实验二食品中淀粉的测定 第一法酶水解法 第二法酸水解法
实验二 食品中淀粉的测定 第一法 酶水解法 第二法 酸水解法
第一法酶水解法 一、目的与要求： 1、了解食品中淀粉含量的分析原理及分析方 法。 2 掌握用酶水解法和酸水解法测定淀粉的方 法。 、 实验原理 ■样品经除去脂肪及可溶性糖类后，其中淀粉用 淀粉酶水解成双糖，再用盐酸将双糖水解成单 糖，最后按还原糖测定，并折算成淀粉
第一法 酶水解法 ◼ 一、目的与要求： ◼ 1、了解食品中淀粉含量的分析原理及分析方 法。 ◼ 2、掌握用酶水解法和酸水解法测定淀粉的方 法。 ◼ 二、实验原理 ◼ 样品经除去脂肪及可溶性糖类后，其中淀粉用 淀粉酶水解成双糖，再用盐酸将双糖水解成单 糖，最后按还原糖测定，并折算成淀粉
三、试剂 1、 0.5%淀粉酶溶液 2、碘溶液 3、 乙醚 ■4、 85%乙醇 ■5、6N盐酸 ■6、 甲基红指示液 ■7、20%氢氧化钠溶液。 ■8、} 碱性酒石酸铜甲液 ■9、碱性酒石酸铜乙液 ■10、0.1000N高锰酸钾标准溶液 ■11、硫酸铁溶液
三、试剂 ◼ 1、0.5％淀粉酶溶液 ◼ 2、碘溶液 ◼ 3、乙醚 ◼ 4、85％乙醇 ◼ 5、6N盐酸 ◼ 6、甲基红指示液 ◼ 7、20％氢氧化钠溶液。 ◼ 8、碱性酒石酸铜甲液 ◼ 9、碱性酒石酸铜乙液 ◼ 10、0.1000N高锰酸钾标准溶液 ◼ 11、硫酸铁溶液
四、操作方法 1、样品处理：称取2-5克样品， 置于放有折叠滤纸的漏斗内， 先用50毫升乙瞇分5次洗除脂肪，再用约100毫升85%乙醇洗 去可溶性糖类，将残留物移入250毫升烧杯内，并用50毫升 水洗滤纸及漏斗，洗液并入烧杯内，将烧杯置沸水浴上加热 15分钟，使淀粉糊化，放冷至60C以下，加20毫升淀粉酶溶 液，在55-60℃保温1小时，并时时搅拌。然后取1滴此液加1 滴溶液，应不显现蓝色，若显蓝色，再加热糊化并加20毫升 淀粉酶溶液，继续保温，直至加碘不显蓝色为止。加热至沸， 冷后移入250毫升容量瓶中，并加水至刻度，混匀，过滤， 弃去初滤液。取50毫升滤液，置于250毫升锥形瓶中，并加 水至刻度，沸水浴中回流1小时，冷后加2滴甲基红指示液， 用20%氢氧化钠溶液中和至中性，溶液转入100毫升容量瓶 中，洗涤锥形瓶，洗液并人100毫升容量瓶中，加水至刻度， 混匀备用
四、操作方法 ◼ 1、样品处理： 称取2-5克样品，置于放有折叠滤纸的漏斗内， 先用50毫升乙醚分5次洗除脂肪，再用约100毫升85％乙醇洗 去可溶性糖类，将残留物移入250毫升烧杯内，并用50毫升 水洗滤纸及漏斗，洗液并入烧杯内，将烧杯置沸水浴上加热 15分钟，使淀粉糊化，放冷至60℃以下，加20毫升淀粉酶溶 液，在55-60℃保温1小时，并时时搅拌。然后取1滴此液加1 滴溶液，应不显现蓝色，若显蓝色，再加热糊化并加20毫升 淀粉酶溶液，继续保温，直至加碘不显蓝色为止。加热至沸， 冷后移入250毫升容量瓶中，并加水至刻度，混匀，过滤， 弃去初滤液。取50毫升滤液，置于250毫升锥形瓶中，并加 水至刻度，沸水浴中回流1小时，冷后加2滴甲基红指示液， 用20％氢氧化钠溶液中和至中性，溶液转入100毫升容量瓶 中，洗涤锥形瓶，洗液并人100毫升容量瓶中，加水至刻度， 混匀备用
2、测定：吸取50毫升处理后的样品溶液，于 400毫升烧杯内，加入25毫升碱性酒石酸铜甲 液及25毫升乙液，于烧杯上盖一表面皿，加热， 控制，在4分钟内沸腾，再准确煮沸2分钟，趁 热用铺好石棉的古氏坩埚或C4垂融坩埚抽滤， 并用60°℃热水洗涤烧杯及沉淀，至洗液不呈碱 性为止。将古氏坩埚或垂融坩埚放回原400毫 升烧杯中，加25毫升硫酸铁溶液及25毫升水， 用玻棒搅拌使氧化亚铜完全溶解，以0.1000N 高锰酸钾标准溶液滴定至微红色为终点。 同时量取50毫升水及与样品处理时相同量 的淀粉酶溶液，按同一方法做试剂空白实验
◼ 2、测定：吸取50毫升处理后的样品溶液，于 400毫升烧杯内，加入25毫升碱性酒石酸铜甲 液及25毫升乙液，于烧杯上盖一表面皿，加热， 控制，在4分钟内沸腾，再准确煮沸2分钟，趁 热用铺好石棉的古氏坩埚或c4垂融坩埚抽滤， 并用60℃热水洗涤烧杯及沉淀，至洗液不呈碱 性为止。将古氏坩埚或垂融坩埚放回原400毫 升烧杯中，加25毫升硫酸铁溶液及25毫升水， 用玻棒搅拌使氧化亚铜完全溶解，以0.1000N 高锰酸钾标准溶液滴定至微红色为终点。 同时量取50毫升水及与样品处理时相同量 的淀粉酶溶液，按同一方法做试剂空白实验