第三章高效液相色谱法 high performance liquid chromatography, HPLC
第三章 高效液相色谱法 high performance liquid chromatography，HPLC
概述 1. HPLC: 是以高压输送流动相,采用高效固定相 和高灵敏度检测器,在经典液相色谱 法的基础上发展而成的一种现代液相 色谱分离分析技术
一 . 概述 1．HPLC： 是以高压输送流动相，采用高效固定相 和高灵敏度检测器，在经典液相色谱 法的基础上发展而成的一种现代液相 色谱分离分析技术
2.经典液相色谱 ■主要指经典填充柱液相色谱。 n一般使用大于100μm粒经的多孔吸附剂作为固 定相,固定相的粒径范围较宽; 色谱柱内径一般为10-20mm; ■流动相依靠重力作用自上而下通过色谱固定相, 分离速度慢;
2．经典液相色谱 主要指经典填充柱液相色谱。 一般使用大于100μm粒经的多孔吸附剂作为固 定相，固定相的粒径范围较宽； 色谱柱内径一般为10-20mm； 流动相依靠重力作用自上而下通过色谱固定相， 分离速度慢；
2.经典液相色谱 ■色谱系统传质阻力大,纵向扩散明显,柱效 色谱柱填充、样品收集等为手工操作,自动 化水平不高; 不需特殊仪器设备,成本低,适用于样品的 初步分离、纯品制备等
2．经典液相色谱 色谱系统传质阻力大，纵向扩散明显，柱效 低； 色谱柱填充、样品收集等为手工操作，自动 化水平不高； 不需特殊仪器设备，成本低，适用于样品的 初步分离、纯品制备等
3.HPLC优点 与经典液相色谱比较: 1)固定相颗粒极细(一般小于10μm),粒度 规则均匀,传质阻力小,柱效高,分离效率 2)采用高压泵输送流动相,流速快,分析速 度快; 3)采用高灵敏度检测器,在线检测,自动化 程度髙,定量准确、精密度高
3．HPLC优点 与经典液相色谱比较： 1) 固定相颗粒极细（一般小于10μm），粒度 规则均匀，传质阻力小，柱效高，分离效率 高； 2) 采用高压泵输送流动相，流速快，分析速 度快； 3) 采用高灵敏度检测器，在线检测，自动化 程度高，定量准确、精密度高