一、菌种的衰退与复壮的概念 1.衰退(degeneration) :菌种在培养或保藏 过程中,由于自发突变的存在,出现某些原有 优良生产性状的劣化、遗传标记的丢失等现象, 称为菌种的衰退。 衰退的原因:①基因突变,②分离现象。 常见的衰退现象: 菌落和细胞形态的改变; 生长速度缓慢,产孢子越来越少; 抵抗力、抗不良环境能力减弱等。 代谢产物生产能力或其对宿主寄生能力下降; 第四节 菌种的衰退、复壮及保藏
一、菌种的衰退与复壮的概念 1.衰退(degeneration) :菌种在培养或保藏 过程中,由于自发突变的存在,出现某些原有 优良生产性状的劣化、遗传标记的丢失等现象, 称为菌种的衰退。 衰退的原因:①基因突变,②分离现象。 常见的衰退现象: 菌落和细胞形态的改变; 生长速度缓慢,产孢子越来越少; 抵抗力、抗不良环境能力减弱等。 代谢产物生产能力或其对宿主寄生能力下降; 第四节 菌种的衰退、复壮及保藏
2、 菌种的复壮(rejuvenation):使衰退的菌种 恢复原来优良性状。狭义的复壮是指在菌种已发生衰退的情况 下,通过纯种分离和生产性能测定等方法,从衰退的群体中找 出未衰退的个体,以达到恢复该菌原有典型性状的措施;广义 的复壮是指在菌种的生产性能未衰退前就有意识的经常、进行 纯种的分离和生产性能测定工作,以期菌种的生产性能逐步提 高。实际上是利用自发突变(正变)不断地从生产中选种 菌种的复壮措施: ①纯种分离:(平板划线法、涂布法、倾注法、单细胞挑取法等)。 ②通过寄主体内生长进行复壮(如Bacillus thuringiensis的复壮) ; ③淘汰已衰退的个体(采用比较激烈的理化条件进行处理,以杀死生命力较 差的已衰退个体)。 ④采用有效的菌种保藏方法
2、 菌种的复壮(rejuvenation):使衰退的菌种 恢复原来优良性状。狭义的复壮是指在菌种已发生衰退的情况 下,通过纯种分离和生产性能测定等方法,从衰退的群体中找 出未衰退的个体,以达到恢复该菌原有典型性状的措施;广义 的复壮是指在菌种的生产性能未衰退前就有意识的经常、进行 纯种的分离和生产性能测定工作,以期菌种的生产性能逐步提 高。实际上是利用自发突变(正变)不断地从生产中选种 菌种的复壮措施: ①纯种分离:(平板划线法、涂布法、倾注法、单细胞挑取法等)。 ②通过寄主体内生长进行复壮(如Bacillus thuringiensis的复壮) ; ③淘汰已衰退的个体(采用比较激烈的理化条件进行处理,以杀死生命力较 差的已衰退个体)。 ④采用有效的菌种保藏方法
3、防止菌种衰退的方法: ①控制传代次数(一般在DNA的复制过程中,碱基的错配 率是5x10-4,自发突变的频率为10-8~10-9,采用良好的菌种保藏方法, 可以减少移种和传代的数); ②选择合适的培养条件; ③采用不同类型的细胞进行传代(对丝状微生 物而言,通常采用稳定的单核孢子进行接种); ④采用有效的菌种保藏方法
3、防止菌种衰退的方法: ①控制传代次数(一般在DNA的复制过程中,碱基的错配 率是5x10-4,自发突变的频率为10-8~10-9,采用良好的菌种保藏方法, 可以减少移种和传代的数); ②选择合适的培养条件; ③采用不同类型的细胞进行传代(对丝状微生 物而言,通常采用稳定的单核孢子进行接种); ④采用有效的菌种保藏方法
二、菌种保藏: 1. 目的: ①存活,不丢失,不污染 ②防止优良性状丧失 ③随时为生产、科研提供优良菌种 2. 原理:选用优良的纯种,(最好是休眠体,如分生 孢子、芽胞等),创造降低微生物代谢活动强度,生 长繁殖受抑制,难以发生突变的环境条件。(其环境 要素是干燥、低温、缺氧、缺营养 以及添加保护剂等)
二、菌种保藏: 1. 目的: ①存活,不丢失,不污染 ②防止优良性状丧失 ③随时为生产、科研提供优良菌种 2. 原理:选用优良的纯种,(最好是休眠体,如分生 孢子、芽胞等),创造降低微生物代谢活动强度,生 长繁殖受抑制,难以发生突变的环境条件。(其环境 要素是干燥、低温、缺氧、缺营养 以及添加保护剂等)
菌 连续在培养基上(内)移种 种 生活态 传代培养保藏法 连续在活宿主上(内)移种 保 固体斜面 藏 湿法 半固体琼脂柱 方 休眠态 液体介质(蒸馏水、糖液、其它溶液) 法 干法 藏在玻璃管内 吸附在合适的载体上 3.菌种保藏的方法
菌 连续在培养基上(内)移种 种 生活态 传代培养保藏法 连续在活宿主上(内)移种 保 固体斜面 藏 湿法 半固体琼脂柱 方 休眠态 液体介质(蒸馏水、糖液、其它溶液) 法 干法 藏在玻璃管内 吸附在合适的载体上 3.菌种保藏的方法