上游充通大睾 Shanghai Jiao Tong University >GROWTH H⊙PM⊙NE (c) MT PROMOTER pBR 可产生基因工程药物的羊 Fig (a)These two mice are genetically the same strain,except that the 带有人类激素基因的小鼠 one on the right has been transfected with the human growth hormone gene (shown in its circular plasma vector).The new gene spurred an increase in this mouse's growth rate until it dwarfed its normal-sized companion.(b)Comparison of the meat from a pig into which bovine growth hormone genes were introduced (left) and a normal pig (right).A section taken at the same rib area of the two pigs indicates significantly reduced fat content in the transgenic pig.Both animals weighed approximately the same (Goat as drug factory.This normal-looking goat carries a human gene for synthesizing the cystic fibrosis transmembrane regulator (CFTR)protein.If tests go as planned,the CFTR will be marketed as a replacement factor for children with cystic fibrosis. 上海交大生命学院陈峰
Shanghai Jiao Tong University 上海交大生命学院陈峰 带有人类激素基因的小鼠 可产生基因工程药物的羊
上气通大学 Shanghai Jiao Tong University 第二节微生物与基因工程工具酶 限制性核酸内切酶(restriction endonuclease) 能识别双链DNA分子的特定序列,并在识别位点或其附近切割 DNA的一类内切酶,简称为限制性酶(restrition enzyme) 在细菌细胞内限制性酶与DNA甲基化酶共同构成细菌的限制- 修饰系统,利用限制酶降解进入细胞内的外源DNA,同时用甲 基化酶修饰细菌本身DNA,以避免被酶降解。 上海交大生命学院陈峰
Shanghai Jiao Tong University 上海交大生命学院陈峰 第二节 微生物与基因工程工具酶 一、限制性核酸内切酶(restriction endonuclease) 能识别双链DNA分子的特定序列,并在识别位点或其附近切割 DNA的一类内切酶,简称为限制性酶(restrition enzyme)。 在细菌细胞内限制性酶与DNA甲基化酶共同构成细菌的限制– 修饰系统,利用限制酶降解进入细胞内的外源DNA,同时用甲 基化酶修饰细菌本身DNA,以避免被酶降解
上浒克通大¥ Shanghai Jiao Tong University 限制性核酸内切酶的命名 取微生物属名的第一个字母和种名的头两个字母组成三个斜体 字母加以表示,遇有株名,再加在后面。如果同一菌株先后发现几 个不同的酶,则用罗马数字加以表示。 EcoRI E:表示大肠杆菌属名第一个字母 C0:表示种名头两个字母 R: 表示株名 I: 表示该菌中第一个被分离出来的酶。 上海交大生命学院陈峰
Shanghai Jiao Tong University 上海交大生命学院陈峰 取微生物属名的第一个字母和种名的头两个字母组成三个斜体 字母加以表示,遇有株名,再加在后面。如果同一菌株先后发现几 个不同的酶,则用罗马数字加以表示。 EcoRI E: 表示大肠杆菌属名第一个字母 co: 表示种名头两个字母 R: 表示株名 I: 表示该菌中第一个被分离出来的酶。 限制性核酸内切酶的命名
上浒克通大¥ Shanghai Jiao Tong University 回文结构 (palindromic structure) 识别序列通常由4~8个碱基对组成,具有二重旋转对称轴, 序列呈回文结构(palindromic structure) 上海交大生命学院陈峰
Shanghai Jiao Tong University 上海交大生命学院陈峰 识别序列通常由4~8个碱基对组成,具有二重旋转对称轴, 序列呈回文结构(palindromic structure)。 回文结构(palindromic structure)
上浒充通大睾 Shanghai Jiao Tong University Hind III的识别序列: 5-AAGCTT-3 3'-T TCG AA-5 5-A AGCTT-3 3-TTCGA A-5 切割后形成具有粘性末端 (cohesive end)的DNA片段: 二个具有互相匹配的粘性末端的DNA片段可以通过碱基 的互补及DNA连接酶的作用而重新连接起来。 上海交大生命学院陈峰
Shanghai Jiao Tong University 上海交大生命学院陈峰 Hind III的识别序列: 5`-A A G C T T-3` 3`-T T C G A A-5` 5`-A A G C T T-3` 3`-T T C G A A-5` 切割后形成具有粘性末端(cohesive end)的DNA片段: 二个具有互相匹配的粘性末端的DNA片段可以通过碱基 的互补及DNA连接酶的作用而重新连接起来