本页内容来自网络 罗氏454焦磷酸测序 Roche GS FLX System是基于焦磷酸测序原理的高通量基因 组测序系统。测序时使用一种叫做"Pico TiterPlate”(PTP ) 的平板,它含有160多万个由光纤组成的孔,孔中载有化学发 光反应所需的各种酶和底物。测序开始时,放置在四个单独的 试剂瓶里的四种碱基,依照T、A、C、G的顺序依次循环进入 PTP板,每次只进入一个碱基。如果发生碱基配对,就会释放 一个焦磷酸。这个焦磷酸在各种酶的作用下,经过一个合成反 应和一个化学发光反应,最终将荧光素氧化成氧化荧光素,同 时释放出光信号。此反应释放出的光信号实时被仪器配置的高 灵敏度CCD捕获到。有一个碱基和测序模板进行配对,就会捕 获到一分子的光信号;由此一一对应,就可以准确、快速地确 定待测模板的碱基序列。 454新一代测序仪曾被《Nature》杂志以里程碑事件报道,开创了边合成边 测序的先河。 Chen Feng,Lecture of Microbiology
Chen Feng, Lecture of Microbiology 罗氏454焦磷酸测序 Roche GS FLX System是基于焦磷酸测序原理的高通量基因 组测序系统。测序时使用一种叫做“Pico TiterPlate”(PTP) 的平板,它含有160多万个由光纤组成的孔,孔中载有化学发 光反应所需的各种酶和底物。测序开始时,放置在四个单独的 试剂瓶里的四种碱基,依照T、A、C、G的顺序依次循环进入 PTP板,每次只进入一个碱基。如果发生碱基配对,就会释放 一个焦磷酸。这个焦磷酸在各种酶的作用下,经过一个合成反 应和一个化学发光反应,最终将荧光素氧化成氧化荧光素,同 时释放出光信号。此反应释放出的光信号实时被仪器配置的高 灵敏度CCD捕获到。有一个碱基和测序模板进行配对,就会捕 获到一分子的光信号;由此一一对应,就可以准确、快速地确 定待测模板的碱基序列。 454新一代测序仪曾被《Nature》杂志以里程碑事件报道,开创了边合成边 测序的先河。 本页内容来自网络
Roche 454/GS FLX Sequencing Technology 1.Samples consisting of longer sequences are first sheared into a random library of 300-800 base-pair long fragments. From:https://www.dkfz.de/gpcf/223.html Chen Feng,Lecture of Microbiology
Chen Feng, Lecture of Microbiology Roche 454/GS FLX Sequencing Technology 1. Samples consisting of longer sequences are first sheared into a random library of 300-800 base-pair long fragments. From: https://www.dkfz.de/gpcf/223.html