16 2.涂片染色法 应用:可同时计数不同微生物的菌数,适 于土壤、牛奶中细菌计数。 方法:用镜台测微尺计算出视野面积;取 0.1ml菌液涂于1cm2面积上,计数后代 入公式: 每ml原菌液含菌数 =视野中平均菌数×涂布面积/视野面积×100 × 稀释倍数
16 2.涂片染色法 应用:可同时计数不同微生物的菌数,适 于土壤、牛奶中细菌计数。 方法:用镜台测微尺计算出视野面积;取 0.1ml菌液涂于1cm2面积上,计数后代 入公式: 每ml原菌液含菌数 =视野中平均菌数×涂布面积/视野面积×100 × 稀释倍数
17 3.平板菌落计数法 平板菌落计数法 最常用的活菌计数法。 将适当稀释的菌液倾注平板或涂布在平板表面,经保 温培养后,以平板上出现的菌落数乘以稀释度就可 以计算出原菌液的含菌量。 直径9cm的培养皿平板上出现菌落数一般以50~500为 宜。按照国家标准规定的样品菌落总数测定的计数 原则,以平板菌落数在30~300之间为报告依据。 9ml 9ml 9ml 9ml 1ml 1ml 1ml 1ml 1ml 1ml 1ml ×2 ×2 ×2
17 3.平板菌落计数法 平板菌落计数法 最常用的活菌计数法。 将适当稀释的菌液倾注平板或涂布在平板表面,经保 温培养后,以平板上出现的菌落数乘以稀释度就可 以计算出原菌液的含菌量。 直径9cm的培养皿平板上出现菌落数一般以50~500为 宜。按照国家标准规定的样品菌落总数测定的计数 原则,以平板菌落数在30~300之间为报告依据。 9ml 9ml 9ml 9ml 1ml 1ml 1ml 1ml 1ml 1ml 1ml ×2 ×2 ×2
18 3.平板菌落计数法 ★技术要求:样品充分混匀,操作熟练快速(15~20min完 成操作),严格无菌操作; ★注意事项:每一支吸管只能用于一个稀释度,样品混匀 处理,倾注平板时的培养基温度; ★适用范围:中温、好氧和兼性厌氧、能在营养琼脂上生 长的微生物, ★误差:多次稀释造成的误差是主要来源,其次还有由于 样品内菌体分布不均匀、以及不当操作 ★A standard plate count (viable count) reflects the number of viable microbes and assumes that each bacterium grows into a single colony; plate counts are reported as number of colony-forming units (CFU) per ml (CFU/ml) or per g (CFU/g) of sample
18 3.平板菌落计数法 ★技术要求:样品充分混匀,操作熟练快速(15~20min完 成操作),严格无菌操作; ★注意事项:每一支吸管只能用于一个稀释度,样品混匀 处理,倾注平板时的培养基温度; ★适用范围:中温、好氧和兼性厌氧、能在营养琼脂上生 长的微生物, ★误差:多次稀释造成的误差是主要来源,其次还有由于 样品内菌体分布不均匀、以及不当操作 ★A standard plate count (viable count) reflects the number of viable microbes and assumes that each bacterium grows into a single colony; plate counts are reported as number of colony-forming units (CFU) per ml (CFU/ml) or per g (CFU/g) of sample
19 When we observe colonies, we cannot assume each arose from just one cell originally planted on the medium, however. A pair, chain or cluster of cells which 'land' on the medium in close proximity to each other can multiply and produce a single colony. Thus, we use the term colony-forming unit when we consider the common origin for the cells of any colony." This term is usually abbreviated CFU. Colony-Forming Unit
19 When we observe colonies, we cannot assume each arose from just one cell originally planted on the medium, however. A pair, chain or cluster of cells which 'land' on the medium in close proximity to each other can multiply and produce a single colony. Thus, we use the term colony-forming unit when we consider the common origin for the cells of any colony." This term is usually abbreviated CFU. Colony-Forming Unit
20 液体稀释法 4.液体稀释法 对样品做10倍连续稀释,从适宜的3个连续稀释度 中各取5ml试样,接种3组共9支装有培养液的试 管中(每管接入1ml)。经培养后,记录每个稀 释度出现生长的试管数,然后查M.P.N.表(most probable number,最大可能数),根据样品稀释 倍数就可计算处其中的活菌含量。 9ml 9ml 9ml 9ml 1ml 1ml 1ml × 3 ×3 ×3 1ml 1ml 1ml 1ml 10n 10n-2 10n-1
20 液体稀释法 4.液体稀释法 对样品做10倍连续稀释,从适宜的3个连续稀释度 中各取5ml试样,接种3组共9支装有培养液的试 管中(每管接入1ml)。经培养后,记录每个稀 释度出现生长的试管数,然后查M.P.N.表(most probable number,最大可能数),根据样品稀释 倍数就可计算处其中的活菌含量。 9ml 9ml 9ml 9ml 1ml 1ml 1ml × 3 ×3 ×3 1ml 1ml 1ml 1ml 10n 10n-2 10n-1