DNA的缺失分析 单链核酸内切酶: 用于修饰粘性末端及进行DNA结构分析